鹅细小病毒四平分离株VP3基因的克隆与序列分析

根据已发表的鹅细小病毒(GPV)核苷酸序列,设计并合成了1对引物,对吉林农业大学预防兽医学研究室分离鉴定的GPV四平株(SP)主要保护性抗原蛋白VP3基因进行扩增。所得到的PCR产物片段大小约1.6 kb,与预期片段大小相符。将该片段纯化后与T载体连接,转化到感受态大肠杆菌JM-109中进行克隆。对所提质粒进行快速鉴定、PCR鉴定以及限制性内切酶NheⅠ和BamHⅠ双酶切鉴定,筛选阳性重组质粒,对重组质粒测序并进行核苷酸序列分析。结果表明:GPV四平株VP3基因长1 605 nt,包含了完整编码GPV VP3蛋白阅读框,且与国内GPV分离株B,GD,HG5/82相应核苷酸序列和氨基酸序列的同源性较高,分别为96.2%,96.3%,96.4%和97.4%,98.7%,98.9%。据此认为,GPV四平株VP3基因可以作为构建具有普遍应用价值的基因工程疫苗的候选基因。     

鸭H9N2亚型禽流感病毒的研究进展

H9N2亚型禽流感病毒目前已经是世界范围内传播最为广泛的人兽共患病毒之一,其感染谱和传染源都在逐渐扩大,引起大众重视H9N2对公共卫生安全存在的潜在威胁。鸭H9N2病毒普遍认为是以水禽类—陆地禽类—人类的路径实现人的感染,H9N2可作为重组病毒的基因供体和其他类型的流感病毒基因进行重排重组具备感染人的能力。加强禽类饲养管理、做好养禽场的防病管理、加大对禽场工作人员宣传教育的力度可以有效的防控H9N2亚型禽流感病毒的传播,疫苗接种、建立准确又灵敏的检测方法是禽流感病毒防控工作的重要手段。     

吐鲁番无核白葡萄延迟成熟初步研究

吐鲁番优越的光热条件和独特的气候资源,为葡萄提供了得天独厚的生长条件,造就了吐鲁番葡萄无与伦比的优良品质。无核白是吐鲁番古老的种植品种,果粒晶莹剔透、甘甜爽口,深受人们喜爱。根据市场需求,延长无核白鲜食葡萄的供应期,初步探索研究无核白葡萄延迟成熟、采收,利用植物生长调节剂赤霉素(GA3)在低浓度下促进细胞的分裂、分化和延缓衰老的作用,在无核白葡萄进入转色期时喷施不同浓度的赤霉素(GA3),通过对比不同赤霉素(GA3)浓度处理下无核白葡萄的百粒重和可溶性固形物含量(Bir%),得出赤霉素(GA3)浓度20 ppm的处理可以有效减缓果实发育,降低可溶性固形物的积累,延迟无核白葡萄成熟。     

生物矿化合成木材-SiO2复合材料的XPS分析

利用生物矿化原理制备木材—SiO2复合材料,采用溶胶—凝胶法制备硅溶液,用不同质量分数的硅溶液对喜树进行浇灌和滴注试验。经过1个月的试验得到样品,利用光电子能谱仪(XPS)分析素材和SiO2复合材样品中硅、碳的质量比,证实喜树成功吸收硅元素,并且存活,植株根茎附近生长较好,枝叶较多,顶部附近枝叶较少。比较浇灌、滴注2种方法:①浇灌过程相对简单,树木对硅的吸收相对较少;使用质量分数越高的药品对树木进行浇灌,树木对硅的吸收越好。②滴注过程相对复杂,树木对硅的吸收相对较多;使用质量分数越高的药品进行滴注,树木对硅的吸收越好;但吸收不均匀,呈滴注孔口附近往树梢方向减少趋势。前期研究结果表明,对树木进行浇灌和滴注,药品硅的质量分数过高树木会死亡,过低则达不到要求,因此,最佳质量分数配制还有待于进一步研究确定。总的来说,利用生物矿化原理模拟木材—SiO复合材是可行的。     

