抗卡那霉素单克隆抗体细胞株的筛选及间接ELISA法的建立

采用碳二亚胺(EDC)法合成卡那霉素完全抗原,免疫BALB/c小鼠,通过杂交瘤技术获得3株能稳定分泌抗卡那霉素单克隆抗体的杂交瘤(5D7、6H8、7G4)。选择其中的5D7株抗体,经ELISA鉴定,细胞上清的效价达103以上,腹水效价达到5×104以上;建立了间接竞争ELISA法,通过优化,其检测限为0.5ng/mL,抗体IC50为3.7ng/mL,与妥布霉素交叉反应率为63.8%,与其他抗生素无交叉。可见ELISA具有快速、敏感、特异、简便等特点,适合于KAN残留的快速检测,具有较高的推广应用价值。     

枣树间接地下滴灌根区土壤盐分运移规律研究

通过小区试验研究了间接地下滴灌条件下密植枣树根区不同方向(水平及垂直方向)、不同土层盐分质量比的变化特征,及导水装置直径(50、75、90 mm)和灌水量(9、13、17 L/(棵·次))对枣树根区土壤盐分运移的影响。结果表明:经过一段时间后,垂直方向10~40 cm土层盐分质量比较低,0~10 cm土层盐分质量比最高;水平方向10~50 cm各土层盐分质量比随与出水口水平距离的增加而增大。在单次灌水后导水装置直径一定时各土层脱盐率随灌水量的增加而增大。当灌水量一定时,10~40 cm土层脱盐率随导水装置直径的增加呈减小的趋势,0~10 cm、40~50 cm脱盐率随导水装置直径增大呈低-高-低的趋势。在7—9月份,当导水装置直径为75 mm,灌水量为13、17 L/(棵·次)时,0~50 cm土层土壤平均盐分质量比均较低而且变化幅度较小。综合考虑节水、抑盐效果,确定导水装置直径为75 mm,灌水量为13 L/(棵·次)为适宜的间接地下滴灌灌溉模式。     

对生和互生玉米内源激素含量的差异分析

利用ELISA方法测定近等基因系玉米(Zeamays)对生、互生玉米的不同组织和不同生育期内源细胞分裂素ZRs(zeatin riboside group)、DHZRs(dehydro zeatin riboside group)、iPAs(isopentenyladenosine group)以及内源生长素IAA(indole acetic acid)含量差异。结果表明,不同叶序玉米在不同生育期幼胚、成熟花粉和成熟叶片的内源ZRs、DHZRs、iPAs和IAA均无显著差异;不同生育期对生叶序玉米幼苗顶端分生组织和成熟苗顶端雄幼穗ZRs、DHZRs和iPAs含量显著高于同期近等基因系的互生玉米,IAA含量在两者之间无显著差异;对生叶序玉米幼苗顶端分生组织、成熟苗顶端雄幼穗CTK/IAA(CTK表示ZRs、DHZRs和iPAs含量相加)比值显著高于同期近等基因系互生叶序玉米,但在不同生育期幼胚、叶片及花粉内均无显著差异。对生叶序的形成与生长点组织细胞分裂素含量增加密切相关。     

间接竞争性ELISA检测甲胺磷残留

采用制备的兔抗血清建立了甲胺磷（methamidophos,MTP)残留的间接竞争性ELISA方法，证明了抗血清的特异性较好，并确立了测定参数：抗血清与包被抗原的最佳工作浓度分别为1：3000和1：5000；最适检测范围为0．01－0．1μg/ml；批内变异系数7．56％，批间变异系数5．70％。     

抗犬细小病毒的单克隆抗体的制备

CPV YZ株的细胞培养液经蔗糖密度梯度离心纯化后作为免疫原免疫BALB/C小鼠 ,应用杂交瘤技术筛选出 8株能稳定分泌单克隆抗体的杂交瘤细胞 ,分别命名为F5G10、3F11F4、F11G6、6C5C2、6E4G3、6C2B11、F11D6、3D9C4株 ,各株单抗均为IgG型 ;中和试验表明 :F11G6、3D9C4、6E4G3、6C5B114株单抗有中和作用 ,Dot ELISA试验证明了 8株单抗仅针对病毒抗原决定簇的空间结构。     

蔬菜中克百威残留的ELISA法测定技术研究

以合成人工抗原复合物免疫新西兰大白兔,制备了特异性的兔抗BFNH多克隆抗血清。用间接ELISA法测得抗体血清的最高效价可达1:32000。并以BFNH-卵清蛋白(OVA)复合物,作为抗原包被96孔板,建立了间接竞争ELISA法,用于蔬菜中的克百威残留分析。通过实验确定该方法的工作条件和标准曲线,并测定了抗体血清与其它各种氨基甲酸酯类农药的交叉反应率。实验结果表明,抗体血清对其它氨基甲酸酯类农药的交叉反应率均小于10%。该方法对克百威纯品的检测限为0.1μg·ml-1,线性检测范围为102～10-3μg·ml-1。该方法测定结果与高效液相色谱测定结果相一致。     

