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21.
22.
沈涛 《农业图书情报学刊》2013,25(12):184-187
游戏服务研究在美国兴起并在实践中开花结果。基于波特价值链模型,探讨图书馆游戏服务的基本活动和支持活动,结合国内图书馆馆情,构建了切合实际的服务策略。 相似文献
23.
基于牡蛎疱疹病毒DNA聚合酶基因的巢式PCR检测方法的建立及应用 总被引:1,自引:0,他引:1
为了建立适用于Os HV-1不同变异株的检测方法,在牡蛎疱疹病毒(Os HV-1)3个变异株全基因组序列比对的基础上,筛选到牡蛎疱疹病毒基因组中高度保守的DNA聚合酶(DNA polymerase)基因,据此设计巢式PCR引物,优化PCR反应体系和条件,建立了基于Os HV-1 DNA聚合酶基因的巢氏PCR检测方法(P-n PCR检测方法),利用P-n PCR与Cn PCR检测方法对不同年份和宿主来源的Os HV-1疑似感染样本进行检测。结果显示,Pn PCR检测方法能稳定地检出100拷贝/μL的病毒DNA;P-n PCR较C-n PCR检测方法具有更强的特异性和更高的检出率。研究表明,本研究建立的P-n PCR检测方法适用于Os HV-1不同变异株的检测,可为该病毒的检测和流行病学调查提供可靠的技术支持。 相似文献
24.
聚合酶链反应检测猪细小病毒的研究 总被引:17,自引:1,他引:17
本研究成功地建立了检测猪细小病毒(PPV)的聚合酶链反应(PCR)技术。以16个核苷酸引物对首次完成了PPVDNA结构蛋白VP1编码区228bp片段的扩增。同样数目的另一引物对,也成功扩增了Vp2编码区158bpDNA片段。PPVBM-1株与其它国内分离株(广西株、天津株和哈尔滨株)均出现相同扩增结果。琼脂糖凝胶电泳显示了特异条带(VP1228bp.Vp2158bp),而伪狂犬病病毒、犬细小病毒均未扩增,表明了本方法的特异性。同时,限制性内切酶分析(Vp1228bp及Vp2158bp分别含单一PvuⅡ、EcoRⅠ位点),也证实了特异性。本方法敏感性高,可检出10fg模板DNA。既可作样品的快速检测,又能检查细胞系的污染。具有特异、简便、快速的优点。 相似文献
25.
运用PCR在中国对虾的小片段基因组文库中快速筛选含有微卫星序列的重组阳性克隆。PCR中使用的引物为载体pGEM-3(zf( )上多克隆位点两侧的T7/Sp6启动子引物和根据微卫星核心重复序列设计的STR引物:STR1:5‘-ATATATATATAT-3‘:STR2:5’-TCTCTCTCTCTC-3’,直接使用含有重组克隆的菌液,在PCR反应前增加一段裂解细菌的高温。筛选出来的含有微卫星序列的重组阳性克隆经DNA测序验证。结果证明,采用PCR方法用菌液快速筛选含有微卫星序列的重组阳性克隆完全可行,而且具有简便、快速、高效、不涉及同位素操作等优点。 相似文献
26.
大菱鲆AFLP分析体系的建立 总被引:5,自引:0,他引:5
本研究构建了大菱鲆扩增片段长度多态性(AFLP)分析体系,对DNA提取、双酶切反应、连接反应、预扩增反应、选择性扩增反应和银染等步骤进行了分析。结果表明,用EcoRI/MseI双酶切、核心序列加3个选择性碱基的选择性扩增引物、1∶6(w∶w)的EcoRI端与MseI端选择性扩增引物比和20μl选择性扩增体积,可得到十分稳定的结果。所得产物经电泳和银染后可获得条带清晰、背景干扰小的图像。该体系的构建为AFLP技术在大菱鲆相关研究中的应用奠定了基础。 相似文献
27.
农机链传动的可靠性设计 总被引:1,自引:0,他引:1
按照农机链工况的特点,提出了对农机链传动进行可靠性设计时的前提条件,论证了以链条疲劳可靠性作为链传动可靠性评定指标的理由,选定了具体进行链传动可靠性计算的方法。文中首次为读者提供了计算链传动可靠性的实例。 相似文献
28.
在分析ISO10823、DIN8195、ANSIB29.^-1等标准和有关文献的基础上,结合一些国际知名链条公司的功率曲线,探讨了ISO10823功率曲线的建立基础,提出了使用标准时应注意的问题。 相似文献
29.
精确计算链传动垂度方法的研究 总被引:1,自引:0,他引:1
给出了精确计算链传动垂度的方法,指出了链传动的垂度与链条和链轮的啮合位置有关,首次考虑了链传动垂度的变量性质,并利用此法求出了链传动垂度变化量的最大值和最小值以及松边两端的张力。 相似文献
30.