禽类采食量生理调节因子的研究进展

采食量是影响禽类生长最重要的因素之一。认识采食量的调节规律和机制,旨在更有效地调节家禽的采食量,为生产实践提供重要指导。禽类采食量的生理调节机制十分复杂,涉及许多神经通路和体液因子的调节。本文将重点介绍采食量生理调节因子。     

鳜下丘脑神经元细胞培养

为了建立可行、高效的下丘脑神经元细胞技术,本研究通过分离鳜下丘脑组织,用Ⅰ型胶原酶将组织消化成单细胞悬液,并用完全培养液进行培养,在培养的第3、4、5和6天观察细胞的形态。结果显示,培养第3天时细胞贴壁量少,胞体小并且呈单个分布;在培养第4天,细胞的数量显著增多,且具有典型的神经元的形态,胞体饱满;第5天神经元胞体的融合度进一步增大,突起增长增粗,许多分支互相交错连接而形成密集的神经纤维网络;第6天细胞活性减弱,开始凋亡。使用CCK-8法检测细胞活性,结果显示,在培养第5天,细胞活性最高;采用荧光定量PCR(RT-PCR)法和免疫荧光鉴定法对神经元细胞进行鉴定,经RT-PCR检测发现,培养的下丘脑细胞可以表达神经元特异基因noggin,经免疫荧光鉴定,下丘脑神经元细胞纯度为95.9%。研究表明,通过此培养方法能够获得纯度较高的鳜下丘脑神经元细胞,为进一步在细胞水平研究鳜的摄食与能量代谢相关机理奠定基础。     

Effect of membrane environment at high temperature on delayed rectifier K+ channel in hypothalamus neurons

AIM: To observe the effect of high temperature on the delayed rectifier K⁺ channel(I_K) in hypothalamus neurons METHODS: The kinetic properties of I K were measured by cell-attached mode of patche-clamp technique RESULTS: The conductance, long-term open constant(τ _o2) and open probability(Po) of I_K increased with increase of temperature (P <0.05), while more burst open and multi-order open were recorded Many types of currents occurred after heat stress at 43℃,and voltage-dependent property reduced and even depressed CONCLUSIONS: The activating action of I_K might be affected obviously by high temperature, the coupling between I K and body fever or heatstroke remained to be established.     

青年奶山羊下丘脑催产素神经元分布特点

为了研究奶山羊不同生殖周期中催产素的表达特点,本实验采用超敏免疫组化链霉素抗生物蛋白－过氧化物酶法研究催产素免疫反应物在8~10月龄青年龄奶山羊下丘脑的分布。结果显示：分泌催产素的神经元主要分布在室旁核和视上核,在穹窿周核、腹内侧核、腹外侧核、交叉上核和乳头体上核较多,有少量分布在弓状核、室周核、背内侧核、环核、前连核、下丘脑前核、下丘脑外侧区、乳头体上核、乳头体内侧核。阳性细胞的形态有圆形、卵圆形、多角形;有的阳性细胞突起明显。根据细胞中阳性物质的多少和核团中阳性细胞数量,可分为强阳性、中等阳性、弱阳性核团。提示：催产素广泛存在于青年奶山羊下丘脑中20多个核团,核团之间可能有协同作用。     

GnRH神经元在发情期奶山羊下丘脑中的免疫组化定位

为了研究促性腺激素释放激素(GnRH)在发情期奶山羊下丘脑中的表达特点,采用超敏的免疫组化链霉素抗生物素蛋白-过氧化物酶法研究GnRH免疫反应神经元在发情期山羊下丘脑中的分布。结果显示,GnRH免疫反应阳性细胞主要分布在视上核、视前内侧核、视前外侧核、交叉上核、丘脑外侧区、室旁核后部、弓状核、腹外侧核、结节乳头体核、乳头体内侧核、乳头体外侧核等核团。阳性细胞的形态有圆形、三角形、卵圆形、梭形、多角形、不规则形,有些阳性细胞还具有明显的突起。圆形和三角形细胞直径的大小为5~35μm,卵圆形和梭形细胞短轴和长轴大小分别为5~27μm、15~58μm。免疫反应阳性产物还分布于部分纤维束中,如视束、正中中隆起等。根据细胞中阳性反应的强弱可分为强阳性,如交叉上核;中等阳性,如乳头体内侧核;弱阳性,如前穹窿周核。上述研究结果表明,GnRH在成年奶山羊下丘脑广泛存在。     

Kiss-1基因在猪初情期下丘脑-垂体-卵巢轴中的定位研究

[目的]为阐明猪的生殖机理和选育早熟品种奠定基础。[方法]采用免疫组化技术研究Kiss-1 mRNA在初生以及30、60、70(初情期)和90日龄小梅山猪的下丘脑、卵巢和垂体内的定位,并利用放射免疫分析(RIA)方法观察母猪血浆LH、FSH含量的变化。[结果]Kiss-1 mRNA在小梅山猪下丘脑、卵巢、垂体中均有表达,以下丘脑弓状核阳性颗粒最多,尤其初情期时最为明显。各级卵泡中以初情期成熟卵泡的阳性颗粒数目最多。Kis-s1 mRNA表达量在小梅山猪下丘脑、垂体和卵巢从初生到初情期逐渐上升,并在初情期达到顶峰,而后逐渐下降。小梅山猪血浆LH、FSH浓度初生时较高,随后迅速下降,60日龄又升高,70日龄达到峰值。[结论]Kiss-1基因是控制猪初情期启动的关键因子     

摩交一代水牛与沼泽型水牛下丘脑细胞构筑的比较研究

[目的]为水牛下丘脑参与生殖生理功能调节的研究提供形态学依据。[方法]应用石蜡切片NISSL染色,采用DMRXAQ550JMS型显微镜及其图象分析系统扫描水牛下丘脑切片。以LEICQWIN图象分析软件对细胞数密度、胞体平均面积、胞体周长、各型细胞的出现率进行研究。[结果]比较摩交一代水牛与沼泽型水牛下丘脑细胞构筑,结果显示,2种水牛下丘脑细胞大小差异较大,巨型、大型、中型、小型细胞在各个核团均有出现,且各自的比例也有明显不同;摩交一代水牛与沼泽型水牛下丘脑内侧部9个核团的神经纤维分布相似,各型细胞的出现率不同;摩交一代水牛与沼泽型水牛相比,在9个主要核团的细胞构筑均有明显差别。[结论]2种不同类型水牛下丘脑细胞存在较大差异,其参与调节2种类型水牛的不同生理生殖功能。