甘蓝型油菜花序长发夹ｌｈＲＮＡｉ文库的构建

异源四倍体油菜含有大量多拷贝基因及冗余基因,难以通过T-DNA插入、物理及化学诱变等常规突变体库创制方法发掘功能基因。为开发适应于油菜的简单高效的突变体库创制方法,本研究通过滚环复制方法构建了甘蓝型油菜的花序lhRNAi文库,并对这种新型的干扰文库进行质量评估;然后将该花序lhRNAi文库对甘蓝型油菜进行遗传转化,获得763株T0植株,从中鉴定分离出74株具有可见表型变异的花发育相关突变体,包括花瓣减少、形状异常,柱头卷曲,雄蕊退化萎缩,雄性不育（不能产生花粉）、死蕾或花蕾闭合等。说明通过滚环复制介导的lihRNAi文库的构建方法可以成功应用到油菜中,这将为油菜花序发育相关基因功能的研究提供重要的研究平台。     

Stemflow in three shrubs and its effect on soil water enhancement in semiarid loess region of China

Stemflow of three semiarid shrubs (Tamarix ramosissima, Caragana korshinskii and Reaumuria soongorica) and its effect on soil water enhancement were evaluated during the growing season of 2004 and 2005 in the semiarid loess region of China. The results indicated that stemflow averaged 2.2%, 3.7% and 7.2% of the bulk precipitation for T. ramosissima, R. soongorica and C. korshinskii, respectively. Individual stemflow increased in a linear function with increasing rainfall depth, while it tended to increase with rain intensity when rain intensity was less than 2 mm h⁻¹, but showed an opposite trend when rain intensity was greater than 2 mm h⁻¹.The relationship between funnelling ratios and rainfall suggested that there existed a rainfall depth threshold of 11 mm for C. korshinskii and 17 mm for both T. ramosissima and R. soongorica. Funnelling ratios positively increased with increasing rainfall depth before the rainfall depth threshold values had been reached but showed a decreasing trend after the rainfall depth threshold. Average funnelling ratios were 153.5 ± 66.2, 53.2 ± 25.7 and 24.8 ± 15.3 for C. korshinskii, R. soongorica and T. ramosissima, respectively, indicating canopy architecture of the three shrubs was an effective funnel to channel stemflow to the root area, and C. korshinskii showed greater potential to use stemflow water in the arid conditions. For individual rainfall events the wetting front depths in the rooting zone around the stems of the shrubs were 1.2–4.5, 1.4–3.8 and 1.4–2.8 times deeper than that in the bare area outside canopy for C. korshinskii, T. ramosissima and R. soongorica, respectively; correspondingly, soil water content was also significantly higher in the root area around the shrub stem than that in the area outside the shrub canopy. This confirms that shrub stemflow conserved in the deep soil layers may be an available moisture source for plant growth under arid conditions.     

中国土壤生物学研究的回顾与展望

土壤生物是土壤发生与发展的重要推动力,是土壤生态系统中最为活跃的组成部分。本文在系统查阅近10年来国内外土壤生物学文献的基础上,分析了中国土壤生物学研究的现状特点,从土壤生态学、土壤生物化学、土壤微生物学、土壤?植物系统、土壤动物学几个方面概括了土壤生物学研究的主要进展。结合国际土壤科学发展的前沿和热点问题,建议重点开展土壤生物与全球环境变化、土壤生物与土壤质量、土壤生物多样性与生态功能、微生物宏基因组学与活性物质开发、土壤污染与生物修复、土壤酶学与元蛋白质组技术等方面的研究。     

山药PAL基因全长cDNA序列的克隆、表达与分析

为了阐明苯丙氨酸解氨酶(PAL,EC4.3.1.5)基因在山药地下块茎酚类物质积累过程中的分子机理,本研究运用普通PCR、RACE和TAIL-PCR技术从大薯(Dioscorea alataL.)’Zixiao’地下块茎中克隆到同一个PAL基因的3个片段,即长度分别为1 145bp、1 151bp和424bp的中间片段、3’端和5’端的cDNA序列;将3段cDNA序列拼接后获得大小为2 376bp的PAL基因全长cDNA序列,该序列含有一个1986bp的最大开放阅读框(ORF),一个28bp的5’端非翻译区,一个362bp含25 nt的Poly(A+)尾的3’端非翻译区,最大ORF可推测编码一个包括PAL酶活性中心的特征序列(GTITASGDLVPLSYIA)在内的661个氨基酸的多肽,分子量为71.974kDa,等电点6.310;大薯地下块茎的PAL基因分别在核苷酸与氨基酸水平上和GenBank中所选已知其他物种的同源性为73%~77%和76%~82%,说明PAL基因在系统进化上相对保守;RT-PCR分析表明该基因仅在地下块茎中表达,而且表达丰度在收获前逐渐降低。     

