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81.
旨在提出1种新的具有高灵敏度、特异性抗黄芪甲苷(AST)单克隆抗体的纯化方法,从而为制备具有类似活性基团的其他天然化合物的亲和层析树脂方法提供参考。用AST与环氧活化琼脂糖6B(EAS6B)偶联制备的免疫亲和柱从小鼠腹水中纯化抗AST的高敏单克隆抗体(mAbs),与用G-葡聚糖凝胶从小鼠腹水中纯化的抗AST单克隆抗体进行比较,通过间接ELISA(酶联免疫吸附测定)和间接竞争ELISA比较2种方法纯化的单克隆抗体,评价亲和培养基的效用。间接ELISA结果显示,用AST-EAS6B柱纯化的抗AST单克隆抗体的效价略高于用G-葡聚糖凝胶柱纯化的抗体效价;间接竞争ELISA结果显示,用AST-EAS6B柱纯化的抗AST单克隆抗体的结合抑制50%浓度(IC_(50))为0.005μg/mL,用G-葡聚糖凝胶柱纯化的抗AST单克隆抗体的IC_(50)为0.05μg/mL,用AST-EAS6B柱纯化的抗AST单克隆抗体比用G-葡聚糖凝胶柱纯化的抗AST单克隆抗体对AST更具有特异性。 相似文献
82.
抗鸡传染性法氏囊病病毒单克隆抗体识别的抗原表位分析 总被引:1,自引:1,他引:1
用鸡传染性法氏囊病病毒(IBDV)及其重组表达蛋白VP2,VP3和单抗做各种ELISA试验,测定单抗识别的IBDV蛋白抗原及其多肽片段,并分析单抗识别IBDV抗原表位的空间关系。结果表明,抗IBDV单抗A,B,C,D,E,G与重组表达蛋白VP2呈阳性反应,而与表达蛋白VP3呈阴性反应,单抗C与表达蛋白VP2和VP3均呈阳性反应;单抗A,B,D,E,G识别IBDV VP2蛋白上相近或相似的抗原表位,均识别VP2蛋白多肽序列PJ1,PJ2,PJ5,PJ14,属于同一类群的构像性单克隆抗体。 相似文献
83.
应用病毒分离鉴定、荧光抗体法、反转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)和夹心ELISA 4种方法,分别对23份猪瘟病料组织中的猪瘟病毒(CSFV)进行了检测,并比较4种检测方法的优缺点。结果显示,病毒分离鉴定法准确性较高,诊断比较容易,但存在试验步骤繁琐,所需时间长的缺点;荧光抗体检测法所需时间较短,但需要经验比较丰富人员来判定结果,且存在假阳性结果,特异性比较差;RT-PCR检测法具有快速、敏感等优点,特别是样品保存不理想时更有价值,利用套式PCR(nested-PCR)可以提高检测的特异性;夹心ELISA检测法具有快速、敏感等优点,但在样品保存不理想时会出现假阴性结果。 相似文献
84.
85.
本试验以布氏杆菌SAT 为对照试验,建立了Dot PPA ELISA 检测猪布氏杆菌病抗体的方法,该法检测的猪IgG 含量可达6992×10- 9g,灵敏性高,不同猪抗PRV、PPV、HCV、JEV、CHL 等阳性血清发生交叉反应,特异性强;此外该法还具有操作简便、快捷不需特殊试验条件、结果客观、肉眼易于判断、反应膜片可长期保存等优点。适宜在广大基层单位应用,对布病的快速诊检有着十分重要的意义。 相似文献
86.
家兔黄艾美耳球虫活虫苗免疫的血清抗体消长规律研究 总被引:2,自引:0,他引:2
应用建立的ELISA成功地检测了家兔黄艾美耳球虫活虫苗免疫后的血清IgG抗体水平。结果表明,在首兔15d可检测到血清IgG抗体,首免25d左右血清IgG抗体达到高峰值,二免30 ̄35d左右又测到一个高峰值,攻虫后血清IgG抗体明显升高,重复免疫所诱发的血清抗体IgG水平,但是血清IgG水平与保护率无相关性。 相似文献
87.
潘大仁 《福建农林大学学报(自然科学版)》1995,(2)
应用细胞同步培养技术、高压液相色谱分析(HPLC)和酶偶联免疫法(ELISA)分析了胡萝卜细胞在悬浮培养时生长分裂周期的变化并对内源激动素类物质(玉米素Z-Zeatin、核糖基玉米素ZR-zeatinriboside、二氢玉米素DHZ-dihydrozeatin、核糖二氢玉米素DHZR-dihydrozeatinriboside、异戊烯基核糖基腺嘌呤IP-isopentenyladenine和核糖基异戊烯基腺苷IPR-isopentenyladenineriboside)含量进行定量分析.从用荧光显微技术分析DNA含量变化结果看出,附加有激动素0.1×10-6·L-1的悬浮液中,胡萝卜细胞的分裂周期为8.5h,比不加外源激素的处理短1h.在无外源激素存在的情况下,细胞分裂期中内源细胞分裂素类物质除ZR之外,其余的Z、DHZ、DHZR、IP和IPR的含量在分裂的第6.5h均有一个峰值出现,ZR在第4.5和8.5h有峰值出现.外加细胞分裂素的处理中.Z、iP和iPR整个周期无明显含量变化,DHZ和DHZR在第6.5h出现峰值.ZR在第8.5h时也出现峰值.说明附加细胞激动素可协调Z.iP和iPR的积累,加速利用? 相似文献
88.
SPA单克隆抗体ELISA诊断弓形虫病的研究 总被引:1,自引:0,他引:1
应用生物技术将葡萄球菌A蛋白单克抗体辣根过氧化酶标记物和SPA蓄桥法诊断弓形虫病,通过343份血清样品测定,阴性检出率比间接血凝法高20个百分点。两两法的阳性符合率为100%。该法具有操作简便。快速和灵敏度高的特点。 相似文献
89.
孕牛外周血T淋巴细胞及其亚群的变化 总被引:2,自引:0,他引:2
采用酸性α-醋酸萘酯酶(ANAE)染色法和碱性磷酸酶-抗碱性磷酸酶(APAAP)酶联免疫染色法测定未妊娠,妊娠前期(〈100d)妊娠中期(100~200d)和妊娠周期(〉200d)的黑白花奶牛各10头的外周血T淋巴细胞总数和T淋巴细胞亚群的变化,结果表明,未孕与不同妊娠阶段母牛T外周血淋巴细胞总数,CD3亚群和CD4:CD8比值差异显著(P〈0.05),而不同妊娠期之间则差异不显著(P〉0.05) 相似文献
90.
以合成人工抗原复合物免疫新西兰大白兔,制备了特异性的兔抗BFNH多克隆抗血清。用间接ELISA法测得抗体血清的最高效价可达1:32000。并以BFNH-卵清蛋白(OVA)复合物,作为抗原包被96孔板,建立了间接竞争ELISA法,用于蔬菜中的克百威残留分析。通过实验确定该方法的工作条件和标准曲线,并测定了抗体血清与其它各种氨基甲酸酯类农药的交叉反应率。实验结果表明,抗体血清对其它氨基甲酸酯类农药的交叉反应率均小于10%。该方法对克百威纯品的检测限为0.1μg·ml-1,线性检测范围为102~10-3μg·ml-1。该方法测定结果与高效液相色谱测定结果相一致。 相似文献