应用Dot PPA ELISA检测猪布氏杆菌病抗体的研究

本试验以布氏杆菌ＳＡＴ 为对照试验,建立了Ｄｏｔ ＰＰＡ ＥＬＩＳＡ 检测猪布氏杆菌病抗体的方法,该法检测的猪ＩｇＧ 含量可达６９９２×１０－ ９ｇ,灵敏性高,不同猪抗ＰＲＶ、ＰＰＶ、ＨＣＶ、ＪＥＶ、ＣＨＬ 等阳性血清发生交叉反应,特异性强;此外该法还具有操作简便、快捷不需特殊试验条件、结果客观、肉眼易于判断、反应膜片可长期保存等优点。适宜在广大基层单位应用,对布病的快速诊检有着十分重要的意义。     

诺氟沙星与牛血清白蛋白及卵清蛋白结合物的合成

采用碳二亚胺法制备诺氟沙星与牛血清白蛋白（BSA）的结合物，作为诺氟沙星酶联免疫用的免疫原。经紫外光谱法测定，每分子牛血清白蛋白连接的诺氟沙星分子数为16.1个。分别用碳二亚胺法和混合酸酐法制备诺氟沙星与卵清蛋白（OA）的结合物，作为诺氟沙星酶联免疫测定用的包被抗原。经紫外光谱法测定，每分子卵清蛋白连接的诺氟沙星分子数分别为5.8和1.9个。     

植物细胞生长周期中内外源细胞激动素的变化

应用细胞同步培养技术、高压液相色谱分析（ＨＰＬＣ）和酶偶联免疫法（ＥＬＩＳＡ）分析了胡萝卜细胞在悬浮培养时生长分裂周期的变化并对内源激动素类物质（玉米素Ｚ－Ｚｅａｔｉｎ、核糖基玉米素ＺＲ－ｚｅａｔｉｎｒｉｂｏｓｉｄｅ、二氢玉米素ＤＨＺ－ｄｉｈｙｄｒｏｚｅａｔｉｎ、核糖二氢玉米素ＤＨＺＲ－ｄｉｈｙｄｒｏｚｅａｔｉｎｒｉｂｏｓｉｄｅ、异戊烯基核糖基腺嘌呤ＩＰ－ｉｓｏｐｅｎｔｅｎｙｌａｄｅｎｉｎｅ和核糖基异戊烯基腺苷ＩＰＲ－ｉｓｏｐｅｎｔｅｎｙｌａｄｅｎｉｎｅｒｉｂｏｓｉｄｅ）含量进行定量分析．从用荧光显微技术分析ＤＮＡ含量变化结果看出，附加有激动素０．１×１０－６·Ｌ－１的悬浮液中，胡萝卜细胞的分裂周期为８．５ｈ，比不加外源激素的处理短１ｈ．在无外源激素存在的情况下，细胞分裂期中内源细胞分裂素类物质除ＺＲ之外，其余的Ｚ、ＤＨＺ、ＤＨＺＲ、ＩＰ和ＩＰＲ的含量在分裂的第６．５ｈ均有一个峰值出现，ＺＲ在第４．５和８．５ｈ有峰值出现．外加细胞分裂素的处理中．Ｚ、ｉＰ和ｉＰＲ整个周期无明显含量变化，ＤＨＺ和ＤＨＺＲ在第６．５ｈ出现峰值．ＺＲ在第８．５ｈ时也出现峰值．说明附加细胞激动素可协调Ｚ．ｉＰ和ｉＰＲ的积累，加速利用?     

用ELISA法检测烟草种子带有赤星病菌（Alternaria alternata）的研究

用烟草赤星病菌的悬浮液免疫家兔，得到效价为１：６４Ｏ的抗血清，按硫酸该沉淀法和ＤＥＡＥ纤维素离子交换柱层析法提取抗体球蛋白ＩｇＧ，用ＥＬＩＳＡ间接法进行试验，结果表明：辣根过氧化物酶标记羊抗兔结合物的最适稀释度为１：１００，最适抗体球蛋白ＩｇＧ的浓度为４～６μｇ／ｍＬ。该抗体球蛋白ＩｇＧ对来自吉林省内的５个市县的８个烟草赤星病菌株全部呈阳性反应．而对Ａｌｔｅｒｎａｒｉａｃｕｕｃｕｍｅｒｉｎａ和Ａｌｔｅｒｎａｒｉａｐｏｒｒｉ则呈阴性反应，对种子分离得到的Ｆｕｓａｒｉｕｍｓｐ．和Ｐｈｙｌｌｏｓｔｉｃｔａｓｐ．等４种真菌及烟草野火病菌和Ｘａｎｔｈｏｍｏｎａｓｓｐ．均呈阴性反应，表明该抗体球蛋白ＩｇＧ的特异性很强。对７种不同浓度孢子悬液接种花器所获种子进行检测．均呈阳性反应，对来自３省６个品种１３份种子进行检测，８价呈阳性反应．５份呈阴性反应，与种子分高培养结果一致。用ＥＬＩＳＡ法检测烟草种子是否带有赤星病菌是一种快速而准确的方法。