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根癌农杆菌转基因的分子机制 总被引:1,自引:0,他引:1
根癌农杆菌将T-DNA转移并插入寄主细胞的基因组,需要趋化与附着、vir区活化、T-DNA切割及转运、T-DNA整合及表达等步骤。本文对这些步骤分子机制的研究进展进行了综述。 相似文献
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Hiroyuki?Takahara Gento?Tsuji Yasuyuki?Kubo Mikihiro?Yamamoto Kazuhiro?Toyoda Yoshishige?Inagaki Yuki?Ichinose Tomonori?ShiraishiEmail author 《Journal of General Plant Pathology》2004,70(2):93-96
We transformed Colletotrichum trifolii, the causal agent of alfalfa anthracnose, using Agrobacterium tumefaciens as a new tool for random insertional mutagenesis. Fungal spores of C. trifolii were transformed with T-DNA including the hygromycin phosphotransferase gene (hph). Southern analysis showed that every randomly selected transformant had a unique hybridization pattern of T-DNA, suggesting that the T-DNA was randomly integrated into the fungal genome. More significantly, about 75% of transformants had a single copy of the T-DNA. The results demonstrate that insertional mutagenesis via A. tumefaciens is a useful tool for studying the function of C. trifolii genes. 相似文献
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根癌农杆菌介导转化法是植物基因工程的重要方法,但其转化效率受多种因子的影响,包括化学物质、物理方法、外植体遗传特性等,涉及农杆菌与植物互作的各个阶段。将这些影响因子及其功能进行简要综述,以期为优化农杆菌介导植物遗传转化流程提供帮助。 相似文献
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从T-DNA插入突变体中筛选到一个类病斑突变体AZT91,主要表现为生长缓慢、植株矮小、叶片出现条状褐斑,最后死亡。对突变体及其后代分离群体进行潮霉素抗性检测,证明该突变体是由T-DNA插入突变引起的,突变性状与T-DNA共分离。PCR和TAIL-PCR分析进一步证明了上述的观点。利用TAIL-PCR扩增了左边界侧翼序列,通过分析,初步推测该突变体可能是由于T-DNA插入后激活了单加氧酶基因的过量表达,破坏正常代谢途径,导致突变体死亡。该材料可用于水稻代谢调控机理的研究。 相似文献
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LI Gang LIU Ju-hua TAN Guang-lan XU Bi-yu JIN Zhi-qiang Institute of Tropical Bioscience Biotechnology Chinese Academy of Tropical Agricultural Sciences Haikou 《(《农业科学与技术》)编辑部》2008,(2)
[Objective] The aim of this study is to obtain transgenic Lilium longiflorum Thumb. [Method] A two-step method of explant and the T-DNA integration technique were employed to transform Lilium longiflorum via Agrobacterium mediated method. [Result] The best infection effect appeared under the OD600 value of Agrobacterium within 0.6-0.8,the addition of 250 mg/L AS could increase the transformation efficiency. The optimal concentration of G418 for screening is 50 mg/L. Some putative transgenic plants of Lilium longiflorum with resistance to G418 showed positive in PCR,preliminarily proving that T-DNA gene had integrated into the genome of lily. [Conclusion] The study may lay a foundation for breeding excellent lily varieties through T-DNA integration technique. 相似文献
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T-DNA插入产生的水稻小粒突变体遗传分析 总被引:2,自引:0,他引:2
[目的]研究水稻粒形突变体的遗传特性及其在水稻遗传改良中的作用。[方法]筛选水稻T-DNA插入纯合体,鉴定表型变异,通过表型突变的遗传分析及其与T-DNA插入共分离的检测,研究水稻表型突变的遗传特性。[结果]观察到1个粒形突变体T56。主要表现为粒长变短、粒宽变窄及千粒重降低;对该突变体进行遗传分析,分离群体出现野生型和突变体2种类型,其分离比符合3∶1,表明该突变体表型受1对隐性基因控制。突变体及其后代分离群体的Basta抗性检测和PCR分子检测结果表明,该突变体由T-DNA插入所引起,突变性状与T-DNA共分离。[结论]该材料可用于插入座位的基因克隆和水稻遗传改良的种质资源。 相似文献
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