高淀粉甘薯大面积超高产机械化种植模式研究

概述了2009~2010年江苏省徐州市铜山区柳新农场甘薯新品种徐薯27超高产的机械化种植模式。简要介绍了育苗、种植、栽插、收获和贮藏的模式,从高淀粉甘薯新品种的选择、主要栽培技术和经济效益分析入手,全面总结了高淀粉甘薯大面积超高产机械化栽培种植模式的成功经验,现已推广到江苏省宿迁市(种植面积100 hm2)、山东省济宁市(种植面积150 hm2)和河南省周口市(种植面积200 hm2)3个地方。2010年种植经济效益均在2.7万元/hm2左右。     

森林草莓独脚金内酯合成关键基因D27的克隆与表达分析

根据森林草莓中独角金内酯合成过程中的关键基因D27的序列信息设计引物,获得了D27基因的完整开放阅读框架。采用MEGA5.0软件,对森林草莓与其他物种D27基因编码的氨基酸序列进行聚类分析,发现森林草莓D27基因与其他物种D27基因具有较高的同源性。设置正常供磷、缺磷和在缺磷条件下接种丛枝状菌根真菌处理,利用电感耦合等离子发射光谱仪测定草莓植株的磷含量,结果表明缺磷条件下接种丛枝状菌根真菌,草莓植株中磷含量极显著提高,而缺磷处理的磷含量极显著降低。实时荧光定量PCR结果表明,与正常供磷处理相比,缺磷和接种丛枝状菌根真菌处理条件下,D27基因的表达量分别上调7倍和11倍,这说明D27基因的表达既受到磷水平调控,又受到菌根形成的调控。     

27%二甲戊灵·砜吡草唑乳油防治棉花田一年生杂草效果与安全性

为明确27%二甲戊灵·砜吡草唑乳油土壤封闭处理对棉花田一年生杂草的防效及对棉花的安全性,采用随机区组的试验方法进行田间药效试验。结果表明,27%二甲戊灵·砜吡草唑乳油对棉花田主要杂草马唐、牛筋草、马齿苋、反枝苋均有较好的防除效果,在有效成分用量为607.5、810、1012.5、1620 g a.i./hm²条件下,药后40天总鲜种防效为86.1%、91.7%、96.7%、99.3%,防治效果较好,棉花的增产率为26.04%~28.87%。因此,27%二甲戊灵·砜吡草唑乳油可采用土壤喷雾防除棉田杂草,对棉花安全,推荐剂量为607.5~1012.5 g a.i./hm²。     

毛栓菌27-1漆酶对酚酸类化合物降解的效能分析

探究毛栓菌27-1漆酶对酚酸类化合物的降解效能,为竹林地酚酸类自毒物质降解提供依据。采用超高效液相色谱检测法,通过测定菌液处理后酚酸含量变化,研究毛栓菌27-1漆酶对10种酚酸类化合物的降解特性。结果表明,毛栓菌27-1漆酶能完全降解酚酸类化合物中的香草酸、咖啡酸和芥子酸;丁香酸、阿魏酸和龙胆酸的降解效果一般,降解率50%左右;原儿茶酸的降解效果较差,降解率达35%;不能降解香豆酸、对羟基苯甲酸和绿原酸。研究不同条件下毛栓菌27-1漆酶降解酚酸类化合物丁香酸的效能,发现在pH 5、温度30℃、丁香酸初始浓度小于100 mg/L时,菌株对丁香酸具有高效降解能力,ABTS溶液作为介体物质加入降解体系后降解效果更好,在浓度为0.5 mmol/L时,降解率可达到100%。毛栓菌27-1产生的漆酶对酚酸类化合物具有良好降解效能。     

Morphological changes in the small intestinal smooth muscle layers of horses suffering from small intestinal strangulation. Is there a basis for predisposition for reduced contractility?

Reasons for performing study: Intestinal strangulation often leads to enterectomy after which ileus can develop. This has prompted research to look into possible pathophysiological processes triggering equine ileus. However, morphological changes of the small intestinal smooth muscle in relation to equine colic have not yet been studied. Objectives: The presence of some smooth muscle proteins was morphologically assessed and quantified in control and colic horses. In addition, the up‐ or down‐regulation of heat shock proteins (HSP20 and HSP27) influencing the contractility of smooth muscles was studied. Methods: Cranial resection margins of 18 strangulated small intestinal samples were collected. Small intestinal control samples were collected from 11 horses subjected to euthanasia for other than gastrointestinal‐related reasons. Formaldehyde‐fixed tissue was paraffin‐embedded and processed for conventional staining and immunohistochemistry. Snap‐frozen full‐thickness biopsies were collected for western blot analyses. Results: Evaluating the muscle layer microscopically, colic samples showed significantly more signs of degradation than controls (P = 0.026) of which vacuolar degeneration was most prominent (P = 0.009). In colic samples, myosin protein levels were decreased (P = 0.022) whereas desmin (P = 0.049) and HSP20 protein levels (P = 0.005) were elevated. Conclusions: In colic samples, microscopic lesions at the level of the muscle layer indicate a stress response. In addition, modified amounts of structural proteins such as myosin and desmin together with increased HSP20 levels could perhaps provide a basis for explaining the malfunctioning of the intestinal muscle layer. Potential relevance: Post operative ileus, following small intestinal strangulation and resection, could be related in part to a dysfunctional muscle layer. In addition to microscopic signs of degeneration, myosin and HSP20 were affected. Pharmacological interventions might alter HSP20 expressions and thus serve a protective effect.     

