用PCR法快速筛选中国对虾含微卫星的重组阳性克隆

运用PCR在中国对虾的小片段基因组文库中快速筛选含有微卫星序列的重组阳性克隆。PCR中使用的引物为载体pGEM-3(zf( )上多克隆位点两侧的T7／Sp6启动子引物和根据微卫星核心重复序列设计的STR引物：STR1：5‘-ATATATATATAT－3‘：STR2：5’－TCTCTCTCTCTC－3’，直接使用含有重组克隆的菌液，在PCR反应前增加一段裂解细菌的高温。筛选出来的含有微卫星序列的重组阳性克隆经DNA测序验证。结果证明，采用PCR方法用菌液快速筛选含有微卫星序列的重组阳性克隆完全可行，而且具有简便、快速、高效、不涉及同位素操作等优点。     

低溶氧胁迫对刺参(Apostichopus japonicus)氧化应激指标的影响

为探明低氧胁迫对刺参(Apostichopus japonicus)抗氧化能力的影响以及刺参的低氧逆境响应机制,给低氧环境条件下的刺参养殖提供指导,本研究通过设置低氧胁迫实验,将刺参在水体低氧[(2.0±0.2) mg/L]8 h 处理后恢复常氧[(7.0±0.2) mg/L]2.5 h,取低氧和常氧不同时间段的刺参肌肉、呼吸树和消化道组织,对各组织的乳酸(LD)、丙二醛(MDA)和抗氧化酶系等应激参数进行测定和变化趋势分析。结果显示,与对照组相比,在低氧胁迫8 h 内,随着低氧暴露时间的延长,刺参肌肉、呼吸树和消化道等组织中的 LD 含量、抗氧化能力(T-AOC)、过氧化氢酶(CAT)、谷胱甘肽-S-转移酶(GST)活力显著上升;超氧化物歧化酶(SOD)活力显著下降;肌肉组织中的 MDA 含量显著降低,呼吸树和消化道中的 MDA 含量显著上升。在恢复常氧阶段,各氧化应激指标逐渐恢复到正常水平。低氧胁迫使刺参的有氧代谢减弱,无氧代谢增强,以维持机体能量需求。低氧胁迫造成刺参机体各种应激生化指标上升或下降,这是机体为适应低氧环境刺激而作出的一种抗氧化策略。     

中国对虾病原菌(鳗弧菌)的研究

1987年7～10月福建省平谭县对虾养殖场发生了一起严重的流行病。病虾活动力减弱,食欲下降,个体消瘦,头胸甲心区附近呈白色或浅桔红色,血淋巴液稀薄、混浊、不能凝固。因病虾步足、游泳肢及尾扇呈鲜红色,被称为“红腿病”。死亡率可高达90％以上。从五只垂死病虾的心脏血淋巴液中分离到细菌作纯焙养,经肌肉注射和浸泡的人工感染方法,得到了与虾池中患病虾相同的症状。菌原菌是革兰氏阴性短杆鼠。以极生单鞭毛运动。发酵葡萄糖,产酸不产气。氧化酶、过氧化氢酶阳性。能还原硝酸盐成亚硝酸盐。精氨酸脱羧;鸟氨酸、赖氨酸不脱羧。V.P.阳性.在42℃中不能生长。不能在无盐和含有8％NaCl 的胨水中生长,但在含有3％和6％NaCl的胨水中生长良好。对弧菌抑制剂0/129敏感。经鉴定为鳗弧菌(Vibrio anguillarum Bergman)。     

皮下及造血组织坏死杆状病毒对中国对虾亲虾的人工感染

皮下及造血组织坏死杆状病毒对中国对虾亲虾的人工感染宋晓玲，黄倢，王崇明，于佳，陈碧鹃，杨丛海（黄海水产研究所，青岛２６６０７１）关键词中国对虾，亲虾，皮下及造血组织坏死杆状病毒，人工感染，温度效应ＡＲＴＩＦＩＣＩＡＬＩＮＦＥＣＴＩＯＮＯＦＢＲＯＯＤＳ...     

