猪传染性胸膜肺炎放线杆菌的鉴定和耐药性研究

猪传染性胸膜肺炎是由猪传染性胸膜肺炎放线杆菌(Actinobacillus pleuralpneumoniae,APP)引起的一种高度传染性呼吸道疾病,临床上准确鉴定该病原菌并合理选择抗生素施药十分重要。研究比较了应用传统方法、PCR方法和MALDI TOF方法鉴定45株临床APP,并比较了三种优势血清型的毒力表型,最后测定了其对临床34种常见抗生素的MIC。结果发现MALDI TOF微生物学鉴定方法具有快速、准确的优势;临床菌株血清型主要包括3型（20株）、1型（13株）、7型（7株）,其他血清型菌株5株,其中1型毒力最强;APP对罗红霉素、头孢噻呋、恩诺沙星、氨苄西林等高度敏感,对四环素、土霉素等耐药率较高。研究为临床快速鉴定APP和合理选择用药提供了参考依据,为APP临床耐药折点的制定奠定了基础。     

一株牛源乡间布丘菌的分离鉴定及耐药性研究

为了解奶牛乳房炎病原微生物的生物学特性及其耐药性,本研究从奶牛乳房炎乳中分离到的一株革兰氏阴性菌,命名为HLJ-36,对其进行形态特征、生化鉴定、分子生物学鉴定、小鼠致病性试验及药敏试验。生化试验结果显示,木糖、ONPG、柠檬酸盐等反应呈阳性,氧化酶、吲哚、尿素酶等反应呈阴性。理化特性与分子生物学试验结果均显示,分离株与乡间布丘菌特征相符,与人源乡间布丘菌肠道分离株（GenBank登录号：NR_041968.1）同源性最高,达99%。小鼠致病性试验结果显示,试验组小鼠72 h内未发生死亡,表明其致病性较弱。药敏试验结果显示,该菌对头孢噻呋、阿奇霉素、环丙沙星等耐药,对头孢西丁、美罗培南、氯霉素、阿莫西林-克拉维酸、庆大霉素敏感。结果表明,乡间布丘菌可能是引起奶牛乳房炎的一种病原菌,并有一定程度的耐药性,由于该菌与人源乡间布丘菌肠道分离株（GenBank登录号：NR_041968.1）同源性最高,有通过乳及乳制品传播给人类的可能,本试验具有一定的公共卫生学意义。     

一例副猪嗜血杆菌病的诊断与防治

2018年7月20日,山东省泰安市某猪场新购仔猪发生以腹泻、消瘦、贫血、呼吸困难为主要临床症状的疾病,发病率和死亡率分别为26.80%(67/250)和19.20%(48/250),病死率达71.64%(48/67)。剖检发现,病猪全身淋巴结肿大、出血,心外膜、胸膜、肠系膜、脑膜以及肝、脾表面有多量纤维素性渗出物,肝、脾肿大。取病猪肝脏病料进行细菌分离和PCR检测,发现分离株与副猪嗜血杆菌NCTC4557株同源性为99.00%;琼脂扩散试验结果显示,分离菌株为副猪嗜血杆菌血清4型。结合临床症状、剖检病变及实验室检测结果,确诊该病例为副猪嗜血杆菌感染。药敏试验结果显示,该分离菌对头孢噻呋、恩诺沙星、多西环素、阿莫西林、氟苯尼考等药物敏感。随采用饲料内拌入5.00%的阿莫西林可溶性粉,对病猪肌内注射头孢噻呋钠进行治疗,同时对猪舍内外进行喷洒消毒,疫情因此得到有效控制。由此提示,猪场应通过加强饲养管理和生物安全管理,减少应激因素,合理实施疫苗免疫等措施预防该病发生;一旦确诊疫情,要根据药敏试验,选用高敏感药物进行治疗。     

