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以EGFP为报告基因体外电穿孔转染鸡X期胚盘细胞,探讨适宜电转染条件以及影响鸡ES细胞存活率和转染率因素。分离鸡X期胚盘细胞进行培养、传代及鉴定,二代细胞设定不同的电压、脉冲时间、质粒浓度、细胞密度及孵育温度等条件转染。电击后10 min,0.4%台盼蓝染色,血细胞计数板计数,计算存活率。48 h后在荧光显微镜下计绿色荧光细胞数和总细胞数,计算转染率。结果表明:电转染鸡ES细胞的最优化电压为280 v,脉冲时间为75μs,质粒浓度为20μg/mL,转染前4℃、转染后25℃(室温)或4℃各静置10 min,细胞密度调整在1×105个/mL×106个/mL,尽量使细胞处于对数生长期。电穿孔法转染鸡ES细胞是简便有效的方法,利用优化条件转染ES细胞,可以满足进一步实验的要求。 相似文献
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Angkanaporn K. Ravindran V. Mollah Y. Bryden W.L. 《Veterinary research communications》1997,21(3):161-167
Angkanaporn, K., Ravindran, V., Mollah, Y. and Bryden, W.L., 1997. Secretion of homoarginine into the gut of chickens. Veterinary Research Communications, 21(3), 161-167A technique, based on the homoarginine present in guanidinated proteins, has been used to distinguish between endogenous secretions and exogenous dietary amino acids in the ileal digesta of monogastric animals. This technique assumes that the ingested homoarginine is not recycled into the small intestine after absorption, but this assumption is yet to be experimentally validated in chickens. The secretion of homoarginine into the gut of broilers that were intravenously infused with 20 and 40 mmol/L homoarginine solutions was assessed. The plasma concentrations of homoarginine increased with increasing concentrations of homoarginine infused. However, only negligible levels of homoarginine (7.0 to 45.2 µg/g dry matter) were found in the digesta. Less than 0.01% of the intravenously infused homoarginine was recovered in the intestinal digesta, indicating that the secretion of homoarginine into the gut of chickens was insignificant. 相似文献
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几种鸡胚原代细胞的制备方法 总被引:1,自引:0,他引:1
在病毒分离、繁殖,中和试验及药物毒理试验中,细胞培养是经常被选用的技术。本文描述通过选择不同日龄的鸡胚,分别对皮肤上皮细胞、肝细胞和肾细胞进行了组织培养,确定了生长所需的培养液要求。认为12日龄鸡胚适于皮肤上皮细胞的制备,17~20日龄鸡胚适合于肝细胞、肾细胞的制备,并确定了细胞生长的pH条件。 相似文献
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为探讨硒缺乏对鸡空肠中肥大细胞(MC)的形态学和超微结构的影响,将10只鸡随机分成低硒试验组(饲喂低硒日粮0.032 mg/kg)和正常对照组,在75日龄时断头处死立即取出空肠,进行甲苯胺蓝、长时间甲苯胺蓝、阿利新蓝-藏花红染色、阿利新蓝-高碘雪夫氏反应和醛品红-阿利新蓝5种染色并进行透射电镜观察.结果显示,采用不同染色方法所获得的MC数量、大小、形态、颜色及颗粒的黏多糖成分均不相同.电镜下,MC细胞胞浆内充盈大量的特征性颗粒,颗粒内容物呈均质状,电子密度高低不等,核圆形或椭圆形,胞质中可见高尔基复合体和较多的线粒体;试验组可见MC数量显著增加并与变性细胞紧密相邻,异染色质增多,核偏位或固缩,胞质稀疏,同时可见MC内颗粒内容物释放后的空隙或空泡.因此,组化染色提示肥大细胞存在不同亚型;试验组MC数量明显增加,这提示MC是重要的免疫细胞之一,在机体的免疫调节中发挥着重要的作用. 相似文献
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《The Journal of Applied Poultry Research》2007,16(3):456-463
The present study was designed to evaluate the effect of individual or simultaneous application of 2 products, a competitive exclusion culture (CEC) or Megan Vac 1 (MV), for bioefficacy in reducing Salmonella Typhimurium (ST) cecal colonization in broiler chicks following experimental challenge. In experiment 1, CEC and MV were applied to day-of-hatch broiler chicks, and chicks were experimentally challenged with ST approximately 48 h later. In control chicks, ST was recovered at a level of 3.84 log10 cfu/g following direct plating of cecal contents, and 12 of 19 (63.15%) cultured individual ceca were positive following selective enrichment. In chicks receiving CEC by spray application on day of hatch, a numerical reduction in ST recovered from cecal contents (2.63 log10 cfu/g) and a significant reduction (P < 0.05) in recovery of ST from cultured ceca following selective enrichment (4 of 18, or 22.2%) was observed when compared with controls. Significant reductions in ST cecal colonization in chicks treated with MV alone were not observed in experiment 1. In experiment 2, chicks received day-of-hatch spray application of CEC alone, MV alone, or CEC and MV as a combined application immediately prior to or within 24 h of chick placement. When chicks were experimentally challenged with ST 48 h posthatch, significant reductions (P < 0.05) in cecal colonization by ST were observed with each experimental group when compared with nontreated controls. These data suggest that both commercially available products, alone or in combination, are efficacious in reducing cecal colonization in broiler chicks challenged with ST. 相似文献
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黄芪多糖对接种NDⅣ雏鸡红细胞免疫功能的影响 总被引:1,自引:0,他引:1
以50日龄内健康海兰白雏鸡为研究对象,将黄芪多糖(APS)按0 mg/只、5 mg/只和10 mg/只经滴鼻点眼、肌肉注射等方式分别与鸡NDⅣ系疫苗同时免疫接种适龄雏鸡。结果表明,雏鸡C3b受体花环率(E-C3bRR)和红细胞C3b受体花环促进率(ERER)显著升高,红细胞免疫复合物花环率(E-ICRR)和红细胞C3b受体花环抑制率(ERIR)则降低,即APS可显著提高雏鸡的红细胞免疫功能,且APS 10 mg/只组效果优于5 mg/只组;对NDⅣ系苗免疫雏鸡来说,以APS 10 mg/只肌肉注射,NDⅣ滴鼻点眼对红细胞免疫功能的增强作用最显著。 相似文献
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目的是观察鸡传染性贫血多次免疫对肝微粒体中抗氧化酶活性的影响.对20只SPF鸡随机分为2组,每组10只,免疫组鸡用鸡传染性贫血弱毒苗免疫4次,每次间隔2周,对照组鸡注射同剂量的生理盐水.最后一次免疫后10d取肝脏制备微粒体,利用测试盒测定肝微粒体中的GSH-Px活性、SOD活性、CAT活性和MDA含量.结果与对照组相比,免疫组肝微粒体中GSH Px活性、SOD活性和CAT活性都显著提高(P<0.05),MDA含量显著减低(P<0.05).结论为鸡传染性贫血多次免疫可提高鸡体抗氧化能力. 相似文献