副产物乳酸对猪链球菌疫苗株ST171发酵的影响

为提高猪链球菌(S.suis)疫苗的高密度发酵效果,本研究对S.suis疫苗株(ST171)的发酵过程进行检测,利用外源添加试验研究乳酸对ST171发酵的影响,并通过对发酵工艺的优化减少乳酸的生成.结果表明,ST171发酵液中积累有大量对其生长及活菌数量有不利影响的代谢副产物乳酸.经优化确定ST171发酵的最优工艺参数为:溶氧水平20％,初始葡萄糖浓度10g/L,残糖浓度1g/L,最大比生长速率小于0.7 h-1.在优化条件下,发酵过程中乳酸生成量与原工艺相比降低了41.41％,菌体生物量和活菌数量分别提高了70.58％、129.09％,取得了良好的发酵效果.     

利用多联PCR技术检测致病性大肠杆菌肠毒素

根据GenBank上登陆的产肠毒素大肠杆菌(ETEC)产生的STⅠ和LTⅠ、产类志贺毒素大肠杆菌(SLTEC)产生的SLT3种毒素基因序列,利用DNAstar软件针对其保守区设计并合成3对PCR引物:Pa1与Pa2、Pb1和Pb2、Pc1和Pc2,以上述引物分别对已知携带有3种毒素基因的质粒或菌株进行PCR扩增,将扩增产物连接入pGEMT-Vector,测序确认。随后进行了单项与二联PCR试验与优化,建立了较为特异和敏感的多联PCR反应体系,并对临床送检并分离鉴定的致病性大肠杆菌进行了肠毒素多联PCR检测。本研究建立的多联PCR技术可敏感、快速地检测大肠杆菌的肠毒素。     

采用潮汐式生物反应器进行ST细胞培养的研究

ST细胞为一种广泛使用的兽用疫苗生产传代细胞,利用一种新型的潮汐式生物反应器Bellocell进行了ST细胞的培养试验。通过3L转瓶培养扩增ST细胞,消化分散后以1.07×108个细胞接种潮汐式反应器Bellocell ?-500,培养7天,每天监测细胞数量、pH和葡萄糖值的变化。试验期间细胞对葡萄糖的消耗逐日增快,为维持细胞的正常生长,48 h之后需要每天更换新的培养基。在1～6天的培养期间,观察到细胞每日增长倍数在1.2～2.4倍之间,接种后第6天细胞数量达到峰值3.17×109个,是接种之初的30倍。细胞数量达到109时,显微镜观察载体上的ST细胞,呈梭形、大小均一,台盼蓝染色结果证实细胞存活。试验成功实现了ST细胞的高密度培养,为以ST细胞为生产基质的兽用疫苗生产提供了一条简便快捷的途径。     

K326和红花大金元在烘烤过程中烟叶淀粉含量和淀粉酶活性变化规律

 通过对K326和红花大金元（HD）的中部烟叶在烘烤过程中的α－淀粉酶活性、β－淀粉酶活性和淀粉含量的变化规律的研究表明:烘烤过程中烟叶的α－淀粉酶活性有3个高峰值,β－淀粉酶活性有两个高峰值。淀粉含量在烘烤开始后迅速下降,HD淀粉含量平均值从39.2%下降到9.71%,K326平均值从 25.32%下降到7.03%,48 h后略有回升（回升约3%）,84 h后又继续下降至最低点（HD降至7.33%,K326降至6.4%）. K326和HD的淀粉含量变化规律基本上相同。在烘烤开始到36 h,HD的淀粉含量与β－淀粉酶活性有显著负相关,相关系数r=-0.969(r_0.05＝0.95);K326淀粉酶活性和淀粉含量没有明显的相关性。     

