PCR法鉴别牛早期胚胎性别的研究进展

对PCR法鉴别动物胚胎性别的机理进行了分析,综述了近10年来相关操作技术的进展,包括早期胚胎取样、胚胎细胞DNA的提取、引物的设计、扩增条件的优化、扩增产物的检测和性控胚胎的冷冻等,并提出PCR法鉴别牛早期胚胎性别的前景与展望。     

鹌鹑早期胚胎bcl-2基因表达的差异及发育性变化

采用RT-PCR方法,用Wpkci和β-actin引物进行多重PCR鉴定66～120 h鹌鹑胚胎样本性别后,选取不同时间点雌、雄胚胎各4枚,以β-actin为内标,测定bcl-2 mRNA的相对丰度;探讨bcl-2对鹌鹑早期胚胎发育的影响。结果表明:①雄性胚胎在66～90 h bcl-2 mRNA表达量一直维持在较低水平,96～102 h bcl-2 mRNA有所增加,但96与102 h间差异不显著(P>0.05),在108 h显著降低(P<0.05);与108 h相比,114 h显著升高,120 h维持在较高水平。雄性胚胎在66～108 h(72h除外)bcl-2 mRNA表达均比雌性胚胎的表达量低,在114～120 h bcl-2 mRNA表达水平均比雌性胚胎的高。②雌性胚胎在66～90 h bcl-2 mRNA表达量一直维持在较低水平;与90 h相比,96 h显著升高,96～120 h逐渐降低,其中96～108 h下降,但三者间差异不显著(P>0.05);与108 h相比,114～120 h显著下降(P<0.05)。③相同时间点雌、雄胚胎间的比较结果表明,84 h雌性胚胎bcl-2 mRNA表达显著高于...     

波尔山羊重复超排FSH用量的调整方法与效果

根据218只2～5岁经产波尔山羊的第1次超排反应及回收胚胎数将第2次超排母羊分为5个组（1组只有卵泡未排卵;2组母羊处理后未发情;3组黄体数≤4个;4组黄体数5～14个;5组黄体数≥15个）,2次连续超排时间间隔60 d以上,采用递减法用FSH（Folltropin V）进行超排处理,第2次FSH给量根据第一次的超排效果进行调整。结果表明,1～5组的有效供体利用率分别为100%、75%、71.88%、93.10%和93.65%,5组有效供体比例差异不显著（P＞0.05）;1～5组的总胚胎数分别为14.00±5.73、12.10±6.78、11.77±7.26、13.84±7.04、18.03±9.06枚,5组的总胚胎数极显著高于其他4组(P＜0.01);1～5组的回收可用胚胎数分别为12.81±6.04、10.33±8.12、10.08±7.14、11.34±6.58和15.37±7.64枚,5组超排后可用胚胎数显著高于2、3、4组(P＜0.05),与1组间差异不显著（P＞0.05）。根据供体首次超排效果调整波尔山羊重复超排FSH给量方案可行,首次超排无反应或超排反应差的个体,重复超排时增加FSH给量,可以使70%以上的个体成为有效供体。     

大车前胚乳与胚发育的细胞胚胎学研究

应用石蜡制片技术研究了大车前胚乳与胚发育过程的细胞胚胎学特征,为车前科胚胎学及分类地位的确立提供相关资料。结果表明：大车前成熟雌配子体为七细胞七核的蓼型。经双受精后形成合子与初生胚乳核。胚乳发育类型为细胞型,初生胚乳核第1次横分裂产生珠孔室与合点室胚乳细胞。珠孔室胚乳细胞经1次纵分裂或2次连续相交的纵分裂形成2个或4个胚乳细胞;进而同步进行横分裂形成2排,即4个或8个胚乳细胞;靠近珠孔的2个或4个胚乳细胞分化并发育成为单核的管状胚乳珠孔吸器;靠近合点室胚乳细胞的2个或4个细胞进行各个方向的分裂形成胚乳本体,并将合子分裂所形成的胚包围其中;与此同时,合点室胚乳细胞的细胞核进行1次核分裂但不伴随胞质分裂,在合子期便形成具有两个细胞核的胚乳合点吸器;胚乳吸器为胚乳本体的发育从珠被与合点吸收并转送营养物质。胚胎发生属于柳叶菜型,经原胚期、心胚期、鱼雷胚、子叶胚形成成熟种子。珠被绒毡层发达。对胚乳本体以及球胚的流式细胞仪细胞核DNA分析表明,胚的DNA含量为二倍体,而胚乳为三倍体。     

猪子宫腔液外泌体来源的TIMP2蛋白对胚胎附植的影响

旨在研究猪子宫腔液外泌体来源的TIMP2蛋白对妊娠早期胚胎附植的影响.本研究采用超速离心法分离妊娠第9天(n=3)和第12天(n=3)大白猪子宫腔液外泌体,利用Western blot(WB)检测外泌体中TIMP2蛋白的变化,并通过免疫组化试验研究TIMP2蛋白在子宫中的表达定位.进一步用外泌体与猪胚胎滋养层细胞(po...     

