不同剂量环磷酰胺对昆明小鼠肝肾组织的损伤作用研究

为研究不同剂量的环磷酰胺对小鼠肝肾组织及功能的损害程度,试验选取40只5周龄健康雌性昆明小鼠,随机分为5组,除对照组外,其余4组小鼠连续3 d分别腹腔注射40、80、120及160 mg/（kg·BW）环磷酰胺溶液,注射后第7天采集肝脏和肾脏组织样品及血清,制备石蜡组织切片及透射电镜切片,观察肝脏和肾脏的组织学变化,检测血清中甘胆酸（CG）、胆碱酯酶（ChE）、血清前白蛋白（PA）、总胆汁酸（TBA）、谷丙转氨酶（ALT）、谷草转氨酶（AST）、尿素氮（BUN）、血清肌酐（SCr）、尿酸（UA）含量/活性。结果显示,环磷酰胺可引起小鼠肝肾组织病理损害,呈剂量依赖性,肝脏比肾脏更早出现损伤。石蜡切片及透射电镜切片观察结果显示,环磷酰胺对肝脏的毒性作用主要表现在肝索紊乱、肝血窦扩张、微胆管淤胆、门管区及中央静脉周围炎性细胞浸润及纤维增生、组织间出血、肝细胞出现脂肪变性及气球样变性,凋亡及坏死细胞增多。肾脏组织损伤主要表现在出血及纤维增生,肾小管上皮细胞胞浆空泡样变、线粒体损伤、核固缩,上皮细胞基底膜增厚。环磷酰胺对膀胱的损害不严重。与对照组相比,40~160 mg/（kg·BW）剂量组小鼠血清中ChE活性及PA水平,120~160 mg/（kg·BW）剂量组AST活性,80~160 mg/（kg·BW）剂量组BUN水平及80 mg/（kg·BW）剂量组UA水平均显著升高（P<0.05）;其余生化指标与对照组差异不显著（P>0.05）。以上结果表明,环磷酰胺注射剂量在80~120 mg/（kg·BW）时可引起昆明小鼠肝脏和肾脏组织及细胞明显的病理损伤。该研究结果可为选择合适的环磷酰胺注射剂量用以制备动物肝脏免疫抑制模型提供试验依据。     

Protective Effect of Sulforaphane on Reproductive Function of Male Mice with Cadmium Poisoning

The study was aimed to explore the protective effect of sulforaphane (SFN) on the reproductive function of male mice with cadmium poisoning.40 healthy clean grade male Kunming mice were randomly divided into four groups:control group (H₂O),cadmium chloride group (2.3 mg/kg CdCl₂),sulforaphane group (10 mg/kg SFN),sulforaphane + cadmium chloride group (10 mg/kg SFN+2.3 mg/kg CdCl₂),and continuous administration for 10 d,all mice were executed by dislocated cervical vertebra at 2 d after the last administration,and then the pathologic changes of testicular tissues,organ coefficient of testicle and epididymis,sperm quality and concentration of testosterone were tested.Additionally,the contents of GSH and MDA,and the activities of T-SOD in testis were also detected at the same time. Compared with the control group,pathology damages were observed in cadmium chloride group,organ coefficient of testis and epididymis,sperm quality and levels of testosterone extremely significantly decreased (P<0.01),the activities of T-SOD and GSH content were extremely significantly decreased (P<0.01),and the concentration of MDA was extremely significantly enhanced (P<0.01).Compared with the control group,the activity of T-SOD and concentration of GSH in sulforaphane group were significantly increased (P<0.05),and the concentration of MDA was not significant different between the control group and sulforaphane group (P>0.05).While compared with the cadmium chloride group,the sperm motility rate and sperm total count in sulforaphane and cadmium chloride group were extremely significantly increased (P<0.01),the organ coefficient of testicle and epididymis was increased significantly (P<0.05),the concentration of GSH and activity of T-SOD in testicular tissue were extremely significantly increased (P<0.01),and the concentration of MDA was extremely significantly decreased (P<0.01).The results indicated that sulforaphane had the protection effect on reproduction function of male mice with cadmium poisoning.     

