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91.
副猪嗜血杆菌外膜蛋白P5能诱导机体产生免疫保护反应,同时可以用于特异性的血清学诊断,本试验选取P5蛋白进行抗原表位鉴定。首先通过PCR扩增P5F1(1~204aa),P5F2(170~296aa)及P5F3(280~371aa)3个片段,PCR产物分别定向克隆到表达载体pET32a(+)中表达纯化。根据ELISA和Western blotting结果确定P5F3片段(280—371aa)是OmpP5的免疫优势决定区。为了进-步对该免疫优势决定区进行抗原表住鉴定,设计了-套11个部分重叠的短肽,这些短肽覆盖全部280~371aa片段。每-个短肽合成1对寡核苷酸链,退火后插入表达载体pGEX-6p-1,与GST进行融合表达。用HPS阳性血清进行ELISA和Western blotting扫描,鉴定出其表位位于”。TGNTCDAVKGRKALIT351。通过序列分析证实该抗原表位在不同的HPS菌株中高度保守。本试验确定了位于HPSOmpP5上的-个抗原表位,为建立-种方便、快捷、适用于现地大规模样品检测的鉴别诊断方法奠定了基础,同时也为HPS新型亚单位疫苗的研制,以及研究病原茵感染和机体免疫过程中P5蛋白与宿主体内相应分子之间的相互作用提供了有用信息。 相似文献
92.
为快速检测猪繁殖与呼吸综合征病毒,应用抗猪繁殖与呼吸综合征病毒单克隆抗体PRRSV-3D10株和4H11株分别作为胶体金标记物和诊断抗体,羊抗鼠IgG作为质控线,制备胶体金免疫层析抗原检测试纸。该试纸卡具有良好的特异性、敏感性、重复性和稳定性,与PCR方法对比总符合率为93.3%。研究显示,本试纸卡能够快速、准确检测猪繁殖与呼吸综合征病毒,可为临床诊断提供参考。 相似文献
93.
A. Valencakova‐Agyagosova Z. Frischova Z. Sevcikova J. Hajurka J. Lepej I. Szakallova G. Kredatusova V. Nagy V. Ledecky 《Veterinary and comparative oncology》2014,12(3):205-214
The aim of this work was to determine levels of carcinoembryonic antigen (CEA) and cancer antigen (CA 15‐3) in the blood serum of 45 bitches. A modified procedure was used to determine the CEA and CA 15‐3 markers with the human kits using the radioimmunoassay method. Samples collected from extirpated tumour of mammary glands were histologically processed and classified as per WHO guidelines. The average age of animals with tumour was 10.00 ± 2.2 years; for healthy bitches average age was 4.2 ± 3.2 years. Values of CEA and CA 15‐3 were considered positive, if they exceeded 0.23 ng mL?1 and 7 IU mL?1, respectively. Average levels of CEA in the tumour group were 0.25 ± 0.06 versus 0.20 ± 0.03 in healthy bitches (P = 0.0001). The average CA 15‐3 value in bitches with tumour was 8.58 ± 1.27 versus 5.14 ± 1.34 in healthy animals (P < 0.0001). 相似文献
94.
95.
96.
M Fevrier 《Comparative immunology, microbiology and infectious diseases》1985,8(2):159-170
Antibody response to an antigen involves the co-operation between three types of cells: macrophages, T cells and B cells. The cognate interactions between these cells play a fundamental role in the expression of a specific antibody response, but the last is modulated by antigen-nonspecific soluble factors produced either by macrophages or by T cells. Macrophages elaborate a spectrum of molecules modulating the function of lymphoid cells; among them are IL1 and prostaglandins of the E series, which are respectively enhancer and inhibitor of the antibody response in vitro. These molecules alter T cell and B cell activities through different mechanisms involving activation or inhibition of IL2 production, or alteration of cells surface antigens. However, the cellular events following the fixation of soluble factor on its receptors are not known. 相似文献
97.
应用薄层聚丙烯酰胺等电聚焦电泳(IFE)对水牛梭形住肉孢子虫(Sarcocystisfusiformis)抗原进行了分析。结果表明,经SephadexG-100纯化的包囊抗原在电泳图谱上显示3条相距较近的带,等电点分别为6.30,6.45,6.65;缓殖子纯化抗原仅出现1条带,等电点为6.40 相似文献
98.
TritonX一100提取香菇单核体L52~(-adc)“和金针菇单核体F_(v23)的菌体壁抗原,分别注射兔子制备抗血清。同样方法制备L52~(-adc)“和F_(v23)原生质体融合子F_(02),F_(03)的菌体壁抗原,琼脂糖双向扩散显示融合子F_(02)、F_(03)的菌体壁抗原能与所制备的亲本抗血清发生特异性沉淀反应。表明两个融合亲本的菌体壁抗原基因在融合子中得到表达。从而也进一步证实融合子确为两亲本的杂合子。 相似文献
99.
提高鸡传染性支气管炎病毒血凝抗原滴度途径及抗原灭活 总被引:4,自引:0,他引:4
将7株传染性支气管炎病毒(IBV)标准株(M41、H120、Holte、Gray、Connecticut、Iowa609和T株)和6株分离株(NIBV、GIBV、M、SH、J和H株)分别接种于鸡胚,收获尿囊液,经浓缩后,用魏氏梭菌培养液处理,制备血凝抗原。其中,H120株血凝滴度最高,T、M、J和H株无血凝性。应用含有不同滴度IBV母源抗体的鸡胚增殖病毒制备抗原,效价与用SPF鸡胚增殖病毒制备的抗原效价一致。尿囊液经反复冻融后再制备抗原会使血凝价降低。抗原分别用甲醛、高碘酸钠、硼氢化钾和SDS灭活,其中甲醛灭活效果最理想。抗原对氯仿敏感,对乙醚稳定。适宜浓度的Na+、Mg2+可显著提高抗原的血凝性 相似文献
100.
鹿源坏死梭杆菌毒力菌株FN(AB)94抗原的免疫原性 总被引:4,自引:0,他引:4
将坏死梭杆菌分离株 FN(AB) 94厌氧培养后 ,裂解制备抗原 ,在抗原悬液中加入等量福氏完全佐剂 ,配制成乳化抗原 ,以此分别接种 3组 9只家兔 ,并设立对照组。初次免疫后 7d进行第 2次免疫 ,每隔 1周采血 ,检测免疫兔血清中抗体滴度 ,2 8d后免疫兔分别用 2 m L 的 10 8个菌 /m L(2个 ML D)坏死梭杆菌分离株 FN(AB) 94感染 ,3只对照家兔同时感染相同剂量 ;逐日观察攻毒家兔的变化。结果 ,3只对照家兔于感染后的 12~ 2 1d死亡 ;而 9只免疫兔完全能抵抗毒力菌株的感染 ,6个月后仍存活。试验表明 ,坏死梭杆菌分离株 FN(AB) 94裂解抗原加佐剂后 ,具有良好的免疫原性。 相似文献