短乳杆菌SLB1000对Ⅱ型糖尿病大鼠的控糖作用

为探索更为安全无副作用的控糖方法,对实验室筛选所得的一株短乳杆菌（Lactobacillus brevis）SLB1000进行体内试验,观察其可能具有的益生效果,以期为益生菌的研究和利用提供依据。以SD大鼠为试验对象,构建Ⅱ型糖尿病模型大鼠。灌胃不同剂量（1×108 CFU/mL和1×1010 CFU/mL）的短乳杆菌SLB1000,定期测定大鼠的体重、空腹血糖、口服葡萄糖耐量（OGTT）,于试验第75天解剖,测定大鼠脏器指数、血清和肝脏中抗氧化相关酶活性。结果表明,短乳杆菌SLB1000延缓了Ⅱ型糖尿病引起的大鼠体重下降,可降低空腹血糖,且呈剂量依赖关系。与模型组对比,高剂量组（1×1010 CFU/mL）可抑制体重下降12.82%,使空腹血糖降低67.21%,达到6.43 mmol/L,肾脏指数和肝脏指数分别降低了20.95%和27.62%,效果好于二甲双胍,有效缓解脏器肥大。短乳杆菌SLB1000还可提高体内超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）和过氧化氢酶（CAT）的活性,有效降低Ⅱ型糖尿病大鼠的血糖水平,显著提高葡萄糖耐受性及抗氧化能力,可见该菌株具有较好的开发潜力。     

果汁牛奶混合型酸奶加工工艺的研究

以优质鲜牛奶为原料，添加胡萝卜、西红柿、芦荟混合果汁，将保加利亚乳酸杆菌及嗜热链球菌以1：1混合作为发酵剂，研制出营养丰富，色泽美观，风味独特的果汁牛奶混合型酸奶。     

菌/酶添加对甜高粱渣青贮预处理作用的强化效果

为实现生物质甜高粱渣的青贮强化预处理和能源化利用，该研究探究了不同添加剂对其青贮质量和酶解糖化效果的影响。试验设置对照组（CK组）、植物乳杆菌组（L组）、纤维复合酶组（E组）和复合添加剂组（LE组），系统考察甜高粱渣在21 d青贮预处理期间的营养成分、木质纤维组分和发酵品质的动态变化，采用隶属函数法评价青贮质量，利用高通量测序技术分析青贮预处理过程的微生物菌群动态演绎。结合酶解糖化性能评价青贮预处理作用的强化效果，从而筛选适宜的添加剂。结果表明：青贮预处理后甜高粱渣的粗蛋白、淀粉、中性洗涤纤维、酸性洗涤纤维、半纤维素和纤维素等能量组分含量显著高于原料（P<0.05）。青贮21 d时，3个添加剂组的干物质、可溶性碳水化合物和粗蛋白含量显著高于CK组（P<0.05），综纤维素含量显著低于CK组（P<0.05），且E组的干物质含量最高，L组的粗蛋白含量最高，E组和LE组的可溶性碳水化合物含量最高。青贮预处理期间，3个添加剂组的pH值均低于4.2,L组的乳酸和乙酸含量明显高于CK组（P<0.05）,E组的乳酸/乙酸和乳酸/总有机酸比值显著高于CK组（P<0.05）...     

