马疱疹病毒抗体间接ELISA检测方法的建立

为建立一种检测马疱疹病毒抗体间接ELISA方法,采用纯化后的马疱疹病毒1型和马疱疹病毒4型g D蛋白作为抗原,经方阵滴定法优化ELISA反应条件,并对该方法进行特异性和重复性试验。结果显示,使用此方法检测其他马常见病毒病阳性血清均为阴性;组内、组间变异系数均小于10%。采用建立的方法与国外商品化的马疱疹病毒诊断试剂盒对送检的300份马血清进行检测比较,两者符合率为95%。结果表明,本次试验建立的间接ELISA方法可以用来检测马疱疹病毒抗体,为马鼻肺炎的防控工作提供技术支撑。     

绵羊家畜衣原体血清抗体间接ELISA检测方法的建立

为了建立检测绵羊家畜衣原体血清抗体的间接ELISA方法,本试验构建pET-28b-ompA重组表达质粒,经诱导表达和纯化后,对重组主要外膜蛋白(MOMP)进行Western blot鉴定;以MOMP为包被抗原,通过反应条件筛选建立绵羊家畜衣原体血清抗体间接ELISA检测方法,分析其敏感性、特异性、重复性和符合性,并进行临床样品检测。结果显示,MOMP以包涵体形式表达,经Western blot鉴定重组蛋白具有良好的反应原性。优化反应条件为：抗原包被浓度为1 mg/L,37℃静置孵育1 h;血清抗体稀释倍数为1∶100,37℃反应1 h;酶标二抗稀释倍数为1∶5 000,37℃孵育1 h;底物显色条件为37℃避光5 min。利用52份绵羊血清确定ELISA方法的阳性判定临界值为P/N=2.156。该方法的敏感性、特异性和重复性较高。用该方法与间接血凝试验对86份血清进行检测,两者符合率为73.2%。用该方法对临床采集的205份绵羊血清样品进行检测,阳性率为34.1%。结果表明,本试验建立的绵羊家畜衣原体血清抗体间接ELISA检测方法具有较高的特异性和敏感性,可应用于临床检测。     

种子行政执法必须强化证据收集

证据就是用以证明案件真实情况的事实材料。证据充分与否是能否把案件办成“铁案”的关键。但在目前的种子行政执法工作中，执法人员往往对证据的收集重视不够，收集不够全面。前不久，笔者亲自参加了某县农业局的一起种子行政诉讼案件的庭审会。基本案情是这样的：2002年4月，某县农业局根据举报对一种子经营企业实施检查。在检查中发现，该企业没有账证，而且业主吴某拒不交出销售记录。在此情况下，执法人员对业主进行了询问，并做了笔录。吴某承认在2000年12月至案发前这段时间，在未取得种子经营许可证的情况下，采取销售不开发票等手…     

事故两例

1.熄火空挡滑行酿祸端2003年8月27日晨,安徽省宁国市青龙乡济州村驾驶员黄某驾驶拖拉机变型运输车行驶在所在地青方公路上。当车行驶至坡底14km公路牌处,只见从空车厢上甩下两人后,机车仍在行驶并直冲菜市场南端的人群,方向右打又转向西端的人群,接连撞倒9人。此起重大农机事故     

小反刍兽疫病毒H蛋白的表达及间接ELISA方法的建立

利用原核表达系统表达了小反刍兽疫病毒(peste des petits ruminants virus,PPRV)血凝素蛋白(H)作为ELISA包被抗原,建立了PPR抗体检测的间接ELISA方法,并对所建立方法的相关条件进行了优化。优化结果显示:抗原的最佳包被质量浓度为20mg/L;血清最佳稀释度为1∶80;酶标二抗的最佳浓度为1∶20 000;抗原抗体反应时间和酶标二抗孵育时间均为45min。批内及批间重复试验结果变异系数均小于10%,说明该方法具有较好的可重复性。检测羊口疮、羊痘、蓝舌病和山羊支原体血清结果均为阴性,说明该方法具有良好的特异性。检测临床血清样品80份,并与国外c-ELISA试剂盒比较,符合率为93.75%。因此,本方法可以用于小反刍兽疫的临床血清抗体检测及流行病学调查。     

