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941.
用RT-PCR技术对猪瘟兔化弱毒C株、石门强毒株(Shimen)、近期地方流行的属于第1群毒株的新疆毒株(XJ)和第2群代表毒株甘肃临洮(LT)株E2基因的主要抗原区进行扩增,均得到约561bp的基因片段;经克隆测序及序列分析,该基因编码187个氨基酸残基,预计蛋白分子质量为21.7ku。将这4个基因分别克隆到原核表达载体pGEX-4T-1中,经酶切、PCR扩增和测序分析确证其正确插入到表达载体中,阅读框是正确的,从而构建成重组表达载体。重组质粒转化至宿主菌BL21(DE3)中,用异丙基硫代-β-半乳糖苷(IPTG)进行诱导表达,对表达的蛋白用SDSPAGE电泳、免疫印迹和薄层凝胶扫描分析。结果表明,E2基因的主要抗原区可以在大肠埃希氏菌中表达,表达的蛋白多以包涵体形式存在,表达产物的分子质量约为50.0ku,与理论推测的分子质量一致;薄层凝胶扫描分析表明。表达蛋白约占菌体蛋白总量的20.1%;免疫印迹结果证明,表达的E2蛋白可被猪瘟阳性血清所识别。 相似文献
942.
943.
phyA基因的克隆及其新型表达载体的构建 总被引:2,自引:0,他引:2
直接以黑曲霉菌株F246基因组为模板,对植酸酶基因phyA的成熟肽(分子长度为1347bp)进行了PCR扩增,再将PCR产物克隆入pMD18-T质粒,经DNA测序鉴定正确后,亚克隆入表达载体pET30a^ 和pMG36e,成功构建了phyA基因2种新型表达载体。植酸酶phyA基因2种新型表达载体的构建,为进一步获得大量、高活性植酸酶以及研究和开发新型微生态制剂打下了基础。 相似文献
944.
《中国兽药杂志》2004,38(5):67-67
据“中央社”发自日内瓦的消息说,世界卫生组织(WHO)已发展出H5N1禽流感原型病毒,但由于禽流感疫情趋缓,人类恐惧降低,药厂对大量生产疫苗意愿不高,到目前为止,只有三个实验室向WHO提出申请。WHO表示,他们运用”反转录媒”方式发展出H5N1原型病毒,目前只有三家实验室申请,美国医药界在“国家卫生院(NIH)”支持下,将进行临床试验。今年初H5N1高病原性禽流感疫情严重时,卫生专家忧虑这是全球性流行性感冒的前奏,WHO并全力加速研发疫苗的工作,当时有超过十家大药厂对生产疫苗表达了高度兴趣。生产预防大流行的疫苗,过程冗长,在WHO发… 相似文献
945.
串联启动子调控下的t-PAcDNA乳腺定位表达 总被引:1,自引:0,他引:1
由牛β-Casein启动子与大鼠WAP启动子串联构建了t-PAcDNA乳腺定位表达载体pSVL-WAPβ-PA,将3种表达载体pSVL-βb-PA,pSVL-WAP-PA及pSVL-WAPβ-PA分别注入怀孕家兔乳腺导管中,溶圈试验结果显示,3种表达载体均能在家兔乳腺中表达,且以分娩后第4d的乳汁中表达水平最高,分别为390,440,450ug.L^-1,本试验为进一步研究t-PA基因乳腺定位表达调控和建立t-PA乳腺生物反应器奠定了基础。 相似文献
946.
鸡马立克氏病是当今对养鸡业危害最大的疫病之一,加强对该病的防控和减少因此而导致的损失是当前面临的重要课题.随着生物技术的快速发展,对MDV基因和蛋白结构功能的研究取得可喜的进展,也为基因工程疫苗的研究提供了方向. 相似文献
947.
研究以鸡传染性喉气管炎病毒(ILTV)烟台株为模板,PCIK扩增出1条约2.7的gB基因片段,并将其克隆到pMD18-T载体中。序列测定显示,gB基因长2622bp,包含完的阅读框架。序列比较分析发现,烟台株和王岗株、河北株的班基因核苷酸序列与SA2株的比均在第89位上缺失1个碱基G,而在第102位核苷酸处插入1个碱基A,从而引起氨基酸序中第29-32位5个氨基酸的移码突变。烟台株还有另外7个碱基发生突变,使得其班基因与北株、王岗株、SA2疫苗株的gB基因核苷酸同源性分别为99.8%、99.7%和99.6%,氨基酸的同性分别为99.4%、99.4%、98.9%,表明不同ILTV毒株之间gB基因是非常保守的。划型相列河源 相似文献
948.
根据弧菌属细菌(Vibrio spp.)共有的rpo A基因序列,比对和设计了一对PCR引物,建立了能够快速而准确地检测弧菌属细菌的通用PCR检测方法,该方法对靶标DNA的检测灵敏度为58 fg/μL,对菌液的检测灵敏度为2.7×102cfu/m L,能够区分该属细菌与其它属的细菌,具有极高的特异性。使用建立的方法对分离自南美白对虾的病原菌进行了检验,并结合16S r DNA序列分析,结果显示待检测病原均为弧菌属的细菌,与测序结果一致,说明该检测方法可用于弧菌属细菌的检测和诊断。 相似文献
949.
950.