豌豆病毒病病原研究

 1986年至1990年,从豌豆田中采集了150余份病毒病样本,鉴定出蚕豆萎蔫病毒(BB-WV)、芜菁花叶病毒(TuMV)、马铃薯Y病毒组分离物、黄瓜花叶病毒(CMV)、莴苣花叶病毒(LMV)、大豆花叶病毒(SMV)、豌豆花叶病毒(PMV)、菜豆黄花叶病毒(BYMV)和苜蓿花叶病毒(AMV)等9种病毒。样本中,BBWV所占的比例最高,达59.2%,其次为CMV,占15.5%。BBWV常与CMV复合侵染豌豆,LMV发生也较普遍。田间调查表明,豌豆病毒病发病率因种植地区及品种不同而有差异,平均发病率为12.4%。     

我国草莓斑驳病毒研究鉴定

 作者采集6省13市病样73株。经鉴定带SMoV的67株,占样本的91.78%。采取指示植物小叶嫁接法及蚜虫分离和传播病毒试验,并辅以病毒提纯,人工摩擦接种草本植物,病毒粒子电镜及超薄切片观察等手段加以确证。在辽宁省田间获得一种草莓中瘤钉毛蚜(Chaetosiphon sp.)以及棉蚜和桃蚜均传播本病毒,传播率依次为70%,40%及33%(最高率),系半持久性传播。病毒提纯制荆最大吸收值在260nm处,最小吸收值在240nm处。A260/280=1.21。电镜观测病毒粒子为球形,直径28~30nm,病叶超薄切片观察,在细胞质里有晶状球形颗粒,直径约25nm,排列整齐。以分离物(M-3)提纯制剂为抗原所制备的抗血清与有关病样呈阳性反应。试验证实了国内SMoV的发生和分布。     

Poxviruses as vaccine vectors

The discovery of Jenner in 1798 founded the science of immunology and eventually led to smallpox eradication from the earth in 1980 after a world-wide vaccination campaign with vaccinia virus (another poxvirus) and paradoxically, despite the eradication of smallpox, there has been an explosion of interest in vaccinia virus in the eighties. This interest has stemmed in part from the application of molecular genetics to clone and express foreign genes from recombinant vaccinia viruses. Vaccinia is also gaining renewed interest due to bioterrorism.

These recombinant viruses have multiple applications in research and vaccinology and led to the development of vectored vaccines, such as the recombinant vaccinia rabies vaccine used to eliminate rabies in Western Europe and, more recently, in the United States. Secondly, alternative poxvirus vectors, such as avipox viruses, were proved to be even safer and efficacious non-replicating vectors (suiciole vectors) when used in non-avian species.     

Foot-and-mouth disease virus

Foot-and-mouth disease virus (FMDV) is an aphthovirus of the family Picornaviridae and the etiological agent of the economically most important animal disease. As a typical picornavirus, FMD virions are nonenveloped particles of icosahedral symmetry and its genome is a single stranded RNA of about 8500 nucleotides and of positive polarity. FMDV RNA is infectious and it replicates via a complementary, minus strand RNA. FMDV RNA replication is error-prone so that viral populations consist of mutant spectra (quasispecies) rather than a defined genomic sequence. Therefore FMDV in nature is genetically and antigenically diverse. This poses important challenges for the diagnosis, prevention and control of FMD. A deeper understanding of FMDV population complexity and evolution has suggested requirements for a new generation of anti-FMD vaccines. This is relevant to the current debate on the adequacy of non-vaccination versus vaccination policies for the control of FMD.

Résumé

Le virus de la fièvre aphteuse est un aphtovirus de la famille des Picornaviridae et l'agent de la maladie animale la plus importante sur le plan économique. En tant que picornavirus typique, le virus de la fièvre aphteuse est nu, sous forme d'icosaèdre et son génome comprend un acide ribonucléique monobrin avec environ 8500 nucléotides et une polarité positive. L'acide ribonucléique de ce virus est infectieux et il se réplique par l'intermédiaire d'un brin d'ARN moins, complémentaire. La réplication de l'acide nucléique de ce virus conduit à des erreurs, de telle sorte que les populations virales comprennent un ensemble de mutants (quasi espèce) plutôt qu'une séquence génomique bien définie. Par suite, le virus de la fièvre aphteuse est génétiquement et antigéniquement varié. Ceci entraîne des difficultés importantes pour le diagnostic, la prévention et la maîtrise de la fièvre aphteuse. Une connaissance plus approfondie de la complexité et de l'évolution de la population de ce virus a conduit à des besoins pour une nouvelle génération de vaccines aphteux. Ceci est lié au débat actuel sur le choix d'une politique de vaccination ou de non-vaccination dans la lutte contre la fièvre aphteuse.     