基于SCoT标记分析西藏白菜型黄籽油菜遗传多样性

为研究西藏白菜型黄籽油菜种质资源的遗传多样性,提高其育种利用效率。采用SCoT标记方法,对30份白菜型黄籽油菜种质资源进行遗传多样性分析,并结合生物学特性信息进行综合分析。通过对50条SCoT标记引物的筛选,获得24条重复性好、多态性高、遗传信息丰富的引物,并对参试种质资源进行PCR扩增,共获得214个DNA位点,其中具有多态性的位点有182个,平均多态性位点百分率为87.33%。应用NTSYSPc 2.10e软件分析得到,供试种质资源的相似系数在0.473～0.930之间,进行非加权组平均法（UPGMA）聚类分析得出树状图,在相似系数为0.797时,可将30份材料完全区分成5组。结果表明,西藏白菜型黄籽油菜之间的遗传多样性较为丰富,并综合生物学特性和分子水平试验研究,发现塔巴寺黄籽油菜某些性状与芥菜型油菜相似,初步认为塔巴寺黄籽油菜可能是与芥菜型油菜杂交的后代或者本身就携带类似芥菜型油菜的隐性基因,此假设可在后期分子水平实验中进一步论证。     

大豆GmGBP1基因启动子的光周期响应元件TCT-motif功能分析

GmGBP1基因的启动子的多态性位点SNP-796与生育期密切相关,SNP-796G为缩短大豆生育期的优异等位基因。本研究运用生物信息学手段分析发现,等位基因SNP-796 G→A变异会导致TCT-motif光效应元件的变异。将包括SNP-796位点的GmGBP1基因的启动子片段与Luciferase报告基因融合构建植物表达载体并转化烟草,结合烟草叶片中的农杆菌瞬时表达试验,分析了该启动子中TCT-motif顺式作用元件的功能。结果显示,TCT-motif受短日照条件诱导,引起Luciferase基因的表达显著上调。在短日照条件下,TCT-motif可能通过增加GmGBP1基因mRNA的表达量,从而缩短大豆品种的生育期。      

Combining cover cropping with deficit irrigation in a Mediterranean low vigor vineyard

The aim of this research was to test the effects of vineyard soil management practices combined with deficit irrigation strategies on the performance of the grapevine (Vitisvinifera L.) red variety Tempranillo. Two soil management practices (soil tillage – ST and permanent resident vegetation – RV) were combined with three deficit irrigation treatments (regulated deficit irrigation – RDI, partial rootzone drying – PRD and conventional sustained deficit irrigation – DI) during two growing cycles. Compared to ST, RV reduced soil water content during spring, inducing a significant reduction in vine vegetative growth, yield and must titratable acidity. The effects of irrigation treatments were not much pronounced. Only in the second season RDI showed a significant reduction on vine vegetative growth, yield and must titratable acidity as compared to PRD and DI whose results were similar to one another.     

水稻耐盐相关QTL研究进展

盐害是影响水稻生长的非生物胁迫之一。综述了近年来水稻耐盐性数量性状基因座位（QTL）定位和基因克隆所取得的进展,并提出了建议,为今后深入开展水稻耐盐性研究提供了参考。     

反相高效液相色谱法测维生素A含量

目的：建立一种用反相高效波相色谱测定维生素Ａ的方法。方法：色谱柱：Ｈｙｐｅｒｓｉｌ ＯＤＳ（１５０ｍｉｎ×４６ｍｍ）,流动相：甲醇－水（９６：４）,流速１．０ｍｌ／ｍｉｎ,紫外检测器波长３２５ｎｍ,柱温２５℃,外标法测定。结果：维生素 Ａ在 ２．５～３０．０μｇ／ｍｌ之间有良好的线性关系,最低检测浓度为 １．５μｇ／ｍｌ,平均回收率为９８．５％,精密度ＲＳＤ±ｌ、５６％（ｎ＝３）。结论：本方法准确、灵敏、适应面广。     

Construction and Characterization of the Yeast Two-hybrid cDNA Library of ST Cells

To seek out proteins interact with VP2 structural protein of porcine parvovirus (PPV) in ST cell and study the molecular mechanisms of viral infection and pathogenicity, a ST cDNA yeast hybrid library was created. Firtly,the total RNA of ST was extracted using RNeasy Min Kit,and double strands cDNA was synthesized by SMART technique. Then, the ST cDNA library was successfully created by homologous recombination in yeast, the titer was 8.1×10⁸ CFU/mL, the inserts varied from 250 to 1 000 bp,the average of inserted fragments was about 500 bp,and the recombination rate was 96%.These datas indicated that the yeast two-hybrid cDNA library was successfully constructed and might be useful for screening the host proteins interacting with structure protein of PPV.