3株乳杆菌表面疏水性及凝聚性研究

[目的]探讨干酪乳杆菌、副干酪乳杆菌和植物乳杆菌的表面疏水性以及凝聚性。[方法]采用MATH法测定3株乳杆菌的表面疏水率,自凝聚试验测定菌株的自凝聚率,共凝聚试验测定3株乳杆菌与致病菌的共凝聚率。[结果]3个菌株的涡旋时间与表面疏水性呈负相关,静置时间与自凝聚作用呈正相关,且凝聚作用与致病菌的粘附和菌体自身特性有关。[结论]3株乳杆菌在肠道中均表现出良好的凝聚能力。     

串联IL-2的犬瘟热病毒F-H融合基因重组乳酸杆菌的构建与表达

为了研发犬瘟热乳酸杆菌载体疫苗,更好地预防犬瘟热,试验采用重叠延伸PCR(SOEPCR)技术扩增IL2-F-H融合基因,将IL2-F-H融合基因亚克隆至穿梭载体pSIP409上,构建pSIP-IL2-F-H重组表达载体,并电转化至植物乳杆菌NC8感受态细胞中,构建串联水貂白细胞介素-2(IL-2)的犬瘟热病毒(CDV)F-H融合基因重组乳酸杆菌;利用SDS-PAGE和Western-blot检测IL2-F-H融合蛋白的表达情况。检测表明,重组乳酸杆菌表达了分子量约为80.16kDa的IL2-F-H融合蛋白,且该融合蛋白能与CDV抗体发生反应,具有反应原性。     

Effects of Lactobacillus Probiotics on Growth Performance,Nutrient Digestibility and Serum Biochemical Indexes in Arctic Foxes

This experiment was conducted to study the effects of Lactobacillus probiotics on growth performance,nutrient digestibility and serum biochemical indexes in arctic foxes during the winter fur-growing period. Forty 135-day-old female arctic foxes with a similar body weight were randomly divided into 4 groups with 10 replicates per group and 1 fox per replicate. The foxes in control group were fed basal diets,while that of groups Ⅱ,Ⅲ and Ⅳ were fed basal diet+0.02% colistin sulfate, basal diet+1 mL Lactobacillus probiotics (active Lactobacillus was 3×10⁹ CFU/mL) and basal diet+10 mL Lactobacillus probiotics,respectively. The results showed that:Compared to the control group,the addition of Lactobacillus probiotics significantly increased the average daily gain (P<0.05) and significantly decreased the F/G of arctic foxes during the winter fur-growing period (P<0.05).The apparent digestibility of EE and GE were significantly increased when arctic foxes fed diet supplemented with Lactobacillus probiotics (P<0.05).Supplementation of high level Lactobacillus probiotics could significantly decrease serum total cholesterol (P<0.05). Additionally,serum alanine aminotransferase concentration of group Ⅱ was extremely significantly higher than that of the other three treatments (P<0.01). Moreover,the serum aspartate aminotransferase concentration was significantly higher than the control group (P<0.05). In conclusion,the addition of Lactobacillus probiotics had beneficial effects on growth performance and apparent digestibility of EE and GE when arctic foxes got 3×10⁹ CFU/mL active Lactobacillus from the probiotics per day. The total cholesterol in serum was significantly decreased when arctic foxes get 3×10¹⁰ CFU/mL active Lactobacillus from the probiotics per day. It might cause the liver damage when arctic fox got colistin sulfate for a long time.     

西藏开菲尔粒中Lactobacillus kefiri的分离与鉴定

我们的前期工作表明Lactobacillus kefiranofaciens是西藏开菲尔粒中的优势菌株,约占乳酸菌总数的95%。本文通过分离纯化,结合16S rRNA基因测序、变性梯度凝胶电泳(DGGE)、菌落PCR和显微镜观察等手段分析了开菲尔粒中的非优势乳酸菌。结果显示,Lactobacillus kefiri存在于西藏开菲尔粒中,其细胞形态呈短杆状(0.8-1.5 x 0.6-0.7μm),比Lb. kefiranofaciens短,且细菌聚集生长的趋势更为明显。鉴于西藏开菲尔粒的外表面结构相对紧实,推测Lb. kefiri主要分布在其外表面。     

高效降胆固醇植物乳杆菌的筛选及其益生潜能初探

为筛选出高效降胆固醇乳杆菌,挖掘其潜在益生功能,从民间自制泡菜样品中分离乳杆菌,采用邻苯二甲醛法筛选高效降胆固醇菌株,利用16S rDNA进行分子生物学鉴定,并通过耐酸、耐胆盐及抑菌性实验,测定菌株的益生潜能。结果表明:1)从分离出的11株乳杆菌中筛选出PL2、PL5、PL16和PL194等4株高效降解胆固醇菌株,其体外胆固醇降解率分别为48.22%、51.67%、48.43%和48.56%;2)结合菌落特征、部分生理生化试验及16S rDNA基因序列比对鉴定4株乳酸菌均为植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum);3)该4株乳酸菌均可在pH2.0的环境下生存3h,菌株PL2和PL5可以在0.3%的胆盐浓度下存活3h;4)菌株PL5对致病性大肠杆菌、沙门氏菌、金黄色葡萄球菌和福氏志贺氏菌均有显著的抑制作用。总之,植物乳杆菌PL5是具有开发前景的高效降胆固醇益生菌。     

