17β-雌二醇对AC细胞活性、细胞周期和超微结构的影响

通过免疫荧光获得雌激素α、β受体在体外星形胶质细胞（Acrocyte,AC）中表达的形态学证据;CCK-8法获得脂多糖（Lipopolysaccharide,LPS）激发AC的适宜浓度。在此基础上,研究了17β-雌二醇（17β-estradiol,E2）对AC的细胞活性、细胞周期和超微结构的影响。结果显示：E2作用AC 48h,10nmol/L E2可提高AC细胞活性和G2＋S%（P〈0.05）,而100,1 000nmol/L E2可降低AC细胞活性（P〈0.05）,100nmol/L E2还可降低G2＋S%（P〈0.05）;100nmol/L E2作用AC 24,48,72h,均可降低AC细胞活性和G2＋S%,以作用48h时抑制作用最强（P〈0.05）;10nmol/L E2可引起AC线粒体数量增加,细胞核分裂增多,但线粒体、粗面内质网结构正常,而100nmol/L E2可导致AC线粒体肿胀或空泡化,粗面内质网扩张或断裂。结果表明,低浓度（10nmol/L）E2促进AC增殖;高浓度（100,1 000nmol/L）E2抑制AC增殖。     

虫草素预防肥胖及通过ADORA1介导GH3细胞中泌乳素分泌研究

为了研究虫草素是否具有预防肥胖的作用及其可能机制,试验利用高脂饮食诱导肥胖型高脂血症大鼠动物模型,并给予高、中、低不同剂量（50、25、12.5 mg/（kg·d））的虫草素,连续灌胃35 d后观察大鼠体重、脂肪系数、血脂水平的变化;体外培养大鼠脑垂体瘤细胞（GH3）,通过CCK8、Western blotting、ELISA等方法检测虫草素对GH3细胞的增殖毒性,以及腺苷受体A₁（ADORA₁）的表达和对泌乳素分泌量的影响。体内试验结果显示,与正常对照组相比,模型组大鼠体重、脂肪系数和血脂水平（高密度脂蛋白（HDL）除外）均极显著升高（P<0.01）;虫草素高、中、低各剂量组均能极显著或显著降低大鼠体重、脂肪系数及总胆固醇（TC）、甘油三酯（TG）、低密度脂蛋白（LDL）水平（P<0.01;P<0.05）,但HDL水平仅在虫草素高剂量组中显著升高（P<0.05）,而虫草素中、低剂量组均无显著变化（P>0.05）;体外试验结果显示,虫草素浓度低于25 μg/mL时对GH3细胞增殖无影响;虫草素能够诱导GH3细胞ADORA₁表达升高;虫草素和ADORA₁激动剂（R-PIA）单独作用能显著或极显著降低泌乳素的分泌量（P<0.05;P<0.01）,虫草素与ADORA₁抑制剂（DPCPX）联合作用时能够在一定程度上阻断虫草素对泌乳素的抑制作用。结果表明,虫草素具有预防肥胖和降血脂的作用,其可能的作用机制是通过诱导ADORA₁表达抑制泌乳素的分泌,该研究结果将为虫草素作为一种潜在的减肥降脂药物的开发提供一定依据。     

Th17细胞及其与疾病的研究进展

辅助性T细胞17(T help cell 17,Th17)是2005年新发现的能够分泌白细胞介素17的CD4+ T细胞,其与Th1、Th2、Tregs细胞共同构成CD4+ T细胞的4个亚群,该细胞与炎症、各种感染性疾病、肿瘤和自身免疫性疾病的发生密切相关。作者对Th17细胞及其在某些疾病或病理过程中作用的研究进展进行了简要综述。     

华蟾毒精对胃腺癌细胞MGC-803作用的研究

研究华蟾毒精（cinobufagin,CBG）体外对人胃腺癌细胞MGC-803的抑制作用,并初步探讨其抗肿瘤的作用机制。MTT法测定CBG对胃腺癌MGC-803细胞的生长抑制情况;采用光镜观察CBG对人胃腺癌细胞MGC-803形态的影响;流式细胞术检测CBG对MGC-803细胞的抑制作用、细胞周期及细胞早期凋亡的影响。一定浓度范围内CBG对MGC-803细胞的增殖有剂量、时间依赖性抑制作用;光镜下可见细胞形态明显发生变化,细胞变圆,分泌颗粒增多,细胞折光性下降,大部分细胞脱壁;流式细胞仪检测MGC-803细胞,G1期细胞减少,大量细胞停滞在G2/M期,凋亡细胞增多。CBG对MGC-803细胞的抑制作用与诱导其细胞阻滞及凋亡密切相关。     

谷氨酰胺对延边黄牛卵母细胞成熟及重组胚发育的影响

为了提高卵母细胞的成熟率及重组胚胎的发育率,在体外成熟液中添加了不同浓度的谷氨酰胺,研究谷氨酰胺对延边黄牛卵母细胞成熟的影响,并观察它对重组胚胎后续发育的影响,从中筛选出最佳的体外培养条件。结果表明,1.0 mmol/L的谷氨酰胺能够显著提高卵母细胞的成熟率,同时也能提高囊胚发育率。说明谷氨酰胺能够提高延边黄牛卵母细胞的体外成熟率,并能促进囊胚发育。     

