宽口裂腹鱼中肾组织细胞系建立的初步研究

鱼类细胞培养是进行种质保存、基因功能分析、细胞工程育种等研究的重要材料和模型。为了建立濒危的宽口裂腹鱼(Schizothorax eurystomus)中肾组织细胞系,本研究以其中肾组织为材料,以组织块移植法启动细胞原代培养,待细胞稳定后再进行传代培养,建立宽口裂腹鱼中肾组织细胞系,命名为EUM10。分析宽口裂腹鱼中肾细胞系冻存复苏能力和最适生长条件,且通过PCR技术检验污染状况,用线粒体基因片段分析鉴定细胞的来源。结果显示,宽口裂腹鱼中肾组织细胞的最佳培养基为DME/F-12,最适温度为25℃,最适血清浓度为20%;细胞呈悬浮生长,生长曲线为“S”型曲线,第10代中肾组织细胞系细胞的群体倍增时间为23.26 h;第6代细胞液氮冷冻保存6个月后,复苏存活率达91.91%;经污染鉴定无污染现象;EUM10第10代细胞线粒体16S rRNA序列分析结果与宽口裂腹鱼基因序列一致性为99.81%,表明细胞系来自宽口裂腹鱼。本研究成功建立了宽口裂腹鱼中肾组织细胞系,可将宽口裂腹鱼中肾细胞系作为体外体系运用于宽口裂腹鱼的研究,如细胞遗传学、基因功能分析等,可为宽口裂腹鱼的基础研究和育种工作提供基础资料。     

优良中早熟水稻新品种长白15、长白16的选育及应用

采用地理远缘、多亲本复交的育种方法,育成了优良中早熟水稻新品种长白15和长白16,长白15的主要优点一是高产,预试、区试平均产量8160kg/hm2,比对照品种长白9号增产5.85%,生产试验产量8281.5kg/hm2,比对照品种增产5.7%;二是优质,主要品质指标均达二等食用粳稻品质标准,同时食味佳;三是抗逆性较强,其中耐冷性和耐肥抗倒伏性表现突出。而长白16的丰产性、稻米品质略低于长白15,但在抗逆性方面则明显强于长白15,抗稻瘟病性和抗纹枯病性表现优异,对穗瘟和纹枯病的抗性均达到抗(R)的水平,而且适应性广。     

对虾细胞培养现状与对策

建立对虾细胞系是进行病毒分离与鉴定、染色体分析、遗传育种研究和基因功能分析的重要手段,对开展病原生物(如细菌、病毒等)致病机理、传播途径、病原体与宿主之间相互作用的研究及进行海洋无脊椎生物非特异免疫机制的探讨,查清对虾免疫机制进而有效防治养殖病害的发生具有重要意义.     

猪繁殖与呼吸综合征病毒GZ-KY1株的分离及ORF5基因的克隆分析

本试验首次采用PK-15细胞,通过同步接种的方法,成功分离到了1株猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV,GZ-KY1株),并扩增克隆了该毒株的ORF5基因。试验结果表明,该毒株ORF5基因全长603 bp,系美洲型,与国内强毒株的氨基酸一致性高于弱毒株,与经典美洲型毒株及国内弱毒株亲缘关系较远。     

五种双翅目昆虫细胞系染色体分析

采用直接法制备传代细胞染色体标本、常规Giemsa染色、显微镜下计数中期分裂相染色体数目的方法对5个双翅目昆虫细胞系进行了染色体分析.结果显示:C6/36染色体众数为6,为二倍体细胞系;SL2染色体众数为8～12,超二倍体细胞系;L-2/M delta 2-3染色体众数为8～20,超二倍体细胞系;Aedes albopictus Skuse染色体众数为6,为二倍体细胞系;NIH-SaPe-4染色体众数为10条,为二倍体或亚二倍体细胞系.与来源细胞相比,以上5种细胞染色体数目没有发生根本性的改变.     

