芜菁小孢子培养及其胚状体离体发育过程

为提高芜菁小孢子培养的产胚率,以新疆柯坪县当地农家品种‘阿恰芜菁’为供试材料,通过DAPI染色进行荧光显微观察芜菁花蕾长度与小孢子发育时期的对应关系,了解其对胚诱导的影响,并利用倒置显微镜技术观察了解小孢子培养过程中胚状体离体发育过程。结果表明:花蕾长度为1.5~2.0mm时,仅有6.45%的小孢子处于单核靠边期,培养未得到胚状体;当花蕾长度为2.0~2.5mm时,56.55%的小孢子属于单核靠边期,此时产胚率最高,每蕾达8.32个;当花蕾长度为2.5~3.0 mm时,单核靠边期的小孢子降至36.15%,此时可以得到胚状体,但每蕾仅有0.72个。可见,大部分处于单核靠边期至双核早期的小孢子最适合芜菁的小孢子培养。芜菁小孢子培养过程中胚状体的发育过程为:热激处理→膨大→均等分裂或不均等分裂→小细胞团→球形幼胚→心形胚→鱼雷形胚→子叶期胚→胚再生植株,且在此过程中胚胎发育存在不同步性。     

枇杷花药胚状体诱导条件的优化

以‘大五星’枇杷花药为外植体,研究小孢子发育时期、低温处理及植物生长调节剂对花药愈伤组织诱导及胚状体发生的影响。结果表明：枇杷小孢子发育时期与花蕾横径存在对应关系,横径为4.68～5.28 mm的枇杷花蕾处于单核靠边期,此时期的小孢子胚状体诱导率最高,为25.05％;经4 ℃低温处理2 d的花药愈伤组织诱导率最高,达69.93％;花药愈伤组织诱导的最适培养基是MS+2,4-D 0.5 mg/L+6-BA 2.0 mg/L,愈伤组织诱导率为78.22％;枇杷花药愈伤组织诱导胚状体的最适培养基为MS+ZT 0.05 mg/L+NAA 0.01 mg/L+IBA 0.05 mg/L,胚状体诱导率为25.56％。     

结球芥菜游离小孢子培养的胚状体发生

2009～2011年对6种不同结球芥菜品种进行了小孢子培养试验,结果表明:在相同的培养条件下,各品种胚状体的发育是不同步的,胚状体的平均产量也存在极显著的差异,以大平铺的平均产胚量最高,为3.52个/蕾,其次为哥历蕾。     

2,4-D和6-BA组合配比对金达苜蓿愈伤组织诱导与分化的影响

为了建立一个高效的金达苜蓿(Medicago sativa L. cv. Jinda)组织培养再生体系,我们以金达苜蓿无菌苗的胚轴上段、下段、子叶为外植体,进行了2,4-D和6-BA不同组合配比对愈伤组织诱导和胚性愈伤组织及胚状体分化的影响,这对其以后建立遗传转化体系具有重要的意义。结果表明:胚轴上、下段和子叶是很好的诱导愈伤组织的外植体;在MSO胚状体诱导培养基上,分化出胚性愈伤组织的最佳2,4-D、6-BA剂量配比为8:0.2,成苗培养基为MSO+30 g/L蔗糖+6 g/L琼脂。     

甜菜(Beta vulgaris L.)原生质体培养研究初报

从甜菜下胚轴愈伤组织SC_3和未授粉胚珠愈组织SC_1、SC_2中分离到原生质体,在MSB(2)培养基中进行液体浅层培养。约1周后,开始第一次细胞分裂,2～3周左右形成了小细胞团,SC_3原生质体直接发育成原胚。此时统计植板车约为0.1％～0.2％。培养至第五周,3种基因型原生质体中均出现肉眼可见的愈伤组织,原胚发育成球型胚状体。待愈伤组织长到一定大小时,及时转移到新的固态培养基上增殖后进行各种分化试验。球形胚在原培养基中继续培养,7～8周后形成心形胚状体。     

结球甘蓝小孢子胚诱导与植株再生

以4个结球甘蓝品种为试材,研究不同条件对小孢子胚诱导和植株再生的影响.结果表明:基因型是限制小孢子胚发生的主要因素.适宜取材的花蕾大小为2.5～4.0mm,瓣药比为2/3 ～7/6,盛花期是取蕾的适宜时期;培养基大量元素减半和添加适量活性炭均可显著提高胚状体诱导率,但对于难出胚基因型没有起到诱导出胚的作用;胚状体的诱导和萌芽需要植物生长调节剂NAA和6-BA的参与,适宜的胚状体诱导培养基为NLN-13+0.2mg· L-1 6-BA+0.1mg·L-1 NAA,胚状体诱导率为38胚/10蕾,适宜的胚状体生芽培养基为MS+0.4mg·L-16-BA +0.1mg·L-1 NAA+3％蔗糖+0.7％琼脂,芽诱导率达46.7％.     

甘蓝型油菜DH系培养技术优化(英文)

[Objective] The aim of this study is to reveal the disinfectants and disinfection methods,medium components,and embryoid culture method on dissociative microspore culture.[Method] B5 as basic medium appended with different concentrations of sucrose,agar and different hormone combinations was used to optimize the culture technique for DH line in Brassica napus L.[Result] Both the 15 min disinfection of NaClO containing 5% Cl-and 10 min disinfection of 0.1% HgCl2 performed well in disinfection and subsequent embryo production;in the extraction process of dissociative microspores,B5 medium containing 2% sucrose could achieve a good embryo production effect;under dark condition microspores were firstly incubated at 32 ℃ 5-7 d,then at 25 ℃ 12-15 d,and finally transferred to 25 ℃ oscillator(60-65 r/min)for 3-7d,when the embryoid would become full ripeness;1/2MS medium appended with 1.2% agar,0.02% NAA,2.0 mg/L 6-BA,3.4 mg/L AgNO3 and 2% sucrose was helpful for embryoid differentiation and plantlet generation,presenting low degree of browning and slight vitrification.[Conclusion] The results may facilitate DH Line in rape production in large scale and high efficient transformation system.     

高秆野生稻(Oryza alta L.)叶片组织培养中通过胚状体获得再生植株

高秆野生稻叶片可诱导出胚性和非胚性2种愈伤组织。胚性愈伤组织在合适的分化培养基上可不断形成胚状体,进而大量获得再生植株,再生植株以绿苗为主,未见绿白嵌合苗。源于不同脱分化培养基的胚性愈伤组织具有相似的胚状体形成和植株再生能力。诱导胚性愈伤组织以N6培养基添加NAA1 mg/L、2,4-D2 mg/L和ZT0.5 mg/L效果最好,形成胚状体并分化植株以MS培养基添加NAA2 mg/L和IAA0.5 mg/L为佳。     

锦丰梨花粉植株的诱导

采用花粉发育单核期的‘锦丰’梨花药,接种在1/2 MS附加IAA 0.2mg/L、BA1～2mg/L的培养基上,经过120天产生胚状体。胚状体转入MS附加GA3 0.1mg/L、IBA 0.2mg/L、BA 1mg/L的分化培养基上,经过85天分化幼梢。无根植株转入1/2 MS附加IAA 1.5mg/L的培养基上,经过14天诱导生根,移栽和嫩枝嫁接成活情况良好。     

建立辣椒DH纯系中花药培养的研究

本文通过胚状体诱导中影响因素基因型、碳源及活性炭的研究，发现基因型不同，诱导率也不同；3％的蔗糖浓度比较适合辣椒的花药培养；低浓度下活性炭的诱导差异不明显。