牛原代肌肉卫星细胞和前体脂肪细胞不同混合比例共培养细胞活性的比较

为探索不同细胞混合比例对牛原代肌肉卫星细胞和前体脂肪细胞共培养体系细胞活性的影响,本研究采集新生秦川犊牛背最长肌和肾周脂肪,分离提取肌卫星细胞和前体脂肪细胞,采用DMEM/F12培养基,建立不同血清浓度(5%、10%、15%、20%的胎牛血清,FBS)的牛原代肌肉卫星细胞和前体脂肪细胞的共培养体系,然后通过分别调整各共培养体系中肌卫星细胞和前体脂肪细胞的混合比例(肌肉细胞∶脂肪细胞=10∶1、5∶1、2∶1),来研究细胞混合比例对各共培养体系的影响。共培养14d,每两天更换培养基,并采用MTT染色法测定细胞活性。统计分析后发现∶随着共培养体系中前体脂肪细胞比例增加,共培养细胞活性增加;共培养10d以后不同混合比例细胞活性有着显著差异(P<0.05);混合比例为2∶1时共培养细胞活性最高。综上,为了获得最好的牛肌卫星细胞和前体脂肪细胞共培养效果,达到较高的细胞培养活性,建议牛肌卫星细胞和前体脂肪细胞按5∶1或2∶1的混合比例进行共培养。     

Importance of brucellosis control programs of livestock on the improvement of one health

Brucellosis not only represents an important health restraint on livestock but also causes high economic losses in many developing countries worldwide. Despite considerable efforts made for the control of brucellosis, the disease is still spreading in many regions (such as the Middle East) where it represents one of the most important health hazards impacting both animals and humans. The present review aims to investigate the efficacy of veterinary control programs regarding brucellosis, with a special focus on current prevention, control, and eradication approaches. The reasons for unsuccessful control programs such as the absence of highly effective vaccines and non-certified bulls are also debated, to understand why the prevalence of brucellosis in livestock is not decreasing in many areas despite considerable efforts taken to date. The importance of governmental and regional investment in brucellosis control remains one of the main limiting factors owing to the limited budget allocated to tackle this disease. In this context, one health concept has generated novel comprehensive approaches with multiple economic implications across the livestock industry and public health. However, the implementation of such global preventive strategies appears to be a key issue for many endemic and low-income countries. According to the collected data, epidemiological contexts including management and trade systems along with well-defined agro-ecological zones should be evaluated in brucellosis endemic countries to improve milk production and to enhance the sustainability of the livestock sector at both national and regional levels.     

牛早期胚胎性别鉴定PCR反应体系的优化研究

根据牛SRY基因序列设计合成2对巢式PCR引物作为性别鉴定引物，根据牛酪蛋白基因序列设计了一对引物作为内标引物建立了牛胚胎性别鉴定的PCR反应体系。同时对常规PCR和巢式PCR在牛早期胚胎性别鉴定中的实用性进行比较。15头公牛、13头母牛的DNA样品检测结果表明：使用巢式PCR公牛可以扩增出205bp的SRY基因片段和403bp的酪蛋白基因片段，母牛只能扩增出403bp的酪蛋白基因片段；而使用常规PCR时公牛扩增出255bp的SRY基因片段和403bp的酪蛋白基因片段，母牛只能扩增出403bp的酪蛋白基因片段，其性别鉴定结果和实际完全一致。由于巢式PCR只需10个细胞就可以在紫外透射分析仪下看到扩增结果，而常规PCR则需要20～30个细胞，所以胚胎性别鉴定时使用巢式PCR效果更好。试验采用巢式PCR鉴定了10个奶牛胚胎的性别，同时还对血清是否会对试验结果产生影响进行了研究。     

牛ASCL2基因生物信息学分析

在人与小鼠中,ASCL2基因是一个母源表达的印记基因,在早期胚胎和胎盘发育中起重要作用。牛ASCL2基因的印记状态和印记的分子机理还没有被研究。本研究采用生物信息学方法对牛ASCL2基因分子进化、启动子和CpG岛区域以及蛋白的高级结构进行分析和预测,为进一步揭示该基因生物学功能和其分子调控机理奠定基础。对21种哺乳动物ASCL2基因的mRNA序列进化分析表明：这21种哺乳动物问的遗传距离小于0．536,且牛与猪遗传距离最小,为0．106,与基因进化树分析结果一致。CpG岛在线软件预测显示,在牛中,该基因上游5k序列中有三个CpG岛。启动子在线软件预测和转录因子分析相结合显示,启动子最可能位于该基因5’端上游4725--4775bp处CpG岛区域内,此区域包括大量潜在转录因子结合位点,并在4734bp处存在一个TATA框。蛋白质在线软件分析表明,ASCL2基因编码一种螺旋一环一螺旋形转录因子,有仅一螺旋、B一转角和无规则卷曲3种二级结构。     