表达猪细小病毒VP2蛋白的重组干酪乳杆菌的构建

利用Oligo设计合成一对引物P1、P2,分别含有BamHI和XhoI酶切位点,以猪细小病毒株LJL12的DNA为模板,采用PCR技术扩增VP2基因,克隆到pMD18-TSimple载体,并进行酶切、PCR鉴定和序列测定。将VP2基因分别亚克隆到干酪乳杆菌细胞表面表达型载体pPG1和分泌型表达载体pPG2的BamHI和XhoI酶切位点,电转化干酪乳杆菌Lactobacillus casei393,获得阳性重组菌株。成功构建了猪细小病毒VP2蛋白的干酪乳杆菌表达系统,命名为pPG1-VP2/L.casei393和pPG2-VP2/L.casei393。     

等位基因特异PCR法鉴定花生FAD2B新突变

花生高油酸供体亲本严重匮乏且多为F435型FAD2突变,创制并利用新型高油酸突变体对花生高油酸育种具有重要意义.本研究对普通油酸的野生型花生15L46和本团队创制的高油酸突变型花生15L46HO FAD2B基因进行克隆测序和序列比对,证实FAD2B基因存在G558A突变.在此基础上设计两套AS-PCR(等位基因特异性P...     

牦牛源产气荚膜梭菌β2基因的原核表达及生物信息学分析

为了原核表达一株牦牛源产气荚膜梭菌Qinghai-1的β2基因及了解其编码蛋白的生物信息。首先利用PCR扩增技术、基因克隆技术构建原核表达质粒并通过高通量测序、双酶切技术、SDS-PAGE检测和Western blotting方法对表达情况进行鉴定,其次利用生物信息学分析的方法对β2毒素蛋白的一级结构、二级结构、蛋白特殊区域、三级结构及B细胞线性抗原表位等多方面进行预测分析。原核表达结果显示：牦牛源产气荚膜梭菌β2基因在温度为37℃,IPTG浓度为1.5 mmoL/L,培养时间为8 h～10 h的条件下可得到大小约为28KD的可溶于细胞质的不含信号肽的目的蛋白。生物信息学分析结果显示：牦牛源产气荚膜梭菌β2基因大小为798 bp,共编码265个氨基酸,与印度的产气荚膜梭(FR687302.1)的β2毒素基因相似性最高;其分子式为C₁₃₉₂H₂₁₃₆N₃₅₆O₄₁₈S₁₁,分子量为30.9 ku,pI=6.04,负电荷(Asp+Glu)残基总数36个,正电荷(Arg+Lys)残基...     

矮化中间砧苹果施氮位置对细根分布、氮素吸收和产量品质的影响

为明确矮化中间砧苹果树合理的施肥位置,减少氮肥的浪费.试验于2018年和2019年,以'烟富3'苹果/SH6/八棱海棠为试材,借助15N同位素示踪技术,研究了萌芽前在树冠投影范围距树干由近及远的3个水平距离——内环、中环和外环施氮对新梢旺长期细根和土壤15N分布、树体15N吸收以及果实产量和品质的影响.结果 表明:各处...     

抗青枯病花生新品种日花3号的选育及栽培技术

日花3号是山东省日照市东港花生研究所选育的直立疏枝、中熟高产、高抗青枯病大花生新品种,母本为鲁花3号,父本为花育16号,2020 年通过国家非主要农作物品种登记,登记编号:GPD花生(2020)370032。该品种综合性状优良,抗病高产,适宜在山东、河南、河北等花生产区作为春播大花生品种推广种植。     

鸽场乳鸽禽流感H9母源抗体消长规律初探

禽流感可分为高致病性禽流感、低致病性禽流感,高致病禽流感以H5和H7亚型为代表,低致病性禽流感以H9亚型为代表[ 1 ].H9亚型禽流感一般呈现较低的发病率和死亡率,但可引起禽呼吸道症状、造成料重比升高、产蛋下降等症状[2-3] , H9亚型也有感染儿童的报道[4-5].鸽子相对其他家禽来说具有较高的抗病能力,一般呈隐...