鸡肉、鸡蛋中4种酰胺醇类药物残留的液相色谱-三重四级杆串联质谱(UPLC-MS/MS)分析方法建立

建立了鸡肉、鸡蛋中4种酰胺醇类药物(氯霉素CAP、氟苯尼考FF、甲砜霉素TAP、氟苯尼考胺FFA)残留的超高效液相色谱-三重四级杆串联质谱(UPLC-MS/MS)快速分析方法。样品用80%的乙腈震荡提取,经过PRiME HLB固相萃取柱直接净化,在40℃下氮吹浓缩,最后用10%乙腈复溶。以0.01%甲酸水-0.01%甲酸乙腈溶液作为流动相进行梯度洗脱,采用多反应监测(MRM)模式进行测定,内标法定量。4种酰胺醇类药物在0.5~20 ng/mL的浓度范围内呈现良好的线性关系,R₂^在0.9982~ 0.9988范围内。添加量为0.5、1、5μg/kg时,鸡肉中4种酰胺醇类药物回收率为89.6%~104.2%,鸡蛋中4种酰胺醇类药物回收率为85.9%~105.5%。通过回收率和精密度试验得出该方法具有较好的准确度和重复性。通过试验得出4种酰胺醇类药物检出限为0.05~0.1 μg/kg,定量限为0.2~0.5 μg/kg,本法操作简便、灵敏,准确,适合大批量鸡肉、鸡蛋样品中4种酰胺醇类药物的检测。     

鸡溶菌酶基因3＇端MAR在同源细胞系对基因表达调控的研究

用带有鸡溶菌酶基因增强子（Ｅ）和启动子（Ｐ）的编码细菌氯霉素乙酰基转移酶（ＣＡＴ）的融合基因（ＥＰＣ），在其上游区、下游区或在上游和下游区同时插入鸡溶菌酶基因３＇端核基质附着区（ＭＡＲ）的不同表达载体ＭＥＰＣ、ＥＰＣＭ和ＭＥＰＣＭ，稳定转染鸡ＨＤ１１Ｐｒｏｍａｃｒｏｐｈａｇｅ同源细胞系，筛选不同表达载体稳定整合后的细胞株，检测ＣＡＴ表达水平，确定其表达基因拷贝数，从而分析鸡溶菌酶基因３＇端ＭＡＲ对基因表达的影响。稳定整合表达和瞬时表达实验结果表明，鸡溶菌酶基因３＇端ＭＡＲ在同源细胞系对基因表达没有激活作用，与该基因５＇端ＭＡＲ在同源或异源细胞系中能激活基因表达形成鲜明对照，说明５＇瑞ＭＡＲ和３＇端ＭＡＲ在调节鸡溶菌酶基因表达上存在一种协调关系。     

满江红作为家禽益生元的可行性研究

用分别添加0．5％、1％与10％满江红的配合饲料喂1日龄AA肉鸡，21日龄、42日龄的体重0.5％、1％添加组显著高于10％添加组和对照组（P〈0．05）。0．5％、1％添加组鸡只粪便的双歧杆菌和乳酸茵的总数较对照组增多60％，而大肠杆菌数量则下降67％。不同浓度的满江红溶液，添加于培养基中，进行体外增茵和抑茵试验，满江红对双歧杆菌体外增殖和大肠杆菌体外抑制均有良好的效果。以上结果表明，满江红可以作为家禽益生元。     

禽白血病病毒J亚群诱导蛋鸡群多种肿瘤

2009年8月,山东泰安某海兰褐商品蛋鸡场,开产后产蛋率只有60％～70％,31周龄时,死亡率突然增加,最高达20％.患病鸡经大体剖检、病理组织学、PCR和免疫组织化学检测确诊为J亚群禽白血病.病理组织学检测发现送检鸡除了髓细胞瘤外,还存在明显的纤维肉瘤、组织肉瘤、腺癌和血管内皮瘤等肿瘤.纤维肉瘤单独存在,组织肉瘤、腺癌和血管内皮瘤分别和髓细胞瘤混合存在,本文详细描述了各肿瘤的组织学特点.ALV-J从肉种鸡传向商品蛋鸡后引起肿瘤谱扩展的原因和机制值得进一步研究.     