苜草素对肉仔鸡免疫、内分泌和脂类代谢的一些指标的影响

本试验旨在研究不同剂量的苜草素(苜蓿提取物)对肉仔鸡免疫、内分泌和脂类代谢的一些指标的影响。240只1 d商品代AA雄性肉仔鸡随机分为4组。对照组饲喂基础日粮,处理组日粮中分别添加100、300和500 mg/kg苜草素。分别于28、35、42和49 d从每组取6只鸡,称重、心脏采血后处死,剥离腹脂并称重。分离血清后,进行新城疫血凝抑制抗体效价、甲状腺素、胰岛素、甘油三酯和总胆固醇水平的测定。结果表明,添加500 mg/kg苜草素分别在不同日龄显著提高了(P<0.05)新城疫血凝抑制抗体效价和血清甲状腺素水平,显著降低了(P<0.05)腹脂率、血清甘油三酯水平、总胆固醇水平和胰岛素水平;添加300 mg/kg苜草素显著升高了(P<0.05)血清甲状腺素水平和显著降低了(P<0.05)甘油三酯和胰岛素水平;添加100 mg/kg苜草素对这些指标没有显著影响。由本试验结果可以看出,日粮中添加苜草素(500 mg/kg)可以增强肉仔鸡体液免疫能力、调节甲状腺素和胰岛素的分泌,并且具有明显的降脂作用。     

牛胚胎性别鉴定与取样胚胎移植应用技术的研究

本研究应用ＰＣＲ技术扩增牛ＳＲＹ序列进行奶牛胚胎性别鉴定。经１０９枚鲜、冻胚的移植，获鲜胚移值妊娠率５８．６％（３４／５８），常规冷冻胚胎移植妊娠率４４．４％（１２／２７），一步细管冷冻解冻胚胎移值妊娠率１６．７％（４／２４）。犊牛性别验证与ＳＲＹ鉴定结果均相符合。实验中对胚胎发育时期的划分，胚胎质量评定和胚龄的确定，胚龄与受体发情时间在移植中的关系，胚胎的切割取样，取样胚胎的冷冻进行了研究。     

非洲猪瘟常态下猪日粮设计的几点思考

自2019年以来,我国生猪养殖已进入非洲猪瘟常态化时代,除生物安全升级、养殖模式改变等外,日粮设计也至关重要。文章从减法原则、猪舍内环境、提高猪机体免疫力等方面讨论了非洲猪瘟常态化下日粮设计的基本原则与关键点,以期为非洲猪瘟常态下猪的日粮生产提供参考与依据。     

1株牛源蜡样芽孢杆菌的分离鉴定及毒力基因检测

从一头猝死牛的脾脏内分离得到1株细菌,对该菌染色镜检可见其为革兰氏阳性杆菌,呈单个或链状排列。该菌对头孢氨苄、庆大霉素、诺氟沙星等药物敏感。生化检测结果和16S rDNA序列分析表明,该菌株为蜡样芽孢杆菌;经PCR检测该菌含有hbl、nhe、entFM等毒素基因以及看家基因groEL。动物致病性试验结果显示,该菌具有较强的致病性。上述结果表明,该分离菌为致病性蜡样芽孢杆菌。     

重组鸡α-干扰素对鸡免疫功能的影响

摘 要：选取80只10日龄的肉仔鸡,随机分成4组,每组20只。第1组为对照组,第2-4组为试验组,分别肌注0.1倍剂量(1000 U)、1倍剂量(1万U)和10倍剂量(10万U)的鸡α-干扰素。试验期间并对其免疫器官指数、淋巴细胞转化率、白介素-2含量、血清补体总活性进行测定。结果表明：1倍剂量(1万U)组鸡的免疫器官指数、淋巴细胞转化率、白介素-2含量、血清补体总活性均高于其它三组。