植物乳杆菌抑菌蛋白的分离鉴定及抑菌特性研究

【目的】筛选新型广谱有效的抑菌蛋白,为全面解析植物乳杆菌抑菌机制和开发新型抗菌制剂奠定基础。【方法】以植物乳杆菌GX20200417-1为研究对象,采用牛津杯法测定其抑菌活性,以低温离心和超滤法初步分离获得胞外蛋白并测定其抑菌活性,对胞外蛋白进行不同温度、pH及蛋白酶处理,研究抑菌蛋白理化特性,利用液相色谱串联质谱(LC-MS/MS)进一步分析鉴定植物乳杆菌代谢产物中的抑菌成分。【结果】植物乳杆菌GX20200417-1对沙门氏菌、金黄色葡萄球菌和大肠杆菌均具有良好的抑菌作用;发酵上清液在发酵24 h的抑菌能力最强;胞外蛋白的抑菌能力与发酵上清液相近;植物乳杆菌抑菌蛋白具有较好的耐热特性,与对照组相比,在20~80 ℃时抑菌活性均无显著变化(P＜0.05),在pH 6.0~8.0时抑菌活性最佳,对蛋白酶敏感;经LC-MS/MS鉴定分析,检测出5种可信度较高且与抑菌作用相关的蛋白质,分别是片球菌素pediocin PA-1、溶菌素(lysin)、聚酮合酶(polyketide synthase)、辅助蛋白(accessory protein)和LysM peptidoglycan-binding domain-containing protein,分子质量分别为5.348、7.348、8.348、6.348和19.662 ku;蛋白质功能分析结果表明,片球菌素pediocin PA-1与溶菌素主要通过破坏细菌细胞壁与细胞膜,从而达到抑菌效果。LysM peptidoglycan-binding domain-containing protein可识别含有N-乙酰氨基葡萄糖(GlcNAc)残基的肽聚糖,上调抗菌肽的表达;辅助蛋白主要参与细菌素的合成,聚酮合酶主要参与抗生素的合成,二者通过参与抑菌物质的合成间接发挥抑菌作用。【结论】本研究成功分离并鉴定植物乳杆菌GX20200417-1的5种抑菌蛋白;植物乳杆菌GX20200417-1可能通过其代谢产物中的多种抑菌蛋白协同发挥抗菌作用。     

唾液乳杆菌对鸡毒支原体感染肉鸡生长性能及肺损伤的影响

本研究旨在探究唾液乳杆菌（Lactobacillus salivarius）对鸡毒支原体（Mycoplasma gallisepticum，MG）感染肉鸡生长性能及肺损伤的影响。选用1日龄AA肉鸡240只，按试验要求随机分为6组，包括对照组（Con）、低剂量唾液乳杆菌组（L）、高剂量唾液乳杆菌组（H）、MG感染组（MG）、MG感染+低剂量唾液乳杆菌组（MG+L）和MG感染+高剂量唾液乳杆菌组（MG+H）。Con组、MG组饲喂基础饲料，L组、MG+L组饲喂添加10⁸ CFU·kg^-1唾液乳杆菌的基础饲料，H组、MG+H组饲喂添加10⁹ CFU·kg^-1唾液乳杆菌的基础饲料，7日龄时给与MG组、MG+L组和MG+H组进行MG感染攻毒，饲养42 d后，通过分析各组鸡的体重、饲料转化率、肺部MG定植量、肺部病理损伤、肺部炎性损伤相关蛋白表达量及促炎性细胞因子含量来评价唾液乳杆菌缓解MG感染所致肉鸡生长性能下降及肺损伤效果。结果表明，MG感染极显著降低肉鸡体重（P<0.01），并极显著提高饲料转化率（P<0.01），而饲料中添加低剂量唾液乳杆菌和高剂量唾液乳杆菌均能极显著缓解MG感染所致肉鸡体重降低（P<0.01），并极显著改善饲料转化率（P<0.01）。饲料中添加低剂量唾液乳杆菌和高剂量唾液乳杆菌均能极显著降低MG肺部定植量（P<0.01）；明显改善MG感染所致肺部病理损伤；极显著降低MG感染所致炎性损伤相关蛋白（TLR2、HMGB1、p-p65/p65、NLRP3、Pro-Caspase-1/Caspase-1）表达（P<0.01）；极显著降低MG感染所致促炎性细胞因子（TNF-α、IL-1β、IL-6、IL-8）含量（P<0.01）。综上所述，饲料中添加唾液乳杆菌可以显著缓解MG感染所致肉鸡生长性能下降及肺损伤，该株唾液乳杆菌具有较大的应用潜力预防肉鸡感染MG。     

