鹿源牛病毒性腹泻病毒核酸疫苗免疫实验研究

试验应用间接ELISA方法检测鹿源牛病毒性腹泻分离株CCSYD核酸疫苗体液免疫效果,应用淋巴细胞转化实验检测其细胞免疫效果,并与鹿源牛病毒性腹泻分离株CCSYD灭活苗和标准株C24V灭活苗进行比较。结果表明:鹿源牛病毒性腹泻分离株CCSYD核酸疫苗产生了较好的体液和细胞免疫应答,免疫前后免疫应答水平差异均显著(P<0.05)。     

PEDV N蛋白的原核表达纯化及B细胞抗原表位预测分析

本研究旨在对猪流行性腹泻病毒(porcine epidemic diarrhea virus,PEDV)N基因进行克隆构建、表达与其B细胞抗原表位性质的预测。将PEDV的N基因进行PCR扩增,克隆到原核表达载体pET-28a(+)中,经酶切验证获得阳性克隆,将阳性克隆在表达菌E. coli BL21(DE3)中表达。通过对表达条件及纯化条件的优化,获得高纯度表达蛋白。利用生物信息同源模型化软件Swiss-Pdb Viewer建立PEDV-N蛋白的3D结构,并根据生物信息学软件DNA-Star预测PEDV-N蛋白的二级结构、抗原性、亲水性和表面可及性分析,综合分析预测其B细胞抗原表位。经预测PEDV-N蛋白氨基酸序列中存在13个B细胞优势抗原表位区域。研究结果将进一步为PEDV-N蛋白体外表达产物的应用及研制基因工程疫苗提供理论基础。     

生物占位因子防治仔猪黄白痢的试验研究

生物占位因子是一种生物高科技产品,该产品对由毒素源性大肠杆菌引起的仔猪黄、白痢病具有良好的预防兼治疗作用。本试验研究应用该产品通过初生仔猪口服进行预防,并应用本品对未预防和预防后发病的病猪进行治疗,配合有效的饲养环境消毒,使猪群预防后发病保护率达到93％以上,病猪治愈率达到95％以上。     

复方诺氟沙星防治仔猪黄白痢及腹泻的试验

复方诺氟沙星乳剂体外抑菌试验表明：该制剂对革兰氏阳性、革兰氏阴性细菌均有杀灭作用，以沙门氏菌、大肠杆菌最为典型，其抑菌直径为（３４．１５±０．１９）和（３５．００±０．１９）ｍｍ。与其它抗菌药物作药敏试验比较，差异极显著。临床试验表明：该制剂对仔猪黄痢、白痢及仔猪腹泻的疗效确实，其防治的总有效率为９５．５％。     

牛病毒性腹泻病活疫苗BVDV2/JZ05-1株毒力返强试验

研究了BVDV2/JZ05-1株免疫犊牛后是否会出现毒力返强现象.以病毒含量为10-7.26 TCID50/mL的BVDV2/JZ05-1活疫苗滴鼻免疫犊牛(4mL/头),通过疫苗回滴,连续临床观察,采集抗凝血和鼻拭子,对淋巴细胞数量变化进行分析,并从淋巴细胞和鼻拭子中分离病毒.结果表明,BVDV活疫苗BVDV2/JZ05-1株免疫犊牛没有出现BVDV感染的临床症状,淋巴细胞数量正常,鼻拭子和淋巴细胞病毒分离阴性.可见,该毒株对犊牛免疫没有出现毒力返强的现象.     

四川某规模化猪场仔猪腹泻病的诊疗体会

采用RT PCR方法,从四川某规模化猪场仔猪腹泻死亡病例病料中检测猪流行性腹泻病毒、猪传染性胃肠炎病毒、猪轮状病毒,并分离细菌,最终鉴定为猪传染性胃肠炎继发大肠杆菌感染。药敏试验结果显示,分离的致病性大肠杆菌对林可霉素和氧氟沙星高度敏感。根据结果制定相应防治措施,经治疗处理后,病情得到有效控制。     