预防用自拟复方中药对大肠杆菌感染早期小鼠免疫功能的影响试验

将96只小鼠随机分为4组,Ⅰ、Ⅱ组生理盐水灌胃,Ⅲ组复方中药灌胃,Ⅳ组黄芪多糖灌胃,连续3 d;试验第4天,Ⅰ组注射生理盐水;Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ组小鼠腹腔注射大肠杆菌液。在感染后第3小时、第6小时、第10小时采集小鼠血样及血清,分别测定其血液生理指标(WBC、GRA、LYM及MID)及细胞因子(TNF-α、IL-6、IL-10、IFN-γ)的变化。结果自拟复方中药具有提高小鼠外周血的WBC(尤其是LYM、MID);促进IL-6分泌,抑制TNF-α、IL-10分泌,使Th2向Th1细胞漂移,促进腹腔注射大肠杆菌早期小鼠Th2/Th1细胞亚群恢复平衡的作用。     

酒糟培养灵芝提取物对小鼠中枢神经系统的抑制作用观察

为了评价酒糟培养灵芝提取物的药理活性,将小鼠随机分为提取物125 mg/kg体重组、250 mg/kg体重组、500mg/kg体重组,安定组和生理盐水组,观察酒糟培养灵芝的提取物对小鼠自发活动、巴比妥钠阈上剂量致睡眠时间、戊四氮致惊厥的影响。结果显示,提取物的各组、安定组与生理盐水组比较,小鼠的自发活动能极显著减少(P0.01),睡眠时间能显著或极显著延长(P0.05,P0.01),高、中剂量组小鼠的惊厥率显著减少(P0.05)。结果提示,酒糟培养灵芝的提取物对小鼠中枢神经系统具有一定的抑制作用。     

感染小鼠肠道内猪痢疾密螺旋体的定位研究

用过氧化物酶-抗过氧化物酶法(PAP)对感染猪痢疾密螺旋体的小鼠肠道组织切片进行染色观察。发现特异的酶染颗粒主要分布于盲肠,其次是结肠前段和后段。在感染的早期,主要分布于肠腺的深部,以后有逐渐向肠腔面转移的趋势。在小肠和肠细胞内未见有特异性的酶染颗粒。通过与常规的镀银法比较,作者认为PAP法更为灵敏、特异,不失为一种有效的猪痢疾病的研究方法。     

虾原肌球蛋白诱导小鼠过敏性哮喘气道重塑模型的研究

以虾原肌球蛋白每周腹腔注射致敏小鼠1次,连续3周,再持续进行6周滴鼻激发诱导小鼠发生气道重塑.采用ELISA法检测血清总IgE水平,测定肺气道阻力,HE染色观察肺组织形态学变化,PAS染色观察气道上皮细胞黏液分泌状态,Masson三色法检测胶原纤维增生,免疫组织化学法检测肺组织a-平滑肌肌动蛋白的表达,以探索建立一种以...     

结石通片对小鼠的急性毒性试验及其对乙二酰胺致大鼠肾结石的作用研究

[目的]研究结石通片对小鼠的急性毒性作用,对健康大鼠的利尿作用,以及对乙二酰胺致大鼠肾结石的调节作用.[方法]取ICR小鼠40只,雌、雄各半,随机分为对照组与给药组,每组20只,观察结石通片给药前后小鼠的体重变化和死亡情况;另取SD大鼠36只,雌、雄各半,分为对照组、低剂量组(给予5％结石通片溶液)和高剂量组(给予10...     

