猪O型口蹄疫病毒强弱毒株VP1基因的克隆与序列分析

本研究根据口蹄疫病毒（FMDV）VP1基因的序列，设计并合成了1对用于扩增整个VP1基因的引物（5P、P6）。从细胞培养液或组织中提取总RNA，通过PT－PCR扩增，从F29株O3I3株和T509株中均获得了1条约740bp的DNA电泳带。将PCR产物双酶切后电泳回收，插入到相应双酶切的pUC18质粒中，获得了重质粒。通过PCR鉴定，证明重组质粒pUCVP1/F29,pUCVP1/0313,pUCVP1/T509均插入了VP1基因。对上述3个重线质粒进行测序后分析，F29强毒株与O313、T509弱毒株相比，其核苷酸序列同源性分别为98．75％和99．06％；因F29株核苷酸发生3个碱基缺失与1个碱基替换，故推导的氨基酸序列同源性分别仅为44．13％和41．32％，而T509和O3I3株相比，其核苷酸、氨基酸序列同源性分别为99．37％和95．31％。通过序列分析发现，本研究的3个毒株与国内大多数毒株（包括1997年台湾暴发FMDV所分离的毒株，除O／A／58株外）均属同一基因型，核苷酸序列同源性为85％－94％；而与国外毒株相比，属不同的基因型，核苷酸序列同源性仅为81％－82％，其推本研究的3个毒株与国内分离的大多数毒株的VP1基因的氨基酸序列同源性高达87％－95％，本项研究对猪O型FMDV的强弱毒株VP基历进行克隆与序列分析，将进一步丰富我国FMDV毒株VP1基因资料库，为更加科学地防制FMD提供分子水平依据。     

RT-PCR及RFLP分析技术对鸡传染性支气管炎病毒的诊断和S1基因分型的研究

本研究使用分别扩增整个S1糖蛋白基因 (引物A)和S1糖蛋白基因N_端高变区Ⅰ (引物B)的 2对引物对 3个IBV标准株M41、Connecticut、Arkansas及 5个地方分离株 (C60 ,D41A ,D41B ,A112 1,A1171)进行RT_PCR扩增。用引物A时 ,有 5个IBV毒株扩增到目的片段 (172 0bp) ;用引物B时 ,所有 8个IBV毒株均得到与预计大小相符的目的产物 (2 2 8bp)。对 172 0bp的PCR产物用限制性内切酶HaeⅢ进行酶切 ,结果得出 3个不同的RFLP图谱 ,其中M41、Connecticut、D41B具有相同的HaeⅢ酶切图谱。Arkansas和D41A则分别具有互不相同的图谱 ;对 2 2 8bp的PCR产物进行DdeⅠ、RsaⅠ限制性内切酶消化 ,根据它们的RFLP图谱 ,8个IBV毒株可分为 5个基因型。综合 2对引物的PCR产物的RFLP分析结果 ,8个IBV毒株可分为 7个基因型 ,分型的结果与传统的血清学方法吻合。本研究建立的方法和技术具有快速、简单、特异、灵敏等优点 ,为现场流行毒株的定型(基因型 /血清型 )及其S1基因变异的跟踪研究以及更有效防制传染性支气管炎奠定了基础。     

我国部分地区ＮＤＶ的分子流行病学研究

本研究根据新城疫病毒（ＮＤＶ）Ｆ基因编码区１－３７４位核苷酸序列计算其遗传距离并给出了ＮＤＶ的系统发育进化树，将６８株ＮＤＶ分为９个基因型（３０株为国内分离株），其中Ⅰ－Ⅵ是早已存在的老基因型，Ⅶ、Ⅷ、Ⅸ为新发现的基因型，特别是Ⅸ为我国特有的基因型（Ｆ４８ＥＯ、Ｍ３、ＨＬＪ－３、ＨeB-1P和ＮＭ－５）。１９９７－１９９９年我国云南、广西、甘肃、陕西、新疆等地分离的ＹＮ－１Ｐ、ＧＸ－３、Ｈ１、Ｈ２、Ｐ１、ＧＸ－１、ＧＸ－２、ＧＳ－３、ＳＨＸ－２、ＳＨＸ－３、ＳＨＸ－６、ＳＨＸ－７、ＸＪ－２和１９９１年分离的ＨuB-1均属于Ⅶ基因型，该基因型的病毒是９０年以来引起新城疫发生的主要病原。根据遗传距离和分离年代可将此基因型进一步划分为５个基因亚型，分别是Ⅶa、Ⅶb、Ⅶc、Ⅶd和Ⅶe。此外ＨuN-1/98、HLJ-4/95和ＨeH-1P属一个老的基因Ⅵ，１９７９－１９８５年分离自青海的ＱＨ－１、ＱＨ－２、ＱＨ－４属于一个新的基因型－Ⅷ型。可见在我国新城疫的流行是极其复杂的，既有老基因型的危害（Ⅰ－Ⅵ），又有新基因型（Ⅶ）的流行，更有我国独特Ⅷ和Ⅸ基因潜伏。     

