蒿种子基因组DNA提取方法的比较研究

以籽蒿(Artemisia sphaerocephala Krasch)种子为试验材料,采用SDS法、CTAB法及SDS-CTAB法进行基因组DNA提取.结果表明:SDS-CTAB法适于籽蒿(A sphaerocephala)种子基因组DNA提取,SDS法次之,CTAB法不适合.     

室温离心SDS法快速提取苹果等植物组织RNA

植物RNA提取常用的有异硫氰酸胍法、盐酸胍法、SDS-酚法、CTAB法、酸酚法、一步法以及TRIZOL等商品化的试剂盒等,大都因为实验试剂昂贵,需要至少5 h到3 d的操作时间,效果良莠不齐.作者在试验过程中发现快速短时操作是提取完整RNA的关键.我们在夏季32℃室温条件下,采用冰上操作的方法,用普通离心设备（上海安亭科学仪器厂,TGL-16G台式离心机）,采用缩短抽提和沉淀时间的快速SDS法在苹果和甜樱桃的多个组织中提取了质量较好的RNA.     

贵农21与P38的SDS—PAGE蛋白质图谱及RAPD分析

利用ＳＤＳ－ＰＡＧＥ蛋白质电泳及ＲＡＰＤ技术对贵农２１（ＧＮ２１）和Ｐ３８两个材料进行分析,发现Ｇ２１、Ｐ３８和它们的亲本的ＳＤＳ－ＰＡＧＥ蛋白质图谱表现出一些差异。在ＲＡＰＤ分析中,ＧＮ２１和Ｐ３８在１４４个引物的扩增中,有１０１个引物都扩增出特征带,其中有６个引物在ＧＮ２１和Ｐ３８的ＲＡＰＤ图谱中有差异。     

快速测定面粉品质的方法

初步摸索了用ＳＤＳ溶液测定面粉品质的方法,探讨了各种因素对测定结果的影响。同时进行了ＳＤＳ沉积体积与粉质仪测定数据的比较,并通过实验证明沉积体积与馒头体积存在密切的正相关性。     

顿河红豆草浓缩单宁生物合成相关蛋白鉴定

以二倍体顿河红豆草为实验材料,运用组织培养法和香草醛-盐酸法筛选优良浓缩单宁高表达的细胞系。用十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)技术,对同一细胞系不含浓缩单宁(CT^-)愈伤组织和含有浓缩单宁(CT⁺)愈伤组织蛋白质进行鉴定。用制备型SDS-双向电泳对目标蛋白进行纯度分析,以及用SDS-PAGE法和IEF(等电聚焦)法测定该目标蛋白质分子量和等电点。最后经电印渍技术,将目标蛋白质转移至固相膜上进行氮端氨基酸序列分析。结果表明,筛先出10个优良浓缩单宁合成细胞系和相同基因型愈伤组织增殖细胞系。同一细胞系含有浓缩单宁愈伤组织比不含者多一条蛋白带,该蛋白分子量为28kD,等电点为5.7。该电印渍法将蛋白印渍至PVDF(聚偏二氟乙烯)膜上的效率较高。并测定了氮端部分氨基酸序列。     

对虾白斑综合征病毒(WSSV)高分子量结构蛋白的分离

采用蔗糖密度梯度离心从患病对虾组织中提取WSSV,应用SDS-PAGE对WSSV结构蛋白进行了分析。采用12％分离胶,将WSSV样品煮沸5min,应用SDS-PAGE分离了WSSV的中低分子量结构蛋白,并将该结果与其他学者已发表的结果进行了比较。首次通过延长样品煮沸时间,采用8％分离胶,应用SDS-PAGE分离到了WSSV100kD以上的13条高分子量结构蛋白,计算出了每条蛋白带的分子量及其在总蛋白中的百分含量。其中WSSV高分子量结构蛋白的分离丰富了WSSV的研究范围,对今后深入的研究工作具有重要意义。     

Comparison of methods for depletion of albumin and IgG from equine serum

Background: Disease‐specific biomarkers hold diagnostic promise in both human and veterinary medicine, but serum biomarkers in low concentrations may be masked by the presence of abundant proteins, mostly albumin and IgG. Methods to deplete albumin and IgG exist, but efficacy of these methods for depleting equine serum of these proteins has not been established. Objective: The aim of this study was to determine if albumin and IgG could be depleted from equine serum using several commercially available kits and procedures. Methods: One‐dimensional gel electrophoresis followed by densitometry was used to determine percent of albumin, IgG, and both in pooled serum from 3 horses before and after application of 7 depletion methods. Repeatability was determined by applying the 2 best methods to serum samples from 6 grade horses. Results: For pooled serum, depletion rates varied from 35–90% for albumin and 0–94% for IgG. In the repeatability study, the ProteoExtract method combined with protein G Sepharose beads to remove additional IgG provided the best overall performance with 66% albumin depletion and 100% IgG depletion. A protocol using protein G Sepharose beads to remove IgG followed by ethanol precipitation of nonalbumin proteins with albumin remaining in the supernatant was the second most effective, with 85% albumin depletion and 55% IgG depletion. Although a multiprotein immunodepletion column effectively removed 90% of the albumin, the method was ineffective at removing IgG. Conclusion: Albumin and IgG removal kits optimized for human use have variable efficacy for equine serum. Combined use of the ProteoExtract kit and manual incubation with protein G Sepharose beads provided the most effective depletion.     

水稻基因组DNA提取方法的研究

为探索分子标记辅助选择育种中快速有效的DNA提取方法,以水稻新鲜叶片、衰老叶片、水稻种子为材料,以CTAB法和SDS法为提取方法,利用紫外分光光度计和琼脂糖凝胶电泳进行DNA纯度检测,对水稻基因组DNA提取方法和实验体系进行了优化和摸索。结果表明:新鲜叶片提取效果最好,其次是种子,再次是衰老叶片;CTAB法和SDS法差别不大;为避免酚类物质氧化污染,可在提取液中添加β-巯基乙醇。     

几株鸽新城疫病毒的核酸和蛋白质多态性分析

以La Sota毒株和分离到的4株分别来源于信鸽、肉鸽和鸡的新城疫毒株为研究对象，设计了3对引物用反转录－聚合酶链反应（RT－PCR）对它们的融合蛋白基因（F）进行分段扩增，并且采用SDS－PAGE进行结构蛋白分析。两者的综合结果显示毒株之间存在着差异关系，具有显著的多态性；来源于肉鸽的毒株与La Sota株最为接近，而来源于鸡的强毒株与La Sota株差异最显著；来源不同的2株信鸽之间有程度较轻的差异，肉鸽和信鸽的毒株之间差异较为明显，鸽新城疫和鸡新城疫之间的差异关系较为复杂。表明新城疫病毒存在高度变异性。     

小麦高分子量谷蛋白亚基的遗传研究 Ⅱ.控制基因的染色体定位及其与SDS沉淀值的关系

通过分析一套中国春(钱尼)染色体代换系的胚乳高分子量谷蛋白亚基和微量 SDS沉淀值表明:高分子量谷蛋白亚基受染色体1B 和1D 控制,可能与4B 染色体有关;本试验不能得知高分子量谷蛋白亚基受染色体1A 控制的情况;亚基3和9在一定条件下对沉淀值具有正效应。