铜和锌对小麦胚芽愈伤组织维生素E积累的影响

[目的]考查培养基中铜元素和锌元素的含量对小麦胚芽愈伤组织维生素E积累的影响。[方法]通过建立维生素E积累和细胞生长的数学模型,描述小麦胚芽愈伤组织的维生素E积累和细胞增长。以次生代谢产物维生素E积累最多为目标,通过试验优化确定铜锌含量的最佳组合。[结果]结果表明,当B5培养基中ZnSO4.7H2O为2.0mg/ml;CuSO4.5H2O为0.1mg/ml时,有利于维生素E积累。维生素E积累的动力学模型的拟合度为97.53%,细胞干重的动力学模型拟合度为95.60%,非线性关系良好。[结论]微量元素铜和锌对小麦胚芽愈伤组织维生素E积累有影响,铜元素较锌元素的影响显著,且低浓度的铜锌之间有协同作用;随着浓度增大,抑制作用逐渐增强。     

潜根线虫对稻苗根系侵染的影响

盆栽接种试验表明,在水稻胚芽期潜根线虫(Hirschmanniella spp.)可以侵染胚及幼根,但不侵染幼芽;对种子萌发和成苗率无明显影响。潜根线虫在土壤介质中对水稻根系的侵入量显著大于在水、沙介质中的水稻根系侵入量。在土壤营养丰富的条件下,低密度的潜根线虫量侵染能刺激水稻苗须根产生,但在中、高接种量下明显抑制了须根量的产生。     

Ⅰ型鸭肝炎病毒（DHV-Ⅰ）在鸡胚中的增殖及感染力的测定

摘要：将Ⅰ型鸭肝炎病毒（DHV-Ⅰ）接种9日龄SPF鸡胚尿囊腔（0.2 mL/胚）进行增殖,制备鸡胚成纤维细胞（CEF）,并分别运用CELD50法和TCID50法测定DHV的感染力。结果表明,DHV-Ⅰ在SPF鸡胚内成功增殖,致死鸡胚具有典型临床症状和体表特征,所增殖病毒的CELD50和TCID50分别为10-5.6/0.2 mL和10-5.12/0.1 mL。     

金花茶两种体胚发育途径蛋白表达的双向电泳分析

本试验在已经建立的金花茶（Camellia nitidissima Chi.）花状多子叶形胚发育途径的体胚循环再生系统基础上,用双向电泳的方法按发育时间顺序分析了金花茶正常体胚和花状多子叶形胚两种体胚发育途径各自不同阶段离体培养材料的蛋白表达差异以及相同发育阶段两种发育途径的蛋白表达差异。结果表明：随着体胚发育的进程,蛋白种类和总数先增多,在子叶胚阶段蛋白种类和数量最多,之后又逐渐减弱甚至消失,在成苗阶段种类最少;金花茶两种体胚发育途径不同阶段蛋白表达存在明显差异,PD(14.9kD)是金花茶花状多子叶形胚发育途径的特有蛋白,在可分化花状多子叶胚的愈伤组织中,以及从球形胚到成熟胚的各个阶段中都有表达。     

蛇皮果的组织培养研究

建立蛇皮果的组织培养技术平台,为大规模生产蛇皮果种苗奠定理论基础。以蛇皮果的种胚为外植体,研究植物生长调节剂的种类和浓度对丛芽诱导及根系诱导的影响。结果表明,丛芽诱导需要6个月,最适丛芽诱导培养基为MS+2ip 8.0 mg/L+NAA 0.25 mg/L,丛芽诱导率可达到41.7%;最适生根培养基为1/2MS+IBA 1 mg/L+ABT 1 mg/L,生根率为46.9%。将已生根并高度大于5 cm的组培苗移植于黄心土+珍珠岩的营养袋中,成活率可达到80%以上。