两种激活处理促进小鼠孤雌胚胎原核形成

不同人工处理方法激活哺乳动物卵母细胞的机理相似,但其激活效率存在差异。本研究以昆明（KM）、129/Sv×KM F1和C3H×KM F1雌鼠来源的卵母细胞为对象,利用氯化锶（SrCl2,Sr2＋）联合细胞松弛素B（cytochalasin B,CB）（Sr2＋＋CB）和离子霉素（ionomycin,Ion）联合6-二甲胺基嘌呤（6-dimethylaminopurine,6-DMAP）（Ion＋6-DMAP）两种激活方法处理下对比分析不同品系小鼠卵母细胞的激活效率,并以卵母细胞原核形成率、原核数量和孤雌胚胎体外发育来评价两种激活剂的激活效率。研究结果表明,Ion＋6-DMAP激活卵的1原核比率显著高于2原核（p〈0.05）,Sr2＋＋CB激活卵的2原核比率显著高于1原核（p〈0.05）;KM、129/Sv×KM F1和C3H×KM F1各组孤雌胚胎卵裂率和激活率没有显著差异（P〉0.05）,但129/Sv×KM F1和C3H×KM F1囊胚发育率显著高于KM组（p〈0.05）。3种小鼠品系的卵母细胞用Sr2＋＋CB处理的孤雌胚胎发育率显著高于Ion＋6-DMAP。结果证明,Sr2＋＋CB处理小鼠卵母细胞的激活效率明显优于Ion＋6-DMAP;129/Sv×KM F1和C3H×KM F1的孤雌胚胎体外发育率显著高于KM小鼠,为研究小鼠遗传背景影响孤雌胚胎发育的机理提供参考。     

嗜水气单胞菌外膜蛋白（OMP）的原核表达及其对BALB/c小鼠的免疫保护研究

为确定嗜水气单胞菌(Aeromonas hydrophila,Ah)AS1.927株外膜蛋白(OMP)的原核表达产物是否具有抗原性及其对小鼠的免疫保护力.本研究根据GenBank上嗜水气单胞菌外膜蛋白ompA基因序列(GenBank登录号:AF146597)设计1对引物,克隆出ompA全长基因1020 bp(GenBank登录号:EU309491),经Sal Ⅰ和Xhol Ⅰ双酶切后连接pET-30a(+),转化大肠杆菌(Escherichia cDli)BL21,IPTG诱导表达,并进行SDS-PAGE及Westernblot分析鉴定.结果显示重组基因工程菌E.coli[pET-30a-ompA]表达的融合蛋白分子量约为40.7kD,可以被鼠抗嗜水气单胞菌外膜蛋白抗血清识别.将重组基因工程菌Ecoli[pET-30a-om-pA]口服免疫BALB/c小鼠(Mus mussulus);末次免疫1周后用放射免疫分析小鼠肠粘膜分泌型免疫球蛋白A(sIgA)水平,检测结果揭示,该重组基因工程菌能提高sIgA的分泌(P<0.05);同时在小鼠血清中测出特异性抗体IgG(P<0.05).末次免疫2周后用100 LD50的Ah AS1.927(3.3×105> cfu/mL)腹腔注射攻击小鼠,口服重组菌对小鼠的相对免疫保护力(relative percent survival,RPS)为75%,表明重组基因工程菌可诱导小鼠对AhAS1.927产生一定的免疫保护作用.     

利用精子介导法建立hHT/hDAF双基因转移小鼠模型

为探讨超急排斥反应(Hyperacute rejection,HAR)及延迟性异种排斥反应(Delayed xenograft rejection,DXR)的分子调控机制,采用优化的精子介导法(Sperm-mediated gene transfer,SMGT)对建立hHT/hDAF双基因转移小鼠模型进行了研究。结果表明,应用树枝状聚合物(Dendrimers)优化SMGT后,2细胞胚GFP+RFP的阳性率达到4.51%,同对照组相比差异极显著(P0.01)。选取标记基因GFP+RFP双阳性的胚胎进行移植后获得36只仔鼠,PCR及Southern Blot检测结果表明,17只小鼠PCR结果呈hHT+hDAF双阳性,其中5只小鼠Southern Blot结果呈hHT+hDAF双阳性。上述结果表明,成功建立了Hht/hDAF双基因转移小鼠模型。