真核表达载体构建表达ＰＲＶ闽Ａ株gE基因表位抗原编码区片段的重组质粒

根据伪狂犬病病毒闽Ａ株gE基因表位抗原编码区的序列与身份种真核表达载体pPICZaA、pAcGP67A序列与特性分别设计了两对ＰＣＲ引物。通过ＰＣＲ方法扩增到了两端具有不同酶切位点的gE基因表位抗原编码片段。将这２个片段分别克隆到pPICZaA与pAcGP67A载体，转化大肠杆菌ＴＯＰ１０菌档及ＸＬ１－Ｂlue菌株，获得了含伪狂犬病病毒闽Ａ株gE基因表位抗原编码区的重组质粒pICZaA-FS与pAcGP67A-FS。序测定结果显示两个重组质粒中插入片段的大小与方向均正确。     

山羊多胎性研究概况

多胎性、受胎率以及成活羔羊数为繁殖性能高低的三个主要影响因素.其中以多胎性的变量最大.通过多胎性的研究,可大大提高繁殖性能,进一步增强养羊的经济效益.     

焉耆垦区新春6号大面积减产原因初探

新春6号是1990年引入焉耆垦区的春小麦新品种,近几年推广面积不断扩大占垦区小麦总面积的95%以上.1995年垦区部分团场新春6号大面积减产,减产较重的有22团27团,其中仅22团小麦减收1218.3吨.直接经济损失达177万元.关于减产原因有人认为是赤霉病所致,还有人认为是除草剂百草敌对小麦产生了药害.据江苏农科院马晓洲报道,百草敌剂量过高时会影响小麦结实器官发育.另据江苏黄海农场钱希报道,百草敌使用技术不当将产生药害严重者甚至颗粒无收.新疆目前还没有关于百草敌药害方面报道.我们根据大田调查和田间试验着重研究探讨了百草敌对新春6号产量的影响,为大田生产做借鉴.1.材料、方法1.1 供试品种及药剂供试品种新春6号,除草剂48%百草敌1.2 方法大田调查数据来自22团,大田喷药时期分别在主茎叶龄达3—4叶,4—5叶,5—6叶时,喷药量分别为225ml/hm~2,300ml/hm~2,.小区试验在农大网室.小区面积66m~2,设6个处理,6个对照,在主茎叶龄达5—6叶时喷药,用药量450ml/hm~2,.     

卵光刺激素基因研究概况

通过候选基因法 ,证明了卵泡刺激素基因与动物产仔性能显著相关 ,其显著效应受到国内外普遍关注。本文从FSH基因的分子结构、生理功能和生物合成、基因定位及其在遗传图谱的位置、突变与生殖的关系四个方面作一综述 ,并探讨了FSH基因的研究趋势及应用前景     

大白菜新品种中熟6号的选育

中熟 6号是由大白菜雄性不育系 98- 2 - 1和从丰抗 70中多代自交分离而选育出的自交系F - 3-2 - 3配制而成的优良一代杂种。抗霜霉病、病毒病与软腐病 ,生长期 6 0～ 6 5d(天 ) ,叶球叠抱、圆头、卵圆形。南方栽培平均单球质量 2 .0kg ,每 6 6 7m2 产量 4 0 0 0～ 5 0 0 0kg。     

电脉冲及6-DMAP对小鼠卵母细胞孤雌激活的研究

实验研究了不同电脉冲条件、6-DMAP作用不同时间以及二者联合使用时对注射hCG后18～19h采集的小鼠卵母细胞孤雌激活及发育的效果。结果表明：4、鼠卵母细胞电激活后，放入2mmol／L6-DMAP的CZB中作用6h，其激活率和囊胚率都显著高于单独使用一种激活方法。其中场强2．0kv／cm，脉宽80μS，3次脉冲结合6-DMAP组的激活率和囊胚发育率最高，与其他两组差异显著。