猪源罗伊氏乳杆菌 LR1 对断奶仔猪肠黏膜细胞外基质动态变化的影响

【目的】初步研究饲粮添加猪源罗伊氏乳杆菌对断奶仔猪肠道细胞外基质（Extracellular matrix，ECM）表达的影响，为猪源罗伊氏乳杆菌在畜牧业中的推广应用提供参考。【方法】选取 21 日龄体重相近的杜长大杂交断奶仔猪 144 头，随机分为 3 个处理组，对照组（CON）饲喂基础饲粮，抗生素组（AO）在基础饲粮中添加 75 mg/kg 金霉素和 100 mg/kg 喹乙醇，罗伊氏乳杆菌组（LR1）在基础饲粮中添加 5×1010 CFU/kg 猪源罗伊氏乳杆菌 LR1，每个处理组各分 8 栏饲养，每栏 6 头猪，试验期为 42 d，饲养试验结束时随机从每栏挑选 1 头仔猪进行屠宰，取其十二指肠（近端）、空肠（中段）、回肠（远端）样品，进行肠道胶原蛋白、纤维黏连蛋白、肌腱蛋白及其相关调控因子等 ECM 相关指标的检测。【结果】Masson 染色观察结果显示，十二指肠、空肠和回肠中胶原纤维均由肠黏膜下层向上层延伸，与 CON 组相比，LR1 组和 AO 组断奶仔猪十二指肠的胶原容积分数均显著降低（P<0.05），LR1 组的回肠胶原容积分数也显著降低（P<0.05）。TMT 高通量蛋白质组学分析结果显示，ECM-受体互作通路是差异蛋白主要富集通路之一，且其差异蛋白 COL1A2、COL4A2、COL6A1、ITGA1 等 ECM 分子的表达在 LR1 组显著低于 CON 组（P<0.05）。与 CON 组相比，LR1 组和 AO 组断奶仔猪空肠和回肠 COL1A2、COL3A1、ITGβ2 的基因表达均显著降低（P<0.05），且 LR1 组显著降低了空肠 COL4A2、COL5A1、COL6A1、FN1、TNC、ITGα1 及回肠 ITGα1 的基因表达（P<0.05），但对回肠 COL4A2、COL5A1、COL6A1、FN1、TNC 无显著影响。在回肠中，与 CON 组相比，LR1 组和 AO 组断奶仔猪回肠 Collagen Ⅰ ~ Ⅵ的含量显著降低（P<0.05）；LR1 组回肠胞内调控因子 SEC6A1、PDE4D 和胞外调控因子 MMP2 的基因表达均显著降低（P<0.05）；与 AO 组相比，LR1 组的胞内调控因子 SEC6A1、细胞因子 TGF-β 的基因表达显著降低（P<0.05）。【结论】饲粮中添加猪源罗 伊氏乳杆菌 LR1 可通过减少 ECM 调控因子 SEC6A1、PDE4D 等的基因表达来调节断奶仔猪肠道 ECM 的重塑。     

干酪乳杆菌对DSS诱导结肠炎小鼠焦虑样行为的影响及对结肠的保护作用

为研究干酪乳杆菌对葡聚糖硫酸钠(DSS)诱导的急性结肠炎小鼠焦虑样行为的影响及对结肠的保护作用，本研究分为对照组、DSS组、干酪乳杆菌组和干酪乳杆菌预防组，通过旷场试验比较各组小鼠行为学差异；统计并比较不同组小鼠体重、结肠长度、肠道上皮、炎性浸润、粪便潜血等的变化；HE染色法检测各组小鼠肠道结构的变化。结果显示:1)干酪乳杆菌预防组小鼠在旷场箱中活动的距离及在中央区域停留的时间显著增加(P<0.05)；2)与DSS组相比，干酪乳杆菌预防组结肠长度、小鼠体重显著增加，组织学评分和疾病活跃指数显著降低(P<0.05)，结肠肠道结构更加完整。综上，干酪乳杆菌可减轻小鼠焦虑样行为，缓解DSS对小鼠结肠的损伤，发挥对急性肠炎的保护作用。     