2018年内蒙古察右后旗绵羊捻转血矛线虫流行病学调查及耐药性检测

为了解草原放牧绵羊捻转血矛线虫流行情况及目前常用驱虫药物的耐药情况,2018年3—10月,根据不同草场类型、不同养殖模式,在内蒙古乌兰察布市察右后旗贲红、白音察干、大陆号、锡林郭勒、土牧尔台5个地区选择16个牧场,每个牧场随机选择15只绵羊,共240只,进行绵羊捻转血矛线虫检测,发现绵羊捻转血矛线虫平均感染率为75%,平均感染强度为14.8×200个/g;选取6个牧场的感染率和感染强度都较大的绵羊进行驱虫试验,发现有5个牧场的绵羊捻转血矛线虫对阿苯达唑和伊维菌素产生了较强的耐药性。调查结果表明,察右后旗的绵羊捻转血矛线虫流行较为普遍,羊群感染较为严重,且对阿苯达唑、伊维菌素产生了不同程度的耐药性。结果提示,加强捻转血矛线虫的耐药性监测,研发新的驱虫药物,优化驱虫措施,防止盲目用药,同时加强饲养管理,改善圈舍和牧地环境卫生,依然是有效防控绵羊捻转血矛线虫的重要途径。     

依法申请行政强制执行兽药案的思考

2017年,甘肃省夏河县农牧林业局对一起经营假兽药的违法行为进行了依法立案查处。在行政处罚决定书送达后当事人拒不履行行政处罚决定义务,执法机关申请人民法院进行了强制执行,案件执行完毕。本文通过对案件来源、查处过程和申请强制执行情况进行了讨论,梳理了假兽药认定和违法所得核算的相关依据,明确了申请强制执行的业务流程,为切实加强农业行政处罚管理,严格落实行政处罚措施提供参考。     

螺旋藻抗炎和免疫增强作用的研究

试验旨在探讨螺旋藻抗炎作用及其对机体免疫功能的影响。试验通过二甲苯致小鼠耳肿胀,构建小鼠体内炎症模型,以地塞米松为阳性对照药物,以小鼠耳肿胀为观察指标,探讨螺旋藻的体内抗炎作用;通过环磷酰胺构建小鼠免疫抑制模型,以不同剂量螺旋藻处理后测定免疫抑制小鼠及正常小鼠的脏器指数、血清白细胞介素2（IL-2）、白细胞介素6（IL-6）、白细胞介素1β（IL-1β）、肿瘤坏死因子α（TNF-α）、干扰素γ（IFN-γ）水平,同时结合脾脏及胸腺病理组织学观察,探讨螺旋藻对免疫抑制小鼠及正常小鼠免疫功能的影响。结果表明,在螺旋藻对小鼠体内抗炎作用影响的试验中,0.3%螺旋藻灌胃对小鼠耳肿胀的抑制率极显著高于地塞米松对照组和其他螺旋藻处理组（P<0.01）,且螺旋藻对各试验组小鼠的脏器指数无不良影响,差异不显著（P>0.05）;在螺旋藻对小鼠免疫功能影响试验中,与空白对照组相比,环磷酰胺阳性对照组脾脏指数和胸腺指数极显著下降（P<0.01）;肝脏指数极显著上升（P<0.01）,其它各剂量螺旋藻处理组小鼠胸腺指数跟空白对照组相比差异不显著（P>0.05）,各组小鼠血清IL-2、IL-6、TNF-α、IFN-γ水平差异不显著（P>0.05）;通过病理组织学观察发现,环磷酰胺阳性对照组小鼠的脾小体萎缩、胸腺小体减少、淋巴细胞及网状细胞变性坏死,而各剂量螺旋藻处理组的脾小体和胸腺小体结构清晰完整、淋巴细胞增多。综上,螺旋藻能降低地塞米松和环磷酰胺对小鼠的免疫抑制,并且能修复小鼠脾脏和胸腺损伤,说明其在抗炎和缓解免疫抑制方面具有一定的作用。     