骨形态发生蛋白15(BMP15)通过Smads信号通路促进雏鸡原始卵泡的激活

骨形态发生蛋白15(BMP15)在卵巢发育中发挥着重要的调节作用,然而,BMP15对雏鸡原始卵泡发育的作用尚不清楚。本试验研究了BMP15对雏鸡原始卵泡发育的影响。结果表明,BMP15和BMP受体-IB(BMPR1B)mRNA的表达变化以及BMPR1B蛋白的表达变化时间点与原始卵泡的激活时间点一致。BMP15通过促进卵母细胞和颗粒细胞的增殖和抑制细胞的凋亡来激活原始卵泡的活化,这种效应可被BMPR1B的抑制剂ML347所抑制(P<0.05)。电镜观察表明,BMP15处理可增加卵泡内卵母细胞与颗粒细胞之间的缝隙连接。与此同时,Smad1、Smad5和Smad4信号通路参与了BMP15的作用过程。以上结果表明,BMP15通过Smad1、Smad5和Smad4信号通路参与雏鸡原始卵泡的激活。     

应用15N研究施氮比例对小麦氮素利用的效应

应用15N示踪技术研究氮素不同底施和追施比例对小麦氮素利用的效应。结果表明，籽粒蛋白质含量随追施氮肥比例的增加而提高，颖壳、根系、茎秆的含氮量也呈随追氮比例增加而提高的趋势。收获时植株各器官中，籽粒含氮量最多，依次为颖壳、叶片、茎秆、根系。在两种肥料的比较中，施用尿素比硫酸铵在植株营养器官中残留量少，     

~(15)N天然丰度法测量豆科牧草共生固氮的评估

无氮营养液砂培7个品种苜蓿茎叶的固氮分馏因数β值为1.0000～1.0015(δ~(15)N为-0.05～-1.47‰),白三叶、绿豆和银合欢的β值分别为0.9979、0.9983和1.0018(δ~(15)N分别为2.15、1.74及-1.81‰)。根据~(45)N天然丰度的变化,估测了田间生长苜蓿的固氮能力,表明6个品种的共生固氮能力不同。格洛里及润布勒苜蓿两品种最高,保定、阿尔贡奎因及明托苜蓿3个品种次之,秘鲁苜蓿最低。苜蓿不同时期的固氮活性有变化,6、7月间固氮活性达高峰。根据所测豆科牧草茎叶的δ~(15)N值,可以对豆科牧草进行定性或半定量水平上的固氮研究,以筛选高效固氮牧草和检测野生固氮资源。本文还对不固氮参照植物和不同方法对％Ndfa估计位的影响进行了讨论。     

土壤微生物对施入肥料氮的固持及其动态研究

采集长期定位试验（１４年）土壤（棕壤）进行盆栽试验,并应用同位素＾１５Ｎ示踪技术研究了土壤中微生物对肥料氮的固持及其动态,结果表明,施肥后５天土壤微生物对施入人肥氮的固持达达到最高,除单施氮肥处理的固持量占施入人肥氮量的５．４％外,其余各处理均天１３．３％－１５．４％间,施肥后土壤微生物量氮的增加主要来自化肥氮,后者占微生物体总氮量的６４．１％－８７．３％,在作物生长期间微生物固持的化肥氮逐渐释入     

提高稻田尿素氮利用率若干方法与机理探讨

应用15N示踪技术,研究了稻田使用脲酶抑制剂（BTPT）、硝化抑制剂（EP）及养萍对尿素氮肥效的影响。试验结果表明,稻田使用BTPT和EP均提高了氮素利用率及水稻产量,BTPT、EP和BTPT＋EP处理的15N回收率分别为17.4％、17.8％和18.0％,与不用抑制剂的对照相比,分别提高3.1、3.5和3.7个百分点;水稻产量分别为5300、5150和5450kg／hm2,比对照分别提高了11.8％、8.7％和15.0％。稻田养萍可以抑制氨的挥发,减少尿素氮的损失;养萍及养萍后翻压两种处理的15N回收率分别为28.8％和34.7％,比不养萍的对照分别提高了3.3和9.2个百分点;土壤15N残留率分别为29.3％和40.1％,比不养萍的对照分别提高了5.1和15.9个百分点。养萍对当季水稻产量增加效果不大,而养萍后翻压对当季水稻产量可提高近5％。