结核分枝杆菌蛋白TB9.7间接ELISA方法的建立

为获得新的鉴别诊断结核杆菌感染的候选抗原,根据Gene Bank中登录的结核杆菌H37Rv的TB 9.7基因序列设计1对引物,以结核杆菌H37Rv基因组DNA为模板,PCR扩增得到TB 9.7基因DNA片段。将该扩增片段克隆于PMD18-T载体中,得到载体PMD18-T-TB9.7。分别将pET32a质粒和PMD18-T-TB 9.7质粒用限制性内切酶EcoRⅠ和XhoⅠ双酶切,并将纯化的TB 9.7基因亚克隆至pET32a中,获得重组表达质粒pET32a-TB 9.7。将其转化E.coli BL21 IPTG诱导后,经SDS-PAGE、Western blot分析鉴定,可见约30ku的外源蛋白带。表明TB9.7基因在大肠杆菌中得到了表达。用Ni-NTA Agarose试剂盒进行蛋白纯化,获得纯化的TB9.7融合蛋白,建立间接ELISA诊断方法,检测了30份结核病人的痰检阳性血清,120份健康人的血清,敏感性为56.6%,特异性为97%,与痰检结果的符合率为84%。     

禽白血病病毒ELISA检测方法的建立与初步应用

本研究以在毕赤酵母系统中表达并纯化的p27重组蛋白为包被抗原,HRP标记的兔抗鸡IgY为酶标二抗,建立了一种快速有效的禽蛋白血病病毒ELISA检测方法,并对其反应条件进行优化。结果显示,该方法具有良好的特异性和重复性;与市售商品试剂盒相比,符合率为96.92%,且更为敏感。应用建立的ELISA方法检测来自吉林省内鸡场314份疑似样品,阳性检出率为75.15%。本研究为禽白血病病毒的检测与诊断提供了一种简便、有效的检测方法。     

HSP27基因在牦牛卵母细胞和体外早期胚胎中的表达

为了探讨牦牛HSP27(heat shock proteins27, HSP27)基因在牦牛卵母细胞和早期孤雌激活胚胎中的表达情况及定位,本试验通过实时荧光定量PCR检测牦牛HSP27基因在未成熟卵母细胞和成熟卵母细胞以及孤雌激活不同时期胚胎中的相对表达量,用免疫荧光染色法检测HSP27蛋白在未成熟卵母细胞和成熟卵母细胞以及孤雌激活不同时期胚胎中的表达与定位情况。结果显示,HSP27基因在牦牛未成熟卵母细胞和成熟卵母细胞以及体外培养孤雌激活不同时期胚胎中均可表达,其中在未成熟卵母细胞中的表达量显著高于成熟卵母细胞;在孤雌激活胚胎中,2~4细胞期表达量最高,囊胚期胚胎表达量最低,随着胚胎的发育,HSP27的表达量呈现逐渐降低的趋势;在2~4细胞期和囊胚期胚胎中的表达与其他组表达存在显著差异性,在5~8细胞期和桑椹胚中的表达无显著差异。免疫荧光染色结果表明,HSP27蛋白在牦牛卵丘细胞和卵母细胞中均有表达,在牦牛孤雌激活2~4细胞期、5~8细胞期和桑椹期胚胎中主要表达于细胞核内和细胞质中,在囊胚期主要表达于细胞核中;而HSP27蛋白的表达水平与基因表达水平基本一致。本研究为后续研究HSP27基因在牦牛生殖生理过程中的作用机制提供了参考。     

大肠癌中HSP27、p14^ARF和caspase-3蛋白的表达及意义

目的：探讨HSP27、p14^ARF和caspase-3蛋白在大肠癌中的表达及其与大肠癌I临床病理特征的关系。方法：利用sP法检测大肠癌48例和大肠腺瘤10例以及正常大肠黏膜组织15例中HSP27、p14^ARF和caspase-3蛋白的表达。结果：大肠癌组织中HSP27、p14^ARF和caspase-3蛋白阳性表达率分别为79．2％、58．4％和66．7％,大肠腺瘤组织中分别为40．0％、70．0％和100．0％,正常大肠黏膜组织中分别为33．3％、80．0％和93．3％。p14^ARF和caspase-3蛋白的表达在高、中分化癌组的表达率分别为64．1％、74．4％,明显高于低分化组22．2％、33．3％（Pd0．05）。结论：HSP27、p14^ARF和caspase-3与大肠癌的发生有关,可作为大肠癌临床评价肿瘤生物学行为的指标。     

龙岩市地方优良种禽原种场禽白血病p27抗原检测与分析

用酶联免疫吸附试验法对长汀河田鸡原种场、武平象洞鸡原种场、龙岩山麻鸭原种场共686份蛋清样本及801份泄殖腔棉拭子进行禽白血病p27抗原检测。结果为：龙岩山麻鸭的蛋清样本和泄殖腔棉拭子均未检出ALV核酸;鸡蛋清样本阳性率为12.8%（80/626）,明显高于泄殖腔棉拭子阳性率8.9%(66/741);鸡原种场180日龄蛋清样本和泄殖腔棉拭子阳性率均最高,平均阳性率分别为15.0%和11.3%。表明：龙岩市境内地方优良鸡原种场中有禽白血病感染现象。