放牧补饲对肉用犊牛生长发育与经济效益的影响

[目的]研究在放牧补饲条件下不同品种肉牛的早期生长发育与经济效益。[方法]选择3月龄断奶新褐杂牛(新疆褐牛与本地牛)、安杂牛(安格斯与本地牛)、荷斯坦牛、土种牛31头,按品种分组开展夏草场放牧补饲试验。[结果]安杂牛、荷斯坦牛、新褐杂牛和土种牛补饲日增重分别为0.51、0.55、0.56、0.25 kg/d,安杂牛、荷斯坦牛、新褐杂牛的日增重与土种牛相比差异极显著(P0.01)。新褐杂牛、荷斯坦牛、安杂牛的放牧补饲效果较土种牛好,新褐杂牛、荷斯坦牛、安杂牛和土种牛的投入产出比分别为1∶2.32、1∶2.29、1∶2.12和1∶1.02,放牧补饲经济效益明显。[结论]早期断奶对后期放牧补饲肉牛的生长发育具有促进作用。     

抗猪流行性腹泻病毒单克隆抗体的制备与鉴定

为了制备抗猪流行性腹泻病毒(PEDV)的单克隆抗体(MAb),本试验将Vero细胞中增殖的PEDV超速离心纯化,作为免疫原免疫BALB/c雌性小鼠,采用常规的淋巴细胞杂交瘤技术和PEDV重组S蛋白为基础的间接ELISA方法,制备并筛选能稳定分泌PEDV特异性抗体的杂交瘤细胞;分别采用间接ELISA、Western blot和间接免疫荧光(IFA)试验,对单克隆抗体的亚型、特异性等生物学特性进行鉴定。结果表明,本试验成功获得了1株稳定分泌PEDV特异性抗体的杂交瘤细胞株5C3。MAb亚类鉴定为IgM,轻链为k型。杂交瘤细胞连续传至20代,细胞培养上清液和小鼠腹水抗体效价分别稳定在1∶600和1∶10 000。特异性试验结果显示,MAb不与猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)、猪伪狂犬病毒(PrV)、猪圆环病毒(PCV2)发生交叉反应。western-blot结果显示,MAb能特异性识别PEDV的重组S蛋白。IFA试验结果表明,MAb能与PEDV感染的vero细胞产生特异性荧光。说明本试验获得的MAb能特异性识别重组及天然的PEDV S蛋白,具有良好的抗原性和特异性。     

重组人乳铁蛋白对断奶仔猪生产性能及血清生化指标的影响

【目的】研究重组人乳铁蛋白对断奶仔猪生长性能及血液生化指标的影响。【方法】选取 28 日 龄,体重均匀的断奶仔猪 180 头,试验设 6 个处理,每个处理 3 次重复,每个重复 10 头仔猪（公母各半）。A 处理饲喂基础日粮,作为对照;B 处理添加抗生素,在基础日粮中添加 1 g/kg 10% 的杆菌肽锌 +200 mg/kg 10% 的抗敌素;C、D、E、F 处理在基础日粮基础上分别添加 160、320、480、640 mg/kg 重组人乳铁蛋白。试验为 期 28 d。【结果】（1）试验末重与日均增重 B、C、D、E、F 处理均显著高于 A 处理,日均采食量 B、E 处理 显著高于 A 处理,料重比 B、D、E、F 处理显著低于 A 处理,腹泻指数 B、D、E、F 处理显著低于 A、C 处理。 （2）E 处理血清白蛋白、总蛋白含量显著高于 A 处理,B、E 处理血清尿素氮含量显著低于 A 处理。（3）血 清总抗氧化能力,C、D、E、F 处理显著高于 A 处理。D、F 处理血清谷胱甘肽过氧化物酶活性显著高于 A 处 理,E 处理血清总超氧化物歧化酶活性显著高于 A、B 处理,MDA 浓度 A 处理显著高于 C、D、E、F 处理。【结 论】断奶仔猪日粮中添加重组人乳铁蛋白能提高断奶仔猪生长性能、改善血清生化指标及提高抗氧化能力。 综合试验结果,重组人乳铁蛋白添加量为 480 mg/kg 的效果最好。     

抗生素相关性腹泻对小鼠血常规的影响

以小鼠为对象,通过抗生素混合液灌胃5 d建立小鼠肠道菌群失调模型,以等量生理盐水为对照,研究抗生素相关腹泻对小鼠血常规的影响。结果表明:抗生素相关性腹泻使小鼠血小板数量及平均体积均显著小于对照组(P0.05),红细胞分布宽度显著大于对照组(P0.05),其余各项指标均与对照组差异无统计学意义(P0.05)。这表明抗生素相关性腹泻可显著降低血小板计数、血小板平均体积和红细胞分布宽度,对小鼠的凝血功能有显著的影响。