检测猪肺炎支原体抗体间接ELISA方法的建立

选用猪肺炎支原体Mhp J株培养物制备抗原,建立检测猪肺炎支原体抗体的间接ELISA(酶联免疫吸附)方法.结果显示,ELISA试验的最佳反应条件为:抗原包被浓度为1.5 μg/ml,待检血清的最佳稀释浓度1∶100,2%明胶作封闭液,抗原抗体最佳结合时间为90 min,酶标抗体1∶10 000(体积比)稀释,最佳作用时间为60 min.对136份样品检测结果表明,建立的猪肺炎支原体间接ELISA抗体检测方法与美国IDEXX公司生产的猪肺炎支原体抗体检测试剂盒检测的符合率达到83.8%,假阴性率8.8%,假阳性率1.5%.     

含"间接生长因子"的饲料添加剂

生长因子是促进养殖动物整体和内脏器官生长发育的重要活性物质。有的饲料或饲料添加剂中含有生长因子，可直接发挥作用；有的饲料添加剂不含有生长因子，但进入动物体后可诱使动物体或动物体内的有益微生物产生生长因子，间接发挥生长因子的作用，这称为“间接生长因子”，本文着重介绍含“间接生长因子”的饲料添加剂。     

烟草芜菁花叶病毒的ELISA和RT-PCR快速检测技术研究

采用间接ELISA和RT-PCR，建立了烟草芜菁花叶病毒（Turnip mosaic virus，TuMV）快速检测的技术体系。间接ELISA测定结果表明，TuMV多抗按1：3000浓度稀释后，具有较高的检测灵敏度，其检测极限浓度为1：3215；通过改进RNA提取技术，从少量的烟草病叶中提取出高质量总RNA，进行cDNA合成及PCR扩增，得到一条长度约986bp的特异PCR扩增产物，与理论设计的大小一致，可有效地对田间烟株进行快速检测。     

猪泪液的免疫应答试验

以猪肺炎霉形体乳免片.给7只40日龄仔猪作两次点眼,间隔10天。在第二次点眼后10天。取泪液和血清作间接血凝试验。结果表明,在泪液中有特异性抗体,实验猪泪液7/7达1:40“(?)”以上,血清均为阴性。对照组7只仔猪的泪液和血清均为阴性。另外,发现试验猪第三眼睑浅腺,有明显浆细胞浸润和淋巴滤胞增生。     

施肥对提高土壤肥力的作用

肥料在农业生产上的作用不外直接、间接两方面。直接方面是供给养分，营养作物，促进作物代谢，提高产量和改进品质；间接方面是通过调节土壤反应，改善土壤结构，增加土壤的保肥、保水能力，为作物的生长发育创造良好的条件。但肥料的直接作用和间接作用是相互联系，而难于截然划分的。施肥对土壤肥力的作用，归纳起来有以下几方面。     

应用间接血凝试验检测牛肺疫抗体

自制1.5％绵羊红细胞诊断液并用于检测牛肺疫抗体,结果如下:(一)三批标准阳性血清(批号为8601、8301、8001)凝集价均在160倍以上,标准阴性血清(批号为8601)凝集度仅为10倍。15份被检血清IHA的阳性检出率(8/15)高于补体结合反应(CF,6/15)且凝集价均在40倍以上。(二)用牛肝片吸虫病、布氏杆菌病和附红细胞体病阳性血清作类症鉴别诊断,凝集度仅为10倍。(三)把牛肺疫CF8502抗原作倍比稀释,加2个凝集单位牛肺疫阳性血清8601和8301进行间接血凝抑制试验,分别被32倍和16倍稀释的抗原所抑制,本项试验结果表明IHA用于检测牛肺疫,具有检出率高、特异性强、设备要求简单、容易操作等特点,适于在现地推广应用。     

羊棘球蚴病间接血凝诊断试验

<正> 利用间接血凝试验诊断人畜棘球蚴病,国内外已有不少报道。新疆是棘球蚴病高发区,为达到早期诊断主动预防的目的,我们于1991年10月至1992年2月进行了本试验。 一、材料和方法 1.抗原制备 在农八师一四三团无菌抽取绵羊肝、肺棘球蚴包囊液,3000r/min离心15min,取上清,用紫外分光法测定蛋白质含量,分装,-20℃保存备用。 2.血清 阳性血清系从免疫绵羊制备,阴性对照血清采自农八师一二一团初生羔羊,被验血清采自农八师一四三团及石河子市个体户屠宰绵羊和山羊。     

一种快速检测抗沙门氏菌O抗原单克隆抗体的微量间接血凝试验

用热酚—水法提取沙门氏菌脂多糖(LPS),经pH8.0热处理后,致敏醛化的绵羊红血球,建立了一种快速检测抗沙门氏菌O抗原单克隆抗体的微量间接血凝试验。用致敏血球在96孔V型血凝板上与杂交瘤培养上清作凝集试验,数秒钟即能判定结果。本试验具有快速的特点,且有一定的敏感性。     

重组M蛋白间接ELISA检测猪繁殖与呼吸综合征病毒抗体

用纯化的猪繁殖与呼吸综合征病毒重组M蛋白作包被抗原,建立了检测猪繁殖与呼吸综合征病毒抗体的间接ELISA方法,并确立了ELISA最佳工作条件:抗原包被浓度为3.5μg/mL,37℃1h加4℃过夜,血清(1:40)和酶标SPA(1:80)分别在37℃温育1h,加底物溶液常温显色5min。经重复性试验、交叉试验、阻断试验等试验结果表明该方法重复性好、特异性强、敏感度高;与美国IDEXX公司试剂盒相比较,特异性和敏感性分别为96.3%和93.5%,无显著性差异。用建立的方法检测临床血清样品168份,总阳性率为39.9%。     

以重组PvpA蛋白作为抗原的鸡毒支原体抗体间接ELISA检测方法的建立

为建立鸡毒支原体(MG)种特异性检测的间接ELISA检测方法,本研究以原核表达的PvpA蛋白作为包被抗原,初步建立了检测MG抗体的间接ELISA检测方法.特异性试验结果表明,重组PvpA蛋白与鸡新城疫病毒、鸡传染性支气管炎病毒、滑液支原体、大肠杆菌“O”抗原、禽沙门氏茵“O”抗原阳性血清均不发生交叉反应.该方法的批内变异系数小于8％,批间变异系数小于11％,表明具有较好的重复性.采用该检测方法与进口试剂盒对不同省份送检的鸡血清进行检测比较,两者阳性和阴性符合率均达到90％以上.本研究建立的间接ELISA检测方法为MG抗体检测试剂盒的研制奠定了基础.