Inheritance mode of microsatellite DNA markers and their use for kinship estimation in kuruma prawn Penaeus japonicus

The allelic inheritance mode of microsatellite DNA markers was examined using seven copulated wild females and their offspring. Five microsatellite loci, CSPJ002 *, CSPJ010 *, CSPJ012 *, CSPJ014 *, and CSPJ015 *, were used in the study. At almost all family/locus combinations, one sire was determined and distributions of genotypes in offspring were consistent with the Mendelian segregation ratio. Distributions of genotypes were consistent with the ratio after assuming a null allele at some loci. Consequently, the alleles of CSPJ002 * and CSPJ012 * were inherited following the Mendelian inheritance mode in every family; however, the null allele was expected in CSPJ010 *, CSPJ014 *, and CSPJ015 * in some families. Thus, these loci should be used carefully in population genetic analysis, but siblings could be detected in the dendrograms based on unweighted pair-group method using arithmetic averages (UPMGA).     

中草药对斑节对虾生长、饲料利用和肌肉营养成分的影响

研究了中草药对斑节对虾Penaeusmonodon(初始体重0.30g.尾-1)生长性能、饲料利用以及肌肉营养成分和氨基酸的影响。6种实验饲料(按顺序分别为1,2,3,4,5和6)中中草药的添加量分别为0,0.5,1.0,2.0,4.0和8.0g·kg-1饲料。除了饲料2之外,斑节对虾的成活率、饲料系数和蛋白质效率都显著(P<0.05)优于对照组(饲料1)。投喂饲料3的斑节对虾增重率与对照组相比,虽然统计学上不存在显著差异,但有较大幅度的提高。投喂添加中草药的饲料对斑节对虾肌肉的水分和蛋白质含量无显著影响,但脂肪含量明显下降。结果表明,斑节对虾饲料中添加适量的中草药能够促进生长、显著提高成活率和降低饲料系数,并改变斑节对虾肌肉中脂肪含量和氨基酸组成。     

山东半岛南部沿岸中国对虾放流数量对秋汛产量的影响

根据１９８３～１９９８年山东半岛南部沿海对虾放流增殖结果,对秋汛对虾产量与放流数量之间的关系进行了研究。结果表明：秋汛对虾产量随放流数量的增加而增加,二者呈Ｙ＝３６３．７＋１２６．４Ｘ相关关系（ｒ＝０．９１８）。     

刺参中间培育及生长特性的研究

研究报道了刺参(Apostichopus japonicus)的中间培育技术及其生长特性。刺参在大棚水泥池内,采用地下海水源,全人工饵料,培育60天,参苗大小由1310头/kg长至322头/kg。重量由78kg增至305kg,成活率96.4%,饵料系数1.76。培育过程中2-3cm的幼参生长最快,长得很慢的“老头参”占4.3%。培育的基本环境条件:盐度24.795±0.015;温度14.6-15.2℃;溶氧(DO)多为6-9mg/L;pH值7.2-7.6;铵氮0.2mg/L以下。     

日本对虾越冬亲虾性腺促熟及工厂化育苗技术研究

1997、1998年利用越冬亲虾进行性腺促熟,用镊烫法切除眼柄,促进亲虾发育。结果:两年共培育亲虾雌虾8204尾。雄虾5683尾,获交尾虾5360尾。交尾率为71.81％。每年两批育苗,共利用水体1720m~3,育出0.7～1.1cm的虾苗12450万尾,平均单位水体出苗量为7.24万尾/m~3,效益显著。     

多糖和益生菌对暗纹东方纯免疫功能的调节

2003年春以来，山东、辽宁等地区养殖的仿刺参出现急性口围肿胀症，其症状是口围肿胀，体表溃烂，排脏，管足附着力下降，脱落沉至池底，死亡率较高。从病参口围、体表及体壁分离出优势菌10株，经人工感染试验证实其中菌株KW21、KW22、KW23、NB13和NB14是引起仿刺参出现急性口围肿胀症的病原菌。通过16S rRNA基因序列同源性及系统发育分析表明，菌株KW21为Mahnomonas dokdonens／s；菌株KW22和菌株NB13具有相近的亲缘关系，两者均与Vibrio splendidus有较高的相似性（99％，98％）；菌株KW23为Vibrio tapetis；菌株NB14为Vibrio sp．。5株病原菌均为革兰氏阴性菌，电镜下观察菌株KW21棒杆状；菌株KW22、KW23、NB13和NB14分别为杆状、弧状、卵圆形和卵圆形，且都具有单极生鞭毛。药物敏感性试验结果表明，诺氟沙星、氧氟沙星和红霉素对5株菌均有较强的抑菌作用。Vibrio tapetis，Vibrio splendidus和Marinomonas dokdonensi作为仿刺参的病原菌属首次报道。