益生菌发酵棉粕对黄羽肉鸡小肠黏膜形态、血清T淋巴细胞亚群及肠道菌群的影响

本试验旨在研究添加不同比例益生菌发酵棉粕对黄羽肉鸡小肠黏膜形态、血清T淋巴细胞亚群及肠道菌群的影响。选用14日龄健康黄羽肉鸡320只,随机分成4组,每组4个重复,每个重复20只鸡,Ⅰ组为空白对照组,Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ组分别添加3%、6%和9%发酵棉粕,研究不同添加量对肉鸡生长前期(14～28日龄)、中期(29～45日龄)、后期(46～65日龄)各阶段小肠黏膜形态,中、后期血清T淋巴细胞亚群及后期肠道菌群的影响。研究结果显示:①与Ⅰ组相比,Ⅲ组黄羽肉鸡前、中、后期的十二指肠绒毛高度极显著提高31.90%、25.17%、49.41%(P<0.01),隐窝深度极显著降低9.42%、11.31%、10.83%(P<0.01),V/C极显著提高45.65%、41.19%、67.84%(P<0.01);空肠绒毛高度极显著提高28.72%、28.38%、27.61%(P<0.01),隐窝深度显著或极显著下降6.65%(P<0.05)、6.18%(P<0.01)、7.37%(P<0.01),V/C极显著提高37.84%、36.69%、37.82%(P<0.01);回肠绒毛高度极显著提高76.64%、40.36%、67.20%(P<0.01) ,隐窝深度显著降低4.09%、6.07%、6.02%(P<0.05),V/C极显著提高83.79%、49.27%、78.26% (P<0.01)。②中、后期Ⅳ组黄羽肉鸡CD4⁺/CD8⁺显著提高42.86%、34.95%(P<0.05)。③随着发酵棉粕添加量的增多,黄羽肉鸡的十二指肠、空肠、回肠中乳酸菌的数量逐渐增多,且差异越来越明显,除Ⅱ组十二指肠和空肠段外,其余各组的各肠段差异均显著或极显著(P<0.05;P<0.01)。大肠杆菌和沙门氏菌的数量逐渐减少,且差异越来越明显,除Ⅱ组十二指肠段外,其余各组各肠段差异均显著或极显著(P<0.05;P<0.01)。综上所述,6%发酵棉粕组在提高十二指肠、空肠、回肠绒毛高度、V/C,降低其隐窝深度方面都优于3%、9%发酵棉粕组,而9%发酵棉粕组在提高CD4⁺/CD8⁺、肠道乳酸菌数量和降低大肠杆菌和沙门氏菌数量方面优于3%、6%发酵棉粕组。     

1株野鸭源鸡贫血病病毒的分离鉴定及其编码区基因序列分析

利用MDCC细胞系从东北地区采集的死亡野生鸟类样品中分离获得1株禽类病毒,对该病毒进行特异性PCR、特异性间接免疫荧光法等系统鉴定后,证实该分离株为鸡贫血病病毒(CAV),命名为WDNE110501株.利用PCR方法克隆出其编码区基因片段,测序结果表明,WDNE110501株的编码区全长为1 823 bp,无碱基缺失或插入.并将该基因序列和推导的氨基酸序列与国内外已发表的34个CAV株编码区基因进行同源性和亲缘关系的比对分析,同源性为96.1％～99.8％;氨基酸的同源性为89.8％～99.7％,与国内毒株harbin的差异最小,与国外最近的是美国毒株98D02152.序列比较表明CAV的3个编码基因VP1、VP2和VP3均有一定程度变异,以VP1变异性最大,且在不同毒株间的这3个阅读框的氨基酸序列变异是互不相关的.这是首次在野生鸟类中分离出CAV病毒,提示了我们野生鸟类在鸡传染性贫血病病毒传播和分布中可能起到一定作用.     