茶叶籽乳杆菌的分离鉴定及其发酵作用特性研究

为阐明茶叶籽水浆发酵微生物种类及其在发酵过程中的作用特性,对发酵5βh的茶叶籽水浆发酵液进行微生物分离与提纯,从中分离纯化出1株菌株。经形态观察、16βS rDNA及pheS基因测序与比对、系统发育树的构建与分析,确定该菌株为植物乳杆菌（Lactobacillus plantarum ssp. Plantarum）;命名该菌株为茶叶籽乳杆菌（Lactobacillus plantarum ssp. plantarum JJZ21）,菌种保藏号为CCTCC M 2016471。在茶叶籽水浆发酵过程中,发酵液中茶叶籽乳杆菌的数量在5βh之后逐渐快速增加,至12~15βh之间达到最大值,之后又逐渐降低,至22βh后,逐渐趋于稳定。伴随茶叶籽乳杆菌数量的增加,发酵液中的干物质含量、可溶性糖含量、可溶性蛋白含量及其pH均明显下降,呈极显著（P<0.01）负相关性。茶叶籽乳杆菌通过消耗发酵液中的可溶性糖及可溶性蛋白等物质,向发酵液中分泌乳酸等酸性有机物,导致发酵液pH逐渐降低,为发酵液中的油脂体上浮以及茶叶籽水浆发酵分层现象发生奠定了基础。     

刺参池塘养殖系统中1株副干酪乳杆菌的分离及其生物学特性研究

本研究利用MRS培养基,从山东东营刺参(Apostichopus japonicus)养殖池塘环境中分离到56株乳酸菌.以刺参腐皮综合征2种重要致病菌灿烂弧菌(Vibrio splendidus)和假交替单胞菌(Pseudoalteromonas nigrifaciens)为指示菌,采用牛津杯法测定所分离的乳酸菌对2株...     

猪源肠道嗜酸乳杆菌的分离、鉴定与驯化

本文旨在分离筛选适于在猪肠道生长的嗜酸乳杆菌(Lactobacillus acidophilus)菌株。选用仔猪新鲜粪便,利用MRS培养基,以平板划线法分离纯化菌株;采用形态、生理生化和16 SrRNA基因序列分析对分离菌株进行鉴定;通过逐步提高培养基酸度、胆盐浓度和培养温度,对分离菌株进行驯化。结果表明:1)经分离纯化获得的菌株La-5,被鉴定为嗜酸乳杆菌。2)驯化后的菌株La-5c在pH=1.5~3时存活率比原始菌株La-5高出36%~44%,极低pH(1.5)条件下仍有37%的存活率。3)在0.03%~0.3%胆盐中的存活率为85%~90%,而原始菌株La-5为28%~53%。4)在50℃时的存活率为66.1%,而原始菌株La-50.01%。由此可见,与仔猪粪便分离纯化的嗜酸乳杆菌原始菌株La-5比较,驯化获得的菌株La-5c具有耐低pH、高浓度胆盐及高温的特性。     

猪传染性胃肠炎病毒纤突S蛋白干酪乳杆菌表达载体系统的构建

根据猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)纤突(S)蛋白的全基因序列及表达载体质粒的基因融合特点,设计一对引物,进行PCR,获得含有TGEV S基因4个主要抗原位点的约2000 bp目的片段,将其分别与表达载体质粒pPG611.1和pPG612.1进行连接,通过电转化进入宿主菌Lacto-bacillus casei393细胞内,通过质粒提取、PCR鉴定、酶切鉴定和序列测定分析,表明TGEV S基因已成功插入到表达载体质粒中,获得了TGEV S蛋白干酪乳杆菌表达载体系统。     

鼠李糖乳杆菌乳酸发酵特性及碳氮源研究

通过对鼠李糖乳杆菌利用碳源、氮源能力的研究,探讨菌株产酸的最佳发酵条件。结果表明：高质量浓度葡萄糖对菌体的生长和乳酸发酵有一定的抑制作用;酵母粉是鼠李糖乳杆菌生长和产L-乳酸最理想的氮源,使用廉价的氮源黄豆粉和无机氮源硫酸铵替代培养基中的酵母粉,可以使产酸量基本不变。在接种量5%的情况下,以酵母粉为氮源,当葡萄糖初始质量浓度为60mg/mL时,在恒温厌氧箱培养48h,L-乳酸产量为48.25mg/mL,产率为80.53%。