广西某地区猪源大肠杆菌耐药性及部分菌株耐药基因调查

试验旨在探究广西某地区猪源大肠杆菌的耐药性及部分菌株所含耐药基因情况,为预防及治疗动物性大肠杆菌类疾病提供参考。采用麦康凯琼脂培养基及伊红美蓝琼脂培养基初步鉴定、显微镜镜检、分子生物学16S rRNA鉴定、药物敏感性二倍肉汤微量稀释法等方法进行大肠杆菌的分离鉴定,并结合PCR相关技术对部分菌株的三十余种耐药基因进行检测。结果显示,从广西某地区采集的猪源病料中共分离得到65株猪源大肠杆菌,其均为多重耐药大肠杆菌且多集中于六重耐药与七重耐药。按所耐抗菌药物的种类分析发现其对β-内酰胺类、磺胺类、大环内酯类药物具有较高耐药性,耐药率分别98.46%、90.77%及84.62%,进一步分析发现其主要是对头孢噻呋钠、阿莫西林、磺胺间甲氧嘧啶、阿奇霉素等抗菌药物具有较高耐药性,对美罗培南、阿米卡星、黏杆菌素较为敏感。对部分菌株所含耐药基因进行整理发现,其多含有四环素类（tetA、tetM）、β-内酰胺类（CTX-m-u）及磺胺类（Sul2）耐药基因。综上所述发现广西地区猪源大肠杆菌耐药性情况较为严重,所含耐药基因也相对较多,因此在实际生产中需采用联合用药等相关措施进行疾病治疗以达到快速高效治疗疾病的目的。     

狐狸流产奇异变形杆菌的分离鉴定及特征分析

为明确引起狐狸流产的主要原因,确定主要病原体并提出有效防控措施,试验收集了河北地区多个流产狐狸的脾脏和卵巢,利用细菌分离培养、形态观察、药敏试验、16S rRNA基因测序和序列分析及同源性比对等方法对引起狐狸流产的病原体进行分离鉴定,分析其耐药性,筛选有效治疗药物;同时对病原菌的致病力进行检测。结果显示,从流产狐狸病变的脾脏和卵巢中分离到了1株单一的革兰氏阴性菌,命名为FOX-abortion-Hebei。药敏试验结果显示,该菌对头孢哌酮等11类药物敏感,而对妥布霉素等5类抗菌药物中度敏感。动物试验结果显示,该菌株具有较强的致病性,攻毒小鼠和狐狸后均可引起动物死亡。16S rRNA测序和同源性分析结果显示,分离到的革兰氏阴性菌为奇异变形杆菌（Proteus mirabilis,PM）,与已公布序列的同源性为93.6%~99.9%;系统进化树结果显示,该菌与埃及分离到的菌株（AUMC B-199）亲缘关系最近。本研究明确了狐狸流产主要是由奇异变形杆菌感染所致,也是首次在流产狐狸中分离到该菌,且能引起严重的繁殖障碍,需在狐狸养殖中加以防控。     

Feed–drug interaction of orally applied butyrate and phenobarbital on hepatic cytochrome P450 activity in chickens

The expression of hepatic drug‐metabolizing cytochrome P450 (CYP) enzymes may be affected by several nutrition‐derived compounds, such as by the commonly applied feed additive butyrate, possibly leading to feed–drug interactions. The aim of this study was to provide some evidence if butyrate can alter the activity of hepatic CYPs in chickens exposed to CYP‐inducing xenobiotics, monitoring for the first time the possibility of such interaction. Ross 308 chickens in the grower phase were treated with daily intracoelomal phenobarbital (PB) injection (80 mg/kg BW), applied as a non‐specific CYP‐inducer, simultaneously with two different doses of intra‐ingluvial sodium butyrate boluses (0.25 and 1.25 g/kg BW) for 5 days. Activity of CYP2H and CYP3A subfamilies was assessed by specific enzyme assays from isolated liver microsomes. According to our results, the lower dose of orally administered butyrate significantly attenuated the PB‐triggered elevation of both hepatic CYP2H and CYP3A activities, which might be in association with the partly common signalling pathways of butyrate and CYP‐inducing drugs, such as that of PB. Based on these data, butyrate may take part in pharmacoepigenetic interactions with simultaneously applied drugs or other CYP‐inducing xenobiotics, with possible consequences for food safety and pharmacotherapy. Butyrate was found to be capable to maintain physiological CYP activity by attenuating CYP induction, underlining the safety of butyrate application in poultry nutrition.