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利用酵母双杂交系统鉴定羽衣甘蓝臂重复蛋白(ARC1)与结球甘蓝S位点受体激酶(SRK)激酶结构域的相互作用 总被引:1,自引:1,他引:1
S位点受体激酶(SRK)和臂重复蛋白(ARC1)是芸薹属植物自交不亲和反应的两种重要的信号元件,SRK-ARC1之间的互作决定着自交不亲和反应的进程。本研究利用PCR技术获得结球甘蓝(Brassicaoleracea var.capitata)SRK激酶结构域(SRKJ)的编码区以及羽衣甘蓝(B.oleracea var.acephala)ARC1基因不同片段长度的基因组DNA与编码区,分别构建以pGBKT7为载体的长度依次递减的ARC1a、ARC1b、ARC1c和ARC1d的重组诱饵质粒和以pGADT7为载体的SRKJ的重组猎物质粒,并将重组质粒转化酵母菌株进行蛋白质相互作用检测。结果显示:羽衣甘蓝ARC1存在5个连续的臂重复区,与结球甘蓝ARC1的氨基酸序列一致性达到98%;构建的重组表达载体在酵母细胞中无毒性和自激活作用产生;3个实验组Y2HGold[pGBKT7-ARC1a]×Y187[pGADT7-SRKJ]、Y2HGold[pGBKT7-ARC1c]×Y187[pGADT7-SRKJ]和Y2HGold[pGBKT7-ARC1d]×Y187[pGADT7-SRKJ]同时激活了4种报告基因AUR1-C... 相似文献
83.
[目的]构建玉米胚芽鞘负向重力生长时期的酵母双杂交文库,并对其进行评价。[方法]以玉米骨干自交系B73为材料,利用Trizol试剂提取玉米胚芽鞘在负向生长时期所表达的总RNA,再利用SMART技术构建酵母双杂交文库,并转化进酵母Y187中。[结果]试验得到的原始文库库容量高达1×106个单克隆;文库中插入的片段集中在0.5~1.5 kb,平均插入长度为800 bp。[结论]试验构建得到了高质量的米胚芽鞘酵母双杂交文库,为研究胚芽鞘的负向重力反应机制奠定了基础。 相似文献
84.
酵母培养物对泌乳中期荷斯坦奶牛产奶量及乳品质的影响 总被引:1,自引:0,他引:1
本试验旨在研究酵母培养物对泌乳中期荷斯坦奶牛产奶量及乳品质的影响。选用20头处于泌乳中期的荷斯坦奶牛按年龄、胎次、泌乳月、日产奶量和乳成分相近的原则,随机分成两组,对照组饲喂基础日粮,试验组在对照组日粮的基础上添加120g/(d.头)的酵母培养物,预试期7 d,正试期42 d,测定试验组与对照组的日产奶量和各种乳成分的变化情况。结果表明:酵母培养物可以有效缓解泌乳中期奶牛日产奶量的下降,与对照组相比,日粮中添加酵母培养物42 d后产奶量显著提高了12.8%(P<0.05),乳蛋白率、乳糖率、乳非脂固形物率和乳密度分别极显著提高了8.2%、6.8%、7.9%和11.7%(P<0.01)。总体显示,酵母培养物对于提高泌乳中期荷斯坦奶牛的产奶性能和改善乳品质方面效果明显。 相似文献
85.
酵母单杂交技术是一种体外分析DNA与蛋白质相互作用的技术。文章就酵母单杂交技术的原理、操作步骤、应用及其优缺点作了简要概括。 相似文献
86.
GmFT2a是大豆光周期反应中的关键基因,为研究其表达调控的分子机制,以光周期敏感品种自贡冬豆和钝感品种黑河27为材料,比较分析两品种Gm FT2a启动子序列的差异,发现在自贡冬豆GmFT2a启动子区存在两个含有光反应元件的插入片段T1和T2,而黑河27无上述片段。根据光响应元件I-box和Sp1的序列,构建诱饵载体,利用酵母单杂交技术筛选自贡冬豆叶片cDNA文库,获得一个与T1元件结合的MYB转录因子。该转录因子的获得为进一步研究GmFT2a表达调控的分子机制提供了新的线索。 相似文献
87.