牛传染性鼻气管炎病毒gD基因的克隆与表达

构建pET32a重组表达载体,转化到BL21(DE3),诱导表达牛传染性鼻气管炎病毒重组gD蛋白。用已发表的IBRV的gD基因序列设计一对特异性引物,通过PCR方法扩增一条766bp的目的基因gD,将gD基因克隆到原核表达载体pet32a,得到重组表达载体pet32-gD,转化到BL21(DE)中,通过IPTG诱导获得融合蛋白。重组表达蛋白经纯化后,免疫印迹分析。结论证明表达的重组蛋白具有良好的免疫原性。     

山东省小规模养鸡场沙门氏菌流行病学调查分析

对近年来山东省内鸡沙门氏菌病进行了调查,并对典型的沙门氏菌做了生化鉴定和药物敏感试验。调查表明沙门氏菌病在小规模养殖场的发生呈上升趋势,常与大肠杆菌病、新城疫和鸡球虫病混合感染。对所分离的沙门氏菌株鉴定表明,70%为副伤寒沙门氏菌,也有鸡白痢沙门氏菌的存在。药敏试验结果表明沙门氏菌对传统的防治细菌性药物产生了多重耐药性,这说明细菌耐药性的产生和发展与抗生素长期反复使用和盲目使用有密切的关系。本文为更有效地防控细菌性疫病提供科学依据。     

H5N1亚型禽流感灭活疫苗免疫鸵鸟后抗体消长规律及免疫程序的研究

为了探讨鸵鸟对H5亚型禽流感灭活疫苗的免疫原性,做好鸵鸟禽流感的防控工作,采用哈尔滨兽医研究所研制的重组H5N1亚型禽流感疫苗,不同剂量免疫鸵鸟,用HI方法检测母源抗体和免疫抗体,根据母源抗体的衰减和免疫抗体的消长规律确定首免和再免日龄.结果表明,雏鸵鸟母源抗体能维持约3周～8周;8周龄时分组首免,C1组产生的免疫反应优于C2组,抗体峰值能达到7.50 log2,维持时间为9周左右;17周龄时C1组以3.0 mL/羽进行二免,2周后抗体达到7.40log2,3周～7周抗体维持在高峰值,最高达8.80log2,以后逐渐下降,有效抗体水平能维持至接种后25周左右.二免后25周进行三免,以5 mL/羽三免后2周抗体可达到9.80log2,2周～4周抗体维持在最高峰,以后缓慢下降,期间抗体时有起伏,但有效抗体水平约可维持1年时间.三免后45周内抗体水平合格率均在70%以上.根据抗体消长规律,初步推荐了鸵鸟的免疫程序.     

转基因抗病毒病四倍体西瓜的培育

利用西瓜花叶病毒2号(WMV-2)外壳蛋白(CP)基因、小西葫芦黄花叶病毒(ZYMV)复制酶(NIb)基因和黄瓜花叶病毒(CMV)复制酶基因构建三价基因的植物表达载体,通过农杆菌介导转化四倍体西瓜植株,经分子检测证明目的基因成功地导入西瓜植株,并在后代中稳定遗传。经温室及大田接种鉴定,T3代转基因西瓜抗病毒性达中抗水平,为抗病毒无籽西瓜新品种的培育提供了可能性。     

香菇病毒快速检测

应用十二烷基磺酸钠聚丙烯酰胺(SDS-PAGE)凝胶电泳分析香菇菌丝蛋白质,根据能否检出22 000道尔顿的34nm香菇病毒外壳蛋白带作为菌株是否带病毒的指标。在生长不正常香菇菌株和对照的带病毒菌株中均检测出了34nm香菇病毒外壳蛋白带。这一结果表明,应用SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳可对香菇病毒进行简单、快速的早期检测。