不同生长时期梅花鹿鹿茸代谢组分析

旨在探究梅花鹿鹿茸不同生长时期小分子代谢物表达差异变化,为鹿茸快速生长与骨化分子机制的研究奠定基础。本研究选取体况良好的4岁龄雄性东北梅花鹿,收取生长25、45、65、100、130 d的鹿茸作为试验样品,每个时期3个生物学重复。利用UHPLC-TOF-MS技术对样品进行代谢组学分析。样品主成分分析与层次聚类分析结果显示,5个生长时期可分为鹿茸生长期(25、45与65 d)与鹿茸骨化期(100与130 d)两个阶段。筛选、鉴定到171种显著差异表达代谢物(VIP>1,P<0.05,|fold change|>2),比对到HMDB数据库的112种代谢物,分为7大类;其中L-焦谷氨酸、L-组氨酸、L-肌肽与阿坎酸等有机酸类化合物在100 d含量最高,15-脱氧-Δ12,14-前列腺素J2、前列腺素H2、前列腺素I2在130 d显著上调,而其他氨基酸及有机酸类化合物均在生长期表达上调。差异代谢物显著富集到氨酰-tRNA生物合成、组氨酸代谢等13种KEGG代谢通路。本研究从代谢组水平为鹿茸快速生长与骨化分子机制的探究提供数据支撑。     

真伪血茸片的PCR鉴别

依据梅花鹿和马鹿与驯鹿、鸡、猪的种属性差异 ,设计了 1对特异性鉴别引物 ,对血茸片的真品和伪品进行PCR扩增 ,结果表明 ,真品与伪品扩增片段的数目和长度不同 ,以此便能够鉴别出血茸片真伪。     

甘肃马鹿血液蛋白多态性及其与产茸量关系的研究

采用垂直板聚丙烯酰胺凝胶电泳技术,分析了66头甘肃马鹿的8个血液蛋白位点的基因频率、基因型频率和群体遗传变异指标,建立了产茸量与多态位点之间的线性相关模型.结果表明:甘肃马鹿各蛋白位点中,Tf、Hb、Alb、Pa、Prt1、Prt2、血清ES分别有3、1、1、2、2、2和3种基因型.未检测到红细胞ES;Tf和Prt2的基因型频率偏离Hardy-Wein-berg平衡;Tf的变异程度最大(杂合度为0.586 3),杂合度的大小顺序为Tf>Prt2>ES>Pa>Prt1>Hb=Alb.群体的平均杂合度为0.350 5;各多态住点中仅有Prt1与产茸量之间存在显著正相关(P<0.05),而且Prt1的AA型产茸量明显高于其他各位点基因型.由此可见,Prt1位点的AA型可用来标记甘肃马鹿的品种特征.     

梅花鹿鹿茸间充质层细胞的体外培养和冷冻保存

为了研究梅花鹿鹿茸间充质层细胞的生物学特性,取梅花鹿鹿茸生长顶端间充质层组织,分离间充质层细胞进行体外培养及冷冻保存。结果表明:在含10%胎牛血清(FBS)的DMEM培养基中,鹿茸间充质层细胞能进行短期体外培养,培养的细胞呈成纤维细胞样,培养7 d可长至汇合。以含5%二甲基亚砜(DMSO)和10%FBS的DMEM为冻存液,经梯度降温后冻存,间充质层细胞复苏后存活率较高。在4℃条件下,间充质层组织在含10%FBS的DMEM中可保存7 d。     

几种处理对银合欢种子活力的影响研究

用热水、酸蚀以及磨破种皮处理银合欢（Leucaena glauca）种子，打破其休眠。结果表明，不同浓度的硫酸处理对银合欢种子的发芽率、发芽指数、发芽势影响差异显著（P〈0.05），25％硫酸处理对银合欢种子发芽率、发芽指数、发芽势无显著影响（P〉0.05），而98％的硫酸处理对银合欢种子发芽率、发芽指数、发芽势有极显著影响（P〈0．01）。75℃的热水以及磨破种皮处理对银合欢种子的发芽率、发芽势均有提高。不同处理对银合欢种子发芽率影响由大到小的排序为：98％硫酸〉75℃水〉75％硫酸〉研磨种子〉50％硫酸〉25％硫酸〉无处理种子。98％硫酸处理银合欢种子20min是最佳处理方式。     