蛹虫草废弃米基发酵工艺初探

为提高蛹虫草废弃米基作为饲料中的蛋白含量，本试验采用蛹虫草废弃米基作为发酵培养基，筛选优势发酵菌种，并通过正交试验和单因素考察试验确定一套适用于蛹虫草废弃米基的二次发酵工艺。结果表明：采用酵母菌发酵效果较好。一次发酵的米基添加量为10%（m/m），酵母菌接种量为1%（m/m），发酵时间为20 h|二次发酵的米基添加量为12.5%（m/m），接种量为6%（m/m），发酵时间为48 h。综上，蛹虫草废弃米基经发酵处理后粗蛋白质含量提高了25.61%， Ca、P等无机盐含量也略有提高，同时发酵工艺对虫草素无干扰，发酵产物中保留了虫草素成分。此试验结果可作为蛹虫草废弃米基开发新型饲料的技术基础。 [关键词] 二次发酵|粗蛋白质|酵母菌|嗜酸乳杆菌     

植物乳杆菌在动物饲料中应用的研究进展

植物乳杆菌（Lactobacillus plantarum）来源广泛，作为乳酸菌的一员，其具有调节动物肠道菌群环境，提高机体免疫能力，改善生长性能等生理功能，因此，在饲用抗生素替代方面具有重要的作用。但是，在动物饲料应用中存在抗逆性较差、作用机理和添加量不明确的问题。本文总结了植物乳杆菌近年来在不同动物中的应用，并结合在动物饲料应用中存在的问题提出展望，以期为植物乳杆菌在动物饲料中的应用提供参考。 [关键词] 植物乳杆菌|动物饲料|生长性能|免疫功能     

基于16S rDNA测序分析腹腔注射苦参碱的昆明小鼠肠道菌群结构

旨在通过16S rDNA测序技术分析腹腔注射苦参碱的昆明小鼠肠道菌群的结构。本研究将20只昆明小鼠随机分为2组,分别是苦参碱组(MT组)和阴性对照组(NC组),连续腹腔给药5 d,每天给药2次,收集各组粪便和各肠段组织,进行β多样性、Lefse及Metastats分析,qPCR检测差异菌种在各肠段的mRNA表达量,通过KEGG分析肠道菌群变化导致的代谢途径差异。稀释曲线结果显示,所测样本数据足以反映样品中物种多样性;β多样性分析结果显示,苦参碱可以调节肠道菌群的结构,Lefse及Metastats分析结果均显示,苦参碱显著增加了拟杆菌门(Bacteroidetes)、拟杆菌目(Bacteroidales)、Muribaculaceae、益生菌嗜酸乳杆菌(Lactobacillus acidophilus)的丰度,而显著减少了厚壁菌门(Firmicutes)、瘤胃菌科(Ruminococcaceae)和脱硫弧菌属(Desulfovibrio)的丰度。与Lefse及Metastats分析结果一致,qPCR结果显示苦参碱组小鼠粪便中嗜酸乳杆菌含量增加。同时,苦参碱可以增强嗜酸乳杆菌在各肠段的定植。通过KEGG分析发现,NC与MT组之间在聚糖的生物合成与代谢、运输与分解代谢等代谢途径存在显著差异。本研究结果表明,腹腔注射苦参碱可以显著改变昆明小鼠肠道菌群的结构,增加有益菌嗜酸乳杆菌在肠道中的定植,并造成了聚糖生物合成与代谢、运输与分解代谢等代谢途径的差异,为进一步揭示苦参碱发挥药效作用的机理奠定了基础。