栗蚕幼虫酯酶同工酶酶谱多态性及应用于品种间亲缘关系的分析

栗蚕是珍稀的野蚕资源。采用聚丙烯酰胺凝胶电泳法,测定栗蚕幼虫不同发育时期、不同组织器官的酯酶同工酶酶谱,并依据酯酶同工酶酶谱的多态性分析纯黑、纯绿2个品种的亲缘关系。检测结果表明:栗蚕幼虫中肠的酯酶同工酶活性和酶带数随龄期而增加,且同一龄期以盛食期的酶表达量最高;幼虫中肠及脂肪体中的酯酶同工酶活性较强,并且酶带数较多;2个供试品种间的酯酶同工酶酶谱明显不同。根据酶谱差异分析2个品种的遗传相似系数为0.86,表现出较近的亲缘关系。研究结果提示:栗蚕幼虫酯酶同工酶的酶活性和酶带数与生长发育和组织功能有关,幼虫酯酶同工酶酶谱可以作为分析品种间亲缘关系的依据之一。     

应用同功酶分析技术研究不同苜蓿品种的生态学特性

作者探索了用聚丙烯酰胺凝胶电泳和聚丙烯酰胺等电聚焦电泳分析苜蓿酯酶同功酶和过氧化物酶同功酶的方法,确立了苜蓿种子幼芽酯酶同功酶和过氧化物酶同功酶的基本谱型。结果表明,聚丙烯酰胺过氧化物酶同功酶分析法适于苜蓿种子幼芽材料的分析,尤以等电聚焦电泳法最为灵敏,在苜蓿品种鉴定上有一定潜力。结果还表明甘肃各地方品种间及与陕北苜蓿间的亲缘关系十分密切,与新疆大叶苜蓿关系较远,与加拿大润布勒苜蓿亲缘关系最远。苜蓿的抗寒、抗旱性,等生态学特性与过氧化物酶同功酶和酯酶同功酶的酶带活性正相关,而与酶带的数量无关。     

油菜花药中酯酶和柱头中角质酶的提纯

油菜授粉时期花粉药和柱头总蛋白质提取液经ＳＤＳ聚丙烯酰胺凝胶电泳分离,花药中酯酶用α－乙酸蔡酯和β－乙酸萘酯染色,柱头中角度质酶用４－Ｍｅｔｈｙｌｕｍｂｅｌｌｉｆｅｒｕｌ ｂｕｔｙｒａｔｅ染色。切下的酶带纯化后,经ＳＤＳ聚丙烯酰胺凝胶电泳检测,酯酶分子量约为３１ＫＤ,角质酶分子量约为３７ＫＤ。     

四川割手密和甘蔗种间酶谱性状聚类研究

本文应用数量分类学原理和方法,研究了不同来源的割手密(S.sp-ontaneum L.)种群和甘蔗种间叶片过氧化物酶带。结果表明,在70个材料中,共出现8个类群。四川48个割手密分属6个类群,反映了遗传多样性和地理分布特点。类群Ⅵ—Ⅶ由甘蔗属不同种组成,说明它们具有相近的亲缘关系。斑茅(S.arundinaieum)自成为第Ⅷ类群,体现了与甘蔗属其它种遗传上的差异。此外,还探讨了不同聚类方法在甘蔗分类上的可行性。     

水分胁迫对玉米两个生育时期EST和POD同工酶的影响

利用盆栽对6个玉米自交系在拔节期和抽雄期造成水分胁迫,7d后取样进行酯酶和过氧化物酶同工酶电泳分析。结果表明,水分胁迫后,酯酶同工酶在两个时期酶谱表现不一致,但与胁迫影响无关。过氧化物酶同工酶表现为抗旱自交系酶活性上升,不抗旱自交系酶活性下降,其中第5带的活性变化与总活性变化一致,抽雄期表现更为明显。     

离子注入对家蚕后代血液蛋白质及酯酶同工酶的影响

离子束注入家蚕蛹及卵育成的新品系与原品系之间血液蛋白质、酯酶同工酶谱带都发生了变化。这些变化没有规律 ,说明离子束注入家蚕引起的变异是多方向性 ,可遗传的     

山东省35个黑灰色平菇菌株的酯酶同工酶分析

对山东省大规模栽培的35个平菇商业菌株运用酯酶同工酶电泳技术进行分析。结果表明,35个菌株有30个酶谱类型,不同菌株有各自特有的酯酶同工酶酶谱。聚类分析表明,供试菌株在70%相似水平上分为4大类:第一类包括以黑丰268为代表的8个菌株;第二类包括以2002-4为代表的4个菌株;第三类包括以超级99为代表的7个菌株;第四类包括以庆丰518为代表的16个菌株,多为杂交菌株。     

Expression of esterase gene in yeast for organophosphates biodegradation

Organophosphates are esters of phosphoric acid and can be hydrolyzed and detoxified by carboxylesterase and phosphotriesterase. In this work esterase enzyme (Est5S) was expressed in yeast to demonstrate the organophosphorus hydrolytic activity from a metagenomic library of cow rumen bacteria. The esterase gene (est5S) is 1098 bp in length, encoding a protein of 366 amino acid residues with a molecular weight of 40 kDa. Est5S enzyme was successfully produced by Pichia pastoris at a high expression level of approximately 4.0 g L⁻¹. With p-nitrophenol butyrate as the substrate, the optimal temperature and pH for enzyme activity were determined to be 40 °C and pH 7.0, respectively. The esterase enzyme was tested for degradation of chlorpyrifos (CP). TLC results obtained inferred that CP could be degraded by esterase enzyme (Est5S) and HPLC results revealed that CP could be efficiently degraded up to 100 ppm. Cadusafos (CS), coumaphos (CM), diazinon (DZ) dyfonate (DF), ethoprophos (EP), fenamiphos (FM), methylparathion (MPT), and parathion (PT) were also degraded up to 68, 60, 80, 40, 45, 60, 95, and 100%, respectively, when used as a substrate with Est5S protein. The results highlight the potential use of this enzyme in the cleanup of contaminated insecticides.     

果蔗不同器官在不同生育期的同工酶聚类相关分析

为了解过氧化物酶(POD)和酯酶(EST)同工酶在果蔗生长中的变化规律,本研究选择不同的取样时期和植株不同器官,对8个果蔗品种利用垂直平板聚丙烯酰胺电泳得出的叶片、根组织不同生育时期POD、EST同工酶酶谱进行聚类分析,并检测其相关性。结果表明：（1）不同品种间同工酶谱的遗传相似系数存在差异,特别是外引黑皮果蔗(Badila)与中国地方品种之间存在着一定的遗传差异;（2）不同生育时期叶片或根部的POD同工酶和EST同工酶酶谱的聚类图都存在着差异;（3）叶片中的POD、EST酶谱在各个生育时期均达到极显著相关。说明叶片是这两种酶基因表达的最重要活性部位,因此叶片可以作为同工酶分析较为稳定和适宜的采样部位。     

家蚕杂种优势与血液酯酶同工酶谱的分析

采用垂直不连续聚丙烯酰胺凝胶薄层电泳（ＰＡＧＥ）,对家蚕血液酯酶同工酶进行了大量的调查。结果表明,双亲酶谱的差异越大,其杂种出现互补酶带和杂种酶带的机会越多,此类杂种人有较强杂种优势的可能性也较大。因此,应用ＰＡＧＥ进行家蚕血液酯酶同工酶谱的分析,作为筛选家蚕家优势较强的组合亲本和早期预测杂种优势,对缩短家蚕育种周期起着重要的作用。