辽西地区规模化猪场猪繁殖与呼吸综合征抗体检测与分析

猪繁殖与呼吸综合征（PRRS）又称蓝耳病,曾于1996年、2001年、2006年在我国出现3次暴发式大流行,给养猪业造成了巨大的经济损失[1]。由于引种的不规范及免疫程序的不合理,辽西部分地区的规模化养殖场也有猪蓝耳病的发生和流行。研究采用ELISA检测法对采自辽西地区猪场的血样进行了检测。1材料与方法1.1被检血清2012年3月份—2013年4月份期间,     

ELISA操作要求及质量控制

酶联免疫吸附试验（ELISA）是医学检验的免疫学检验方法之一,已广泛应用于对病原微生物的免疫学检查试验中。用ELISA法检测是目前最常用的实验室检验方法之一。与任何实验室检查方法一样,ELISA存在少量的假性结果（假阳性、假阴性）,对临床诊断和治疗会有一定影响。目前,ELISA已经普遍使用洗板机、全自动酶标分析仪,使试验数据的准确性和真实性都有明显提高。但试验设备的自动化并不代表试验数据100％可靠,还要求试验人员具备扎实的专业知识和熟练的试验操作技术,并且要对实验室的内外环境进行适时监控,从试验软件、仪器设备、操作程序、人员素质及环境监控等方面确保试验结果的准确性和可靠性。     

崇阳县猪伪狂犬病毒感染调查

为了解湖北省崇阳县猪伪狂犬病毒的感染状况,应用PCR技术对来自崇阳县不同规模7个种猪场的126份公猪精液进行了猪伪狂犬病毒(PRV)的检测,阳性率为0;同时采取了这7个已使用猪伪狂犬病病毒g E基因缺失疫苗免疫血清420份,采用了猪伪狂犬病基因缺失鉴别ELISA方法进行了血清学抗体监测,结果检出猪伪狂犬g E抗体阳性10份,阳性率为2.37%。结果表明,崇阳县猪群中存在猪伪狂犬病野毒感染,但感染率较低,不同猪场感染差异大。     

山莨菪碱在兽医临床上的新用途

山莨菪碱(654-2)系M受体阻断药,为我国首创,近年来,笔者将其用于抢救治疗家畜有机磷中毒、哮喘病、尿结石等许多疾病,疗效满意,兹简述如下。1 抢救治疗有机磷中毒 654-2能抑多种平滑肌兴奋,制止腺体分泌。清除或减     

用酶联免疫吸附试验（ELISA）评价小鸡IBD免疫效果

用酶联免疫吸附试验（ＥＬＩＳＡ）评价小鸡ＩＢＤ免疫效果曹永长，毕英佐，朱基美（华南农业大学动物科学系，广州５１０６４２）酶联免疫吸附试验（ＥＬＩＳＡ）用于生产场疫苗的免疫效果评价还是最近几年才发展起来的￣［１，２］。我们采用美国ＩＤＥＸＸ公司提供的Ｉ...     

SPA单克隆抗体ELISA诊断弓形虫病的研究

应用生物技术将葡萄球菌Ａ蛋白单克抗体辣根过氧化酶标记物和ＳＰＡ蓄桥法诊断弓形虫病，通过３４３份血清样品测定，阴性检出率比间接血凝法高２０个百分点。两两法的阳性符合率为１００％。该法具有操作简便。快速和灵敏度高的特点。     

兔出血症病毒抗原捕获ELISA检测方法的建立

用兔出血症病毒（RHDV）单克隆抗体包被酶标板,以兔多克隆抗体作为夹心抗体,建立RHDV抗原捕获ELISA检测方法,优化反应条件并对该方法的敏感性、特异性、重复性、稳定性等指标进行了测试和评价。结果表明,单抗最佳包被质量浓度为1mg/L,兔多抗血清最佳质量浓度为4mg/L。本方法可特异性地检测出兔肝脏病料中的RHDV,纯化病毒的最低检出量为26μg/L。对已知阳性样品的检测显示,捕获ELISA检测的病毒滴度是HA试验的3～13倍。对67份可疑病料,捕获ELISA阳性检出率为62.7%,HA试验阳性检出率为55.2%。用不同批次包被的酶标板重复检测已知样品显示出良好的重复性。本方法敏感性、特异性、稳定性良好,可应用于RHDV的快速、批量、特异检测。     

禽白血病病毒ELISA检测方法的建立与初步应用

本研究以在毕赤酵母系统中表达并纯化的p27重组蛋白为包被抗原,HRP标记的兔抗鸡IgY为酶标二抗,建立了一种快速有效的禽蛋白血病病毒ELISA检测方法,并对其反应条件进行优化。结果显示,该方法具有良好的特异性和重复性;与市售商品试剂盒相比,符合率为96.92%,且更为敏感。应用建立的ELISA方法检测来自吉林省内鸡场314份疑似样品,阳性检出率为75.15%。本研究为禽白血病病毒的检测与诊断提供了一种简便、有效的检测方法。     

应用双抗体夹心ELISA检测罗非鱼感染无乳链球菌后组织和血清中抗原变化

为了建立快速有效的罗非鱼无乳链球菌病早期诊断方法以便服务于及时疫情预警,试验通过双抗体夹心ELISA法确定罗非鱼不同组织(血液、脑、肝、头肾和脾)无乳链球菌阴/阳性临界值后,对感染无乳链球菌不同感染剂量(50cfu/m L、100cfu/m L、200cfu/m L和400cfu/m L)、不同感染时间(12 h、24 h、48 h、72 h、96h、120 h、144 h、168 h)罗非鱼的不同组织样品中的病原抗原进行检测。结果显示,双抗体夹心ELISA法确定脑、头肾、肝、脾及血清中抗原的阴/阳临界值分别为:0.192、0.198、0.196、0.173和0.163;感染后12 h处理组脑组织OD₄₅₀值均显著高于对照组(P<0.01);除24 h外感染组头肾组织OD₄₅₀值远大于对照组,且差异具有时间依赖性(P<0.01);感染后24 h肝组织OD₄₅₀值达到峰值,96 h恢复正常值;感染后12 h,脾脏组织OD₄₅₀值显著高于对照组(P<0.05);感染后12h血清OD