苏云金芽胞杆菌杀虫晶体蛋白Cry7Ba1溶解性分子改良

苏云金芽胞杆菌（Bacillus thuringiensis）杀虫晶体蛋白Cry7Ba1需要在强碱性缓冲液中（pH12.5）才能溶解,而且只有溶解后才能对小菜蛾（Plutella xvlostella）表现出毒力,其LC50为1.33μg/mL。分别用Cry1Ac和Cry1C晶体蛋白的C-半段替换Cry7Ba1的C-半段,结果发现当Cry7Ba1的C-半段被替换后,重组晶体蛋白与Cry1Ac和Cry1C等其它晶体蛋白一样在弱碱性条件下（pH9.5）能有效溶解,而且重组晶体蛋白对小菜蛾的杀虫活性没有发生明显变化,其LC50分别为1.32和1.39μg/mL。结果还显示重组晶体蛋白不需要经过体外溶解就能对小菜蛾表现出杀虫活性。研究结果揭示Cry7Ba1晶体蛋白难溶的特性是由其C-半段结构决定的,通过改变其C-半段结构改善溶解性,为该晶体蛋白在害虫生物防治中的应用提供了可能。     

网络环境下高校图书馆学科馆员制度建设

本文论述了实施学科馆员制度的必要性、实施方法、学科馆员的工作职责和发展方向。     

图书馆计算机房的电磁屏蔽

简述计算机房电磁环境的复杂性以及对计算机房电磁屏蔽设计的要点,阐述图书馆计算机房电磁屏蔽的必要性,提出对图书馆计算机房进行电磁屏蔽的设计方法,并举例进行了说明。     

中国食用菌电子商务平台开发与设计

探讨了利用ASP．NET及ADO．NET技术构建第三方食用菌行业电子商务平台（B2T2B）的方法和技巧。     

H7 亚型禽流感病毒 HA 蛋白在Sf9 中的表达与纯化

【目的】真核表达 H7 亚型禽流感病毒（Avian influenza virus, AIV）HA 蛋白,为进一步制备 H7 亚型 HIV 亚单位疫苗,评价其免疫原性提供基础。【方法】首先根据草地贪夜蛾卵巢细胞（Spodoptera frugiperda clone 9, Sf9）的密码子偏嗜性,优化并合成 H7 亚型 AIV 的 HA 序列,将其克隆至穿梭质粒 pFastBac1 中;接着将重组HA基因的杆状病毒质粒转染至 Sf9 中,通过间接免疫荧光和 Western blots 试验鉴定重组病毒是否拯救成功;再通过 SYBR green 染料法荧光定量 PCR 试验,建立基于 gp64 基因的杆状病毒 qPCR 定量方法,筛选出在 Sf9 中表达 HA 重组蛋白的最佳感染复数和孵育时间;最后通过 His 镍株亲和纯化 HA 重组蛋白。【结果】表达 H7 亚型 AIV HA 蛋白的重组杆状病毒在 Sf9 盲传 3 代后,Sf9 开始出现肿胀、脱落、死亡等细胞病变,表明重组杆状病毒拯救成功;通过间接免疫荧光和 Western blots 试验发现,Sf9 内出现可与 HA 重组蛋白特异性结合的绿色荧光信号,特异性结合的 HA 重组蛋白条带大小约 70 kD 左右,与预期相符,且 HA 重组蛋白可与 H7 亚型 AIV 阳性血清反应,表明 HA 重组蛋白表达成功;以构建的 pUC19-gp64 质粒为标准,建立基于 gp64 基因的杆状病毒qPCR 检测方法,该方法在 1×103~1×108 copy/μL 间呈现良好的线性关系,标准曲线的相关系数 R2=0.993;利用qPCR 检测方法对杆状病毒液滴度进行定量,并通过 Western blots 试验筛选 HA 蛋白表达的最佳感染复数和孵育时间,结果显示以 10 MOI 的比例接种 Sf9,孵育 72 h,蛋白表达效果最好;通过 His 镍株亲和纯化 HA 重组蛋白,蛋白浓度为 0.268 mg/mL,鸡红细胞凝集效价为 4 log2。【结论】本试验在 Sf9 中成功表达并纯化 H7 亚型 AIV HA 蛋白,并建立与之相应的杆状病毒荧光定量 PCR 检测方法,可为进一步评价 H7 亚单位疫苗的免疫原性提供参考。     

2022年凤阳县水稻品种展示试验初报

凤阳县近几年种子市场销售的杂交水稻品种众多,农民选种是个难题。农业部门为了筛选出适宜当地大面积推广的高产、优质、广适的水稻品种,2022年征集了全县种植面积较大的35个品种参加展示试验。通过专人负责田间管理、田间观察记载、室内考种、总结等,得出结论：徽两优166、Y两优1577、N两优1133、晶两优1377、Q两优851、诺两优6号、天龙两优140、韵两优332、Y两优808、徽两优粤农丝苗等10个品种的抗逆性、丰产性、适应性较好,可以在凤阳县大面积种植推广。