酵母多糖对鲤鱼生长和免疫功能的影响 总被引:2,自引:0,他引:2
[目的]研究酵母多糖对鲤鱼生长和免疫功能的影响。[方法]用经超声提取的酵母多糖作为饲料添加剂。试验鲤鱼适应性驯化2周,对照组投喂基础饲料,试验组投喂添加0.1%酵母多糖饲料,每日投饵量均为体重2%,每天在9:00、20:00投喂2次,每次投饵1h后取出残饵。饲喂30d后测定鲤鱼的生长性能、摄食能力,白细胞吞噬功能、脾脏指数、血清溶血素活力、血清杀菌活力等。[结果]基础饲料中添加酵母多糖后,鲤鱼的生长性能和免疫功能相关指标都较对照组显著提高。[结论]为酵母多糖相关产品的开发应用提供试验依据。 相似文献
88.
NPR1是水杨酸介导的系统获得性抗性(SAR)途径中不可或缺的一个转录辅助因子。在SA诱导下,NPR1被转运至细胞核内并与一些转录因子结合,以启动下游基因的表达。本研究通过PCR扩增获得拟南芥中NPR1基因CDS序列,经过限制性内切酶酶切后在T4连接酶作用下分别克隆至pGBKT7与pGADT7酵母表达载体上,并成功将其转化至Gold酵母菌株中。为利用酵母双杂交筛选NPR1参与形成的转录复合体中其它可能存在的蛋白质并阐明其在植物防御信号传导途径中的互作模式奠定了基础。 相似文献
89.
为筛选与小麦黄花叶病毒外壳蛋白(wheat yellow mosaic virus coat protein,WYMV-CP)互作的小麦蛋白,构建了小麦茎叶酵母双杂交cDNA文库,并从中筛选获得了与WYMV-CP互作的小麦蛋白基因片段。从小麦茎叶中提取小麦总RNA,分离mRNA后,利用GATE-WAY技术将反转录得到的小麦cDNA片段定向转移到目的载体,同源重组反应后成功构建小麦cDNA文库。经检测,小麦cDNA文库的滴度为5.86×106 CFU·mL-1,库容量为2.34×107 CFU,重组率为95.8%。根据NCBI上WYMV-CP开放阅读框信息,构建了诱饵载体pGBK-CP,通过酵母双杂交筛选获得了若干阳性克隆,共转化试验初步验证了WYMV-CP与PEPCK、PAL等蛋白的互作关系。本研究利用酵母双杂交技术成功获得与WYMV-CP互作的小麦蛋白基因片段,为明确WYMV的致病机制提供了科学的依据。 相似文献
90.
Cookie is one of the favorite cereal products which could be formulated by using various ingredients for enrichment. The aim of this study was to determine the effects of the inactivate yeast cells addition to cookie formulation in terms of glutathione (GSH) content, antioxidant activities, physicochemical and sensorial properties. Also, the cookies were produced with GSH (pure, 98%) addition to compare the effects of inactive yeast GSH with pure GSH on revealed properties. According to results, The GSH contents and the antioxidant activities increased in dough and cookie samples with inactive yeast addition compared to control and pure GSH added dough and cookie samples. The increases in GSH contents and antioxidant activities were observed after baking in all samples. The pure GSH addition increased the moisture content, spread ratio and L* value while decreased the hardness and b* values of the cookies. The contrary results were obtained by inactive yeast addition in terms of the physicochemical properties where the protein content of the cookies increased with inactive yeast addition by approximately 25%. The loss of GSH content decreased while the antioxidant activities and nutritional value increased in cookies by inactivate yeast addition. 相似文献