鹿锯茸止血膏贴的研制

介绍了自行研制的止血效果确切、快速、抗感染、促创面愈合、使用方便的新型鹿用锯茸止血膏贴,以期其应用能够对提高茸鹿养殖效益产生积极的作用。     

黑果枸杞硬实种子处理方法研究

[目的]研究不同硬实处理方法对黑果枸杞种子发芽的影响。[方法]以2007年收获的黑果枸杞种子为材料,采用98%H2SO4、40%NaOH、200 mg/L GA3、100 mg/L GA3、200 mg/L NAA、60℃、80℃、100℃水温,不同浸种时间和80目砂纸打磨、刀切处理,研究打破黑果枸杞种子硬实的效果。[结果]结果表明:GA3处理的效果较好,尤其是浸种24 h的效果最好,平均发芽率达到了94%,其他处理依次是98%H2SO4>GA3>NAA>NaOH>刀切>80目砂纸打磨>水温处理。[结论]该研究为进一步了解黑果枸杞的种子特性、试验栽培及其他相关信息提供了试验基础。     

Bilateral antler sequestration above the coronet in a red deer (Cervus elaphus) stag—Insights into the process of antler casting

This paper reports a case of delayed velvet shedding and bilateral premature antler casting above the coronets in a young adult red deer stag from Germany. Based on the established role of testosterone in the control of the antler cycle, the antler abnormality is considered to have been the result of a (temporary) androgen deficiency. The basal surfaces (separation planes or seals) of the cast antlers were markedly concave. Scanning electron microscopy revealed that the separation plane was densely covered with Howship's lacunae, denoting intense osteoclastic activity along the border between the proximal (living) and distal (dead) antler portions. Our observations and those of previous studies indicate that antler casting does not occur at a pre-determined separation plane, but along the border between living and dead bone, regardless of the position of this border within the cranial appendages. This is a major difference to autotomy of (living) appendages at fixed breakage planes, as it occurs for instance in lizard tails.     

通过组织移植揭示鹿生茸区骨膜与鹿茸形态关系的研究

鹿生茸区骨膜是角柄和初角茸生长的组织基础,然而,控制鹿茸生长形状的信息存在于何处目前尚不清楚,本研究利用鹿生茸区骨膜移植试验来揭示这一问题。结果表明,在角柄发生前将鹿生茸区骨膜移植到鹿的前额皮下后,第1年诱发生长了角柄或单枝鹿茸,第2年再生了具有眉枝的典型二杠茸。这一结果表明,控制鹿茸形状的信息存在于鹿生茸区骨膜中,而不是所谓的鹿中枢系统的“鹿茸生长中心”中。     

鹿茸干细胞内[Na+]测定及其影响因素鉴定

为探索鹿茸的形态发生与鹿茸干细胞(包括发生干细胞和再生干细胞)内[Na~+]的关系有关,以鹿茸干细胞为模型,研究不同干性的哺乳动物干细胞内[Na~+]的差异,并鉴定引起这种差异的电压门控性钠离子通道(NaV)因素。采集并培养具有不同干性的梅花鹿鹿茸干细胞,包括生茸区骨膜细胞(AP细胞,鹿茸发生干细胞)和角柄骨膜细胞(PP细胞,鹿茸再生干细胞,其干性低于AP细胞),以鹿普通脸部骨膜细胞(FP细胞)作为对照,并采用CoroNa染色方法,通过荧光强度来分析不同类型细胞内[Na~+]的差异,结合PCR方法鉴定转录水平上NaV基因的差异,并分别用睾酮和MS-222对细胞进行处理,观测其对细胞内[Na~+]的影响。结果表明:鹿茸干细胞内[Na~+]高于FP细胞,其中AP细胞内[Na~+]高于PP细胞;NaV1.1基因在AP细胞中特异性转录;睾酮对这3种细胞内[Na~+]水平没有显著影响;但是,MS-222处理能够在一定程度上降低细胞内[Na~+]。本研究发现:鹿茸干细胞内[Na~+]与其干性一致,干性高的AP细胞内[Na~+]也相对较高;NaV1.1基因在转录水平上的差异,可能是造成AP细胞内[Na~+]高的主要原因;干扰NaV的MS-222能够在一定程度上降低细胞内[Na~+]。说明哺乳动物器官的发生和再生可能与低等动物器官上的发现类似,都与细胞内[Na~+]有关。