Inactivation of the Wnt/β-catenin signaling contributes to the epithelial barrier dysfunction induced by sodium oxalate in canine renal epithelial cells

High oxalate consumption has been recognized as a risk factor for renal calcium oxalate stones in companion animals (dogs and cats). However, the cellular signaling involved in oxalate-induced dysfunction in renal tubular epithelial cells remains not fully elucidated. In this study, Mardin–Darby canine kidney (MDCK) cells, an epithelial cell line derived from canine kidney tubule, were tested for cell proliferation activity and barrier function after being exposed to sodium oxalate (NaOx). Further, the involvement of Wnt/β-catenin in NaOx-induced renal epithelial barrier dysfunction was evaluated. MDCK cells treated with NaOx exhibited reduction in cell proliferation and migration. Besides, NaOx exposure led to a decrease in transepithelial electrical resistance and an increase in paracellular permeability. The deleterious effects of NaOx on epithelial barrier function were related to the suppressed abundance of tight junction proteins including zonula occludens, occludin, and claudin-1. Of note, protein levels of β-catenin and phosphorylated (p)-β-catenin (Ser552) in MDCK cells were repressed by NaOx, indicating inhibitory effects on Wnt/β-catenin signaling. An inhibition of glycogen synthase kinase-3β (GSK-3β) by SB216763 enhanced the abundance of β-catenin and p-β-catenin (Ser552), and protected against epithelial barrier dysfunction in NaOx-treated MDCK cells. The results revealed a critical role of Wnt/β-catenin signaling in the epithelial barrier function of MDCK cells. Activation of Wnt/β-catenin signaling might be a potential therapeutic target for the treatment of oxalate-linked renal stones.     

人工感染猪流行性腹泻病毒仔猪外周血SmIg+B细胞及T细胞的动态观察

本实验对猪流行性腹泻病毒(PEDV)—J毒株细胞培养毒接种的6头仔猪和3头健康仔猪外周血SmIg~+B细胞及T淋巴细胞的数量作了检测。T细胞用总E玫瑰花(Et)及活化E玫瑰花(Ea)试验作检测,SmIg~+B细胞用荧光素标记的葡萄球菌A蛋白(FITC—SPA)菌体法鉴定。结果:接种后,SmIg~+B细胞百分率显著上升,于第23天时达峰值(29.19±3.45),明显高于对照猪(P<0.05),Et玫瑰花百分率虽略有上升,但与接种前相比无统计学差异(P>0.05),而Ea玫瑰花百分率则显著低于接种前水平(P<0.01)。以上结果表明,PEDV—J毒株细胞培养毒可刺激仔猪B细胞明显增多。由此认为,B淋巴细胞积极参与PED的免疫反应过程,体液免疫是PED猪的主要免疫反应。     

玉米赤霉烯酮中毒大鼠卵巢组织Caspase-3和Caspase-8的表达

10周龄SD大鼠单剂量腹腔注射5 mg/kg玉米赤霉烯酮玉米油溶液,分别于3、6、12、24、48、72、96 h时剖杀取卵巢组织,检测不同时间卵巢组织Caspase-3和Caspase-8的表达.病理组织学观察发现,卵巢组织出现不同程度损伤,卵泡颗粒细胞发生凋亡.免疫组织化学超敏PV法结果表明,试验组与对照组卵巢组织中均有Caspase-3和Caspase-8的表达,并且随着时间的推进呈现动态变化.Caspase-3和Caspase-8试验组表达量均高于对照组.试验组卵巢组织中Caspase-3在3～96 h时表达量均比较高,与对照组相比较差异显著(P＜0.05),且3、6、12、24、48 h的表达量均高于72 h和96 h的表达量.6、12、72、96 h卵巢组织中Caspase-8表达量与对照组相比较差异显著(P＜0.05),3、24、48 h时与对照组相比差异不显著(P＞0.05),且3、6、12、24、48 h的表达量均高于72 h和96 h的表达量.结果表明,大鼠玉米赤霉烯酮中毒可引起卵巢组织的病变及颗粒细胞凋亡,且Caspase-3和Caspase-8在玉米赤霉烯酮中毒大鼠卵巢颗粒细胞凋亡中起着重要作用,进一步证明本试验中死亡受体途径的激活可能参与凋亡的发生.Caspase-8表达量在个别时间段与对照组差异不显著还有待于进一步深入研究.     

褪黑素的添加减轻猪精原干细胞的氧化损伤

旨在研究褪黑素(melatonin,MT)对体外培养猪精原干细胞(spermatogonial stem cells,SSCs)的作用机制.本研究采集3头7日龄健康大白公猪睾丸,利用差速贴壁法获得SSCs.后经形态学观察、碱性磷酸酶染色、标记基因检测及免疫荧光染色鉴定后以SSCs作为试验材料,设置MT浓度梯度(0、50...