鱼类细胞工程育种技术和原理（三）

四、性反转 (一)鱼类的性别 自然界的鱼类性别多种多样，有些种类为雌雄异体，其外形和体色都明显不同；有些种类是雌雄同体，或雄性先成熟或雌性先成熟，人们所熟知的黄鳝即是先雌后雄的鱼类。     

罗非鱼的种间杂交

以奥利亚罗非鱼(Tilapia atlrea)、霍诺鲁姆罗非鱼(T．hornorum)和尼罗罗非鱼(T．nilotiea)进行人工杂交实验来测定哪些种间的杂交能产生全雄性后代，并对其杂种的能育性进行推测。     

努力把我省罗非鱼产业做大做强

罗非鱼是联合国粮农组织推荐的优质养殖鱼类。目前 ,世界上有 80多个国家养殖着 1 6种罗非鱼。罗非鱼由初期为渔 (农 )民解决廉价蛋白源和解困的“穷人的鱼” ,目前已被发展中国家的中层社会所接受 ,成为“三文鱼”和鳕鱼的最佳替代品。全世界罗非鱼消费市场正在崛起。据统计 ,     

褐飞虱杀雄菌属共生菌Arsenophonus的传递方式与生物学意义初探

通过阳性(含Arsenophonus)与阴性(不含Arsenophonus)褐飞虱初羽化成虫的正反交试验,发现子代感染Arsenophonus的情况由其母本决定,而与父本无关,表明褐飞虱体内的Arsenophonus可由母体垂直传递给子代。初羽化阳性和阴性成虫的配对实验结果表明,Arsenophonus对褐飞虱后代数量及性比没有显著的作用,无雄性致死作用。通过黄绿绿僵菌ARSEF1764菌株对初羽化雌成虫褐飞虱的接种实验,发现阴性试虫的感病率为55.2%,显著高于阳性试虫的32.5%,表明感染Arsenophonus有助于提高褐飞虱对黄绿绿僵菌ARSEF1764菌株的抵抗能力。     

长翅狭顶蚱雄性的首次发现(直翅目:蚱总科)

记述首次发现采自广西防城和钦州地区的长翅狭顶蚱Systolederus longipennis Zheng et Jiang雄性,标本保存于河池学院动物标本室(7♂5♀)。     

小鼠生殖细胞特异基因Oct4启动子片段克隆及报告载体构建

本研究通过PCR方法从小鼠(Mus musculus)基因组中扩增出Oct4启动子的CR4区和CR1区,将其克隆到真核报告载体pEGFP-1,构建了携带Dct4启动子片段的小鼠生殖细胞特异性报告载体CR1,4-pEGFP-1.用该载体转染多种细胞,在荧光显微镜下观察绿色荧光蛋白(EGFP)在细胞中的表达情况,同时以半定量RT-PCR检测转染细胞中Oct4及其它生殖细胞特异性基因的转录情况.结果显示,GFP在小鼠胚胎干细胞、小鼠胚胎成纤维细胞(MEF)和C2C12细胞中均不表达,而在P19细胞和睾丸细胞中表达.RT-PCR结果显示,Oct4在P19、睾丸细胞和生殖干细胞中特异性转录.这表明所构建的绿色荧光蛋白报告载体只在生殖细胞和多能生殖干细胞中内表达,该质粒可作为示踪生殖细胞的工具,同时也可以作为生殖干细胞多能性状态的一个监测标记.     

罗氏沼虾雄性生殖系统的组织化学研究

本研究用组织化学方法研究了罗氏沼虾雄性生殖系统中主要生物大分子的分布及变化，并探讨其原因。从精原细胞到精子的发育过程中，ＤＮＡ含量变化不大，只是随细胞核从细胞的中部转到成熟精子的主体部。ＲＮＡ的浓度略有降低，蛋白质的含量也有下降，但精氨酸逐渐生成。在成熟精子主体部前端和棘状部有少量ＰＡＳ阳性物质，这与前人的研究有很大的不同。输精管和射精管内分泌物呈ＰＡＳ强阳性，ＨｇＢｐＢ反应也呈强阳性，证明含有大量糖类和蛋白质，这种环境对精子的生理成熟和维持活力可能有十分重要的意义。     

上海地区高原鼠兔若干繁殖特性的观察--Ⅰ.雄性鼠兔的繁殖特性

对我国特有动物--高原鼠兔(OchotonaCurazoniae)在上海地区的若干繁殖特性作了观察.结果表明,鼠兔的精子畸形率较高(为11.64%),影响了其在上海低海拔地区的繁殖;非繁殖季节应用外源生殖激素对诱导雄性鼠兔的睾丸发育亦有一定的效果.     

不同胚期分离的鸡原始生殖细胞(PGCs)遗传与培养特性比较

根据家禽原始生殖细胞(PGCs)的迁移路径,分别从孵化24h的鸡胚生殖新月(gcPGC)、2.5d的胚血(cPGC)和5.5d的生殖腺(gPGC)中分离PGCs,置于完全培养基中培养,表达干细胞标志物SSEA-1和生殖细胞特异标志物DAZL免疫荧光染色鉴定结果,表明纯化的细胞为PGCs。CCK-8法细胞增殖检测显示,BRL-3A饲养层细胞能明显促进PGCs的体外增殖,与无饲养层条件培养的PGCs间有显著性差异(P<0.05),但不同来源PGCs间无增殖速度的差异。检测这3种不同来源PGCs的集落形成能力,结果显示cPGCs的集落形成率最高,集落体积最大。real time-PCR结果显示多能性相关基因nanogv和pouV在gcPGCs中的表达量最高,而生殖相关基因dazl和cvh在cPGCs中的表达量最高。结果表明,体外培养的PGCs保持其体内遗传状况,即gcPGC的多能性最好,cPGC开始进入生殖系分化,而gPGC可能已部分进入减数分裂。而从培养特性上来看,gcPGC由于数量过少难以扩大培养,而gPGC混合的分化细胞过多,cPGC是体外培养和增殖分化研究的最佳细胞来源。     

胚胎干细胞研究进展

介绍哺乳动物胚胎干细胞及其生物学特性；综述胚胎干细胞国内外研究进展和新动态；归纳利用早期胚胎或原始生殖细胞建立干细胞系的一系列技术要点；阐述胚胎干细胞潜在的应用价值。