阜新地区山杏丰产优株选择初探

运用相关性和变异性分析方法对阜新地区山杏丰产优株进行选择,确定雌蕊发育程度、嫩枝长度、叶形指数、果体、果重作为山杏优良单株间接选择的主要数量性状指标,以1/2000的入选率,每平方米树冠垂直投影面积产核量为指标,对初选28株山杏连续3年的丰产、稳产性的直接筛选,认为LMK037、LMK038(S)、LMK040、LMK049、LMK054、LMK055、LMK057、LMK058、LMK072、LMK073、LMK074、LMK075和LMK076等13株达到了决选标准,中选优株平均产核量296.53g,平均出核率26.21%,平均出仁率29.18%,平均单仁重0.362g,分别是对照的366.22%、95.66%、118.62%和116.40%。     

植物体细胞胚培养影响因素研究的新进展

植物体细胞胚发生是实现快速繁殖和制作人工种子的重要途径.体细胞胚发生可通过直接途径或间接途径实现.近年来,大量研究实例中报道了间接途径体细胞胚培养中各阶段的多项进展.本文总结了体细胞胚培养各阶段的新进展,包括胚性愈伤诱导和增殖阶段外植体选择、激素和其它添加物的影响,胚诱导阶段激素和光照条件的影响,胚发育、成熟阶段激素和渗透调节物质的影响.为植物体细胞胚培养中优化培养条件提供参考.     

吕梁地区规模化养鸡场禽流感抗体水平监测

禽流感（AI）是由禽流感病毒（AIV）引起的一种全身性或呼吸器官的急性传染病，发病急、传播快，致死率可达100％。临床上常见咳嗽、哕音、打喷嚏、伸颈张口、鼻窦肿胀、绿色粪便、产蛋鸡伴有产蛋率下降等。鸡只接种禽流感疫苗后体内会产生特异性抗体，借助间接酶联免疫吸附试验（间接ELISA），可对血清中禽流感抗体水平进行检测，有效评估鸡群的免疫状态。     

棉花落叶型黄萎病菌的检测技术

采用Nit硝酸还原酶缺陷型突变体技术，共得到棉花黄萎病菌Nit突变体301个，其中A型155个，B型97个，C型29个。共检测到落叶型棉花黄萎病菌11株，除以前报道的6株外，发现了5个新菌株。针刺接种后，在棉株上均引起典型的落叶型症状。通过聚丙烯酰受凝胶电泳比较落叶型和非落叶型的8个代表菌株的蛋白质电泳图谱的差异，发现在浓度为7.5%的凝胶中，落叶型菌株有两条特异性的蛋白，其迁移率分别为Rf5=0.135,Rf9=0.405。用非落叶型菌株DF4、落叶型菌株SY12菌体的可溶性蛋白制备获得两个抗血清。用间接ELISA法检测，即能区分棉花黄萎病菌的立枯、枯萎、炭疽病菌，落叶型和非落叶型黄萎病菌均呈阳性反应，但落叶型黄萎病菌的OD值高于非落叶型黄萎病菌。     

番木瓜环斑病毒检测新技术的建立及其在病毒——原生质体体系探索中的初步应用

为了有助于全面了解和评价番木瓜完整植株对番木瓜环斑病毒(PRV)的抗、感病性机制,建立单细胞侵染模型是一个重要途径。本研究首次建立了PRV-番木瓜原生质体实验体系;建立了检测 PRV的间接Dot-ELISA和检测PRV-RNA的 cDNA分子探针的方法和技术,并利用这2个检测技术对PRV在番木瓜原生质体中的行为动态进行了初步探索。