大鼠心肌条件培养基对ICR小鼠胚胎干细胞分离克隆的影响

采用大鼠心肌条件培养基(RH CM)培养ICR小鼠的桑椹胚和囊胚,发现由囊胚分离的ES细胞传代后ES集落的出现率显著高于桑椹胚(P<0.05),囊胚更适合作为ES细胞分离克隆的材料。以RH CM为培养基的试验组ES细胞传代的平均时间间隔为38 h,对照组传代的时间间隔平均为78 h,两者差异显著(P<0.05)。表明RH CM能够促进ES细胞贴壁增殖和ES集落的形成,有效地维持ES细胞未分化状态。试验中设计的3 种培养条件对原代ES集落的形成影响不显著,但对传代后的ES集落的形成和传代的代次有显著差异。其中以MEF作饲养层,添加RH CM培养基的效果最好。     

福木假尾孢菌Pseudocercospora elaeodendri的转录间隔区序列分析

PCR扩增福木假尾孢菌的转录间隔区序列(ITS)并测序,获得的基因序列长度为581bp,相似性分析发现其与假尾孢属不同种之间的ITS序列相似度极高。进一步对相似度高的不同种、属菌的ITS序列采用Neighbor-joining法构建系统进化树。遗传距离分析结果发现,试验菌株仅与同源性为100%的未知种名的假尾孢菌聚为一类。比较不同种的ITS碱基序列,结果表明,试验菌株与其它种之间的差异碱基分布于ITS1和ITS2区域,说明ITS能够体现假尾孢属的种间变异。     

七叶树溃疡病病原真菌的分离与鉴别

【目的】分离和鉴别引起七叶树溃疡病的病原菌,为制定合理的防治技术提供依据。【方法】采用组织分离培养、人工接种、形态观察及核糖体转录间隔区序列(ITS-rDNA)分析,对引起七叶树溃疡病的水渍型溃疡病病原菌NW397和干腐型溃疡病病原菌NW3362种真菌进行鉴别与比较。【结果】引起七叶树溃疡病的病原为2种不同的真菌,并表现出不同的危害特征。水渍型溃疡病菌NW397 ITS-rDNA序列与多主葡萄座腔菌(Botryosphaeria dothidea Sacc.)等的序列同源性高达99%;干腐型溃疡病菌NW336ITS-rDNA序列与乌饭树拟茎点菌(Phomopsisvaccinii)等的同源性高达95%以上。【结论】七叶树水渍型溃疡病菌定名为多主葡萄座腔菌(Botryosphaeria do-thidea Sacc.),干腐型溃疡病菌定名为梨干枯拟茎点菌(Phompsis fukushii Tanaka et Mill)。     

一起煤改电线路引起的故障分析

智能电网调度控制系统(D 5000系统)画面中出线间隔的线路上分别悬挂着几种特殊的标志牌注释字样,如跨高速铁路、跨高速公路、跨重要输电通道的架空输电线路区段,简称"三跨",以及防疫、煤改电、供热、防汛、高危等各类标志牌.下面将一起10 kV煤改电线路引起的故障跳闸处理经过介绍给大家,希望给大家带来警示和启迪.     

不同能量水平对哺乳母猪及仔猪生长性能的影响

本试验通过研究夏季热应激条件下,饲粮不同能量水平对哺乳母猪采食量、哺乳仔猪生长性能的影响,以探讨在夏季热应激条件下,哺乳母猪饲粮中适宜的能量水平。本试验采用单因子试验设计,设4个能量水平,分别是12.94 MJ/kg,13.06MJ/kg,13.14 MJ/kg和13.22 MJ/kg。试验选取36头3-5胎的哺乳母猪,随机分到4个处理,每个处理9个重复,每个重复1头猪。试验结果表明,能量水平为13.06 MJ/kg时可以提高哺乳母猪DE摄入量及缩短断奶到发情间隔,本试验条件下,推荐适宜的哺乳母猪能量水平为13.06 MJ/kg。     

奶牛适时输精技术

奶牛生产力提高主要体现在奶牛产奶量和产犊个数，也就是所谓奶牛生产的经济效益，1头牛终身产奶量的提高，除品种、环境、饲养因素外，适时配种、缩短产犊间隔，也是一个非常重要的因素。因此，要提高奶牛生产力，须掌握奶牛适时输精技术。     

缩短奶牛产犊间隔的技术措施

介绍了缩短奶牛产犊间隔的方法,为养殖户进一步提高奶牛的产犊量和经济效益提供参考。     

基于核糖体DNA第二内部转录间隔区(ITS2)序列鉴定四季青及其近缘种和混伪品

中药材四季青(Ilicis Chinensis Folium)的基原植物冬青(Ilex chinensis)是重要的园林观赏物种。利用DNA条形码技术可以快速、准确鉴定四季青及其近缘种和混伪品。本研究以冬青、铁冬青(Ilex rotunda)、秤星树(Ilex asprella)、枸骨(Ilex cornuta)和女贞(Ligustrum lucium)等37份植物样本为实验材料,提取全基因组DNA,扩增核糖体DNA第二内部转录间隔区(internal transcribed spacer 2,ITS2)序列并进行双向测序。测序结果利用Codon Code Aligner 4.2.7进行序列拼接,获得高质量ITS2序列。同时从Gen Bank中获得28条冬青的同属近缘种以及混伪品女贞、四川山矾(Symplocos setchuensis)的ITS2序列。基于隐马尔科夫模型(hidden Markov model,HMM)注释5.8S和28S,获得完整的ITS2区域,进而应用MEGA6.0(molecular evolutionary genetics analysis)进行冬青种间和种内序列分析,计算种内种间K2P(Kimura 2-parameter)遗传距离,构建邻接树(neighbor-joining tree,NJ tree)。结果表明,琼脂糖凝胶电泳得到清晰明亮的均一条带,说明利用通用的ITS2引物可以成功扩增到用于测序的PCR产物。通过PCR产物测序、数据处理和序列分析可知,冬青种内ITS2长度经过比对后为239 bp,全部样品的种间ITS2比对后长度为269 bp。冬青种内有4个变异位点以及6个单倍型,种间有143个变异位点,远远多于其种内变异位点。MEGA6.0分析结果表明,种间最小K2P遗传距离(0.094)大于种内最大K2P遗传距离(0.013)。邻接树显示,女贞和四川山矾分别以100%的自展支持率分别聚类,表现出良好的单系性,冬青属物种聚为一大支。冬青在冬青属下可以单独聚为一支,可以进行区分。冬青属其他物种以同一亚属聚为一支。研究结果表明,作为一种快速、准确、简便的分子生物学鉴定方法,ITS2可以应用于冬青及其近缘种和混伪品的鉴定,同时对于准确鉴定冬青属物种亦有巨大潜力,可为冬青属植物在临床上的用药安全和开发应用提供科学依据。     

肉鸽“2＋4”养殖模式的关键技术

我们将以1对亲鸽同时喂养4只乳鸽的养殖技术，称之为肉鸽“2＋4”养殖模式。该模式主要采用人工孵化技术、高效调仔并仔技术、保姆鸽喂养技术等，省去了种鸽孵化和哺育时间，大大缩短了种鸽的产蛋间隔和繁殖周期，提高了生产效率和经济效益。