组学技术分析肉鸡胚胎发育过程中肝脏蛋白表达的变化

旨在探讨肉鸡胚胎在发育中后期肝脏蛋白水平的变化。本试验选取120枚重量为（65±0.2）g的罗氏308肉鸡种蛋,分为14胚龄（E14）和出壳1日龄（H1）两组,每组3个重复,每个重复20枚种蛋。孵化至E14胚龄和H1日龄时,采集肝脏组织样本,应用相对和绝对定量的等量异位标签（isobaric tags for relative and absolute quantitation,iTRAQ）结合生物信息学分析技术筛选核心差异蛋白。结果显示,在E14和H1日龄之间共筛选出10个核心差异蛋白,主要促进脂肪酸降解（上调ACOX1、ACSL1、ACSL5、CPT1A和ECI2）和糖异生（上调ALDH3A2、FBP1、FBP2、GPI和PGM2,下调LDHB和ALDH9A1）。试验结果提示,胚胎发育的主要能量供给途径是脂肪酸降解,而不是糖酵解。此外,糖异生增多,促进糖原储存以应对出壳以及营养环境变化。     

两个海大香肉鸡品系屠宰性能与肉质性状的比较

以在相同条件下饲养的72日龄海大香Ⅱ号鸡、海大香特Ⅱ号鸡为研究对象,测定其屠宰性能及部分肉质指标.结果表明:两品系产肉性能均良好,Ⅱ号鸡和特Ⅱ号鸡的屠宰率平均为90.99%及89.72%,全净膛率平均为69.90%及67.78%;无论在两品系间还是性别间,肌间脂宽、皮下脂厚、腹脂率以及胸腿肌含脂率等各项脂肪指标皆差异不显著(P＞0.05);特Ⅱ号鸡(慢速生长)的脂肪沉积能力要比Ⅱ号鸡(中速生长)高;两品系的胸腿肌肉含脂率均表现为母鸡比公鸡高的趋势;无论在两品系间还是性别间,胸腿肌失水率及蒸煮损失率皆差异不显著(P＞0.05);同一样本中,胸肌失水率大于腿肌,腿肌的蒸煮损失率大于胸肌.     

环磷酰胺预处理制备兔抗Ⅰ型鸭肝炎病毒高免血清

以正常鸡胚尿囊液和环磷酰胺预处理试验兔, 再以Ⅰ型鸭肝炎病毒（Ｄｕｃｋ Ｈｅｐａｔｉｔｉｓ Ｖｉｒｕｓ Ｔｙｐｅ Ⅰ, ＤＨＶ Ⅰ） 标准强毒（ＡＴＣＣ, Ｃ９／Ｄ２） 接种后致死鸡胚的尿囊液, 经灭活、乳化制成油佐剂抗原多次免疫试验兔, 获得了鸡胚中和效价（ＥＰＤ５０） 达１∶３２ 以上的兔抗Ⅰ型鸭肝炎病毒高免血清（ＤＨＶ ⅠＳ） 。     

Which source and level of dietary sodium is appropriate for broiler chickens reared in a high‐altitude area?

This study investigated effect of increasing level of dietary sodium using sodium bicarbonate or sodium chloride on growth performance, mortality, characteristics of carcass, organs and tibia, calcium and phosphorus of serum in broilers reared in a high‐altitude area (1,700 m above sea level). A total of 588 Ross 308 male broiler chicks were used in seven treatments, six replicates per treatment of 14 birds per each from 1 to 38 d of age. Seven dietary treatments consisted of a basal diet (with 0.16% sodium and 0.23% chloride), top‐dressed for six diets to give three supplementary levels of sodium (0.07%, 0.14% and 0.21%) from sodium bicarbonate (respectively by 0.26%, 0.52% and 0.78%) or sodium chloride (respectively by 0.18%, 0.36% and 0.54%), resulting in seven diets with total sodium and chloride levels of 0.16% and 0.23%, 0.23% and 0.23%, 0.30% and 0.23%, 0.37% and 0.23%, 0.23% and 0.33%, 0.30% and 0.44%, 0.37% and 0.55% respectively. Increasing sodium level improved feed conversion ratio (FCR) linearly and quadratically. However, when FCR was calculated without adjusting for feed intake of mortalities, the enhanced sodium level did not improve this parameter. Increasing sodium level via sodium chloride enhanced ascites mortality, total mortality, relative weight of heart and right ventricle linearly. Increasing sodium level reduced serum calcium and enhanced serum phosphorus linearly; however, there was a linear tendency to increase tibia ash when sodium level was enhanced by sodium bicarbonate (p = 0.08) or sodium chloride (p = 0.07). Increasing sodium level via sodium bicarbonate tended (p = 0.08) to reduce tibia strength linearly. In conclusion, a diet with 0.16% sodium and 0.23% chloride is enough for broiler chicken reared in a high‐altitude area, and increasing dietary sodium level via sodium chloride has detrimental effect on survivability of broiler in such condition.