不同环境条件下带毒蚕种的跟踪饲育调查

模拟生产中,春、夏两种不同的家蚕饲育环境,进行了带毒蚕种的跟踪饲育比较,结果表明,江淮之间夏季饲育优于春季饲育。     

家蚕微粒子病的图像识别技术研究

用计算机图像识别技术来检测微粒子病,以替代人工镜检,对拍摄的原始图像用直方图均衡化法进行对比度增强的处理,用快速二维Ostu阈值化法进行二值化,实现了微粒子与背景的分离,用形态筛选法去掉了大量噪声及小杂质,实现了微粒子与杂质的初步分离,提取了周长,面积,圆度,凹度,内角极值,形状规则度6个特征,对微粒子进行分层识别,对43幅含微粒子的图像进行识别试验,识别完全正确率为72．09％,识别有效率为86．05％,漏判率为13．95％。     

破碎法提取家蚕微孢子虫孢子核酸的PCR检测灵敏度试验

蚕微粒子病检测技术是该病防治中的一项重要技术,本文在通过破碎法提高模板核酸获取量的基础上,对纯化家蚕微粒子虫孢子的PCR检测灵敏度进行了测试。提取核酸-模板稀释测试12对引物的灵敏度中有4对引物达到0．05粒（10^2粒/mL）、4对引物5粒（10^4粒/mL）、1对引物50粒（10^5粒/mL）、2对引物500粒（1...     

家蚕微粒子病母蛾抽样集团容量扩大后的检验方案设计

为了提高家蚕微粒子病母蛾检验的效率,设计了扩大家蚕微粒子病母蛾抽样集团容量后的检验方案。在大规模生产检验中,将检测第1样本后直接判定合格或不合格的2种类型蚕种作为第2样本,对第2样本的113个批(段)共4 139个样本进行模拟试验及t-检验,证明设计的集团容量由常规30蛾扩大到60蛾后的检验方案完全可行。     

农村原蚕饲养微粒子病检查批内分布规律研究

对 4 78个农村原蚕批的 4 92 7个农户母蛾微孢子带毒状况做了统计分析。结果表明 :各原蚕批内的不同饲养户带毒情况具有一定的相关性 ,但不完全相关 ,其分布既不同于蚕种统批制种的批内呈随机分布 ,也不同于各批间呈独立分布。因而指出有必要制定农村原蚕批分户制种的微毒检验标准和抽样方案。     

不同容量母蛾样本检验微粒子灵敏度的测试

本试验通过用不同剂量的家蚕微粒子虫孢子感染5龄期家蚕幼虫,获得微粒子病毒蛾,并将这些有病蛾混入数量不等的未感染母蛾中,进行微粒子病检出率的测试,结果表明：在样本容量为180蛾时,检出率仍可达到现行生产要求的100%。     

用关键年法分析家蚕原种微粒子病发病规律

根据广东省蚕种繁殖试验所 195 7～ 1997年原种微粒子病的发病率和相应年份的年均气温 ,利用统计假设检验法初步分析了原种微粒子病发生的关键年 (峰谷年 )的变化趋势及其与气温的关系。结果发现年平均气温对原种微粒子病发生有显著的影响 ;峰年前年的年平均气温明显高于历史平均水平 ;而低谷年前年的年平均气温明显低于历史平均水平。自 2 0世纪 80年代以来 ,微粒子病发病率偏高 ,平均气温亦显著偏高 ,可见气温是造成 10多年来原种微粒子病流行的原因之一。关键年法分析微粒子病发生的结果与生产实际基本吻合。     

模拟感染家蚕微粒子病的PCR分子诊断技术研究（11）

家蚕微粒子病病原为桑蚕微孢子虫(Nosema bombycis Nageli, N.b)。本文根据文献报道,选用了一对根据N.b孢子及其相近种属微孢子虫的SSU-rRNA保守区段设计的有效引物VIF/530R,从模拟感染不同浓度N.b孢子(3×101-7/ml)的蚕蛾、蚕卵的角度,较系统地研究了PCR诊断技术的可检测灵敏度和对模拟感染家蚕微粒子病的诊断效果,为PCR分子诊断家蚕微粒子病的实用化研究提供参考。在本实验的DNA制备方法和PCR反应条件下,分别对由不同浓度N.b纯孢子抽提的DNA模板和不同浓度N.b纯孢子(3×101～7ml-1)分别与蚕卵、蚕蛾混合抽提的DNA模板进行PCR扩增检测。结果表明:(1)对N.b纯孢子DNA模板,PCR可检测灵敏度为3×104N.bml-1(弱检测信号可到3102～3N.bml-1),对模拟染毒N.b孢子的蚕蛾DNA模板,PCR可检测灵敏度为3×105N.bml-1,两者分别已超过或达到目前生产上用显微镜的检毒水平;(2)对模拟染毒N.b孢子的蚕卵DNA模板,VIF/530R引物不能有效地检出蚕卵中染毒的N.b孢子DNA信号,推测在蚕卵DNA抽提物里可能含有抑制PCR扩增的未明因素,而蚕蛾DNA抽提物里则无此抑制因素。     

“三控一严”综合防治家蚕微粒子病

本文分析了我省微粒子病防治工作中存在的主要问题,提出了“三控一严”的家蚕微粒子病综合防治技术体系。     

应用PCR技术检测柞蚕微孢子虫

采用斑迹抽提法提取柞蚕微孢子虫(Nosema pernyi)基因组DNA,基因组DNA的琼脂糖凝胶电泳图谱中有大小约15kb的清晰、完整条带。选用已报道的微粒子属16S rRNA基因的保守序列设计P1/P2和N1/N22对引物,对柞蚕微孢子虫基因组DNA进行PCR扩增,结果2对引物分别扩增出1条大小不同的特异谱条带,其中用引物N1/N2扩增可检测出0.47ng的DNA模板。应用同样的PCR引物、体系和反应条件,可有效扩增出受感染柞蚕幼虫、成虫中的微孢子虫基因组DNA条带。该项检测技术有望应用于柞蚕微粒子病的早期诊断。