黄鳍棘鲷精子冷冻保存方法探究

黄鳍棘鲷(Acanthopagrus latus)是中国具有重要商业价值的海水鱼类之一,对其精子开展冷冻保存可为黄鳍棘鲷育种提供一定的技术支持,可有效预防其种质资源衰退,保持其养殖业的可持续发展.该研究以黄鳍棘鲷精子为实验材料,对其精子冷冻保存的稀释液、葡萄糖浓度、抗冻剂种类及浓度、精子与保护液稀释比例和降温程序等进行...     

中华鲟胚胎细胞的冷冻保存及其核移植

为了保存濒危鱼类中华鲟种质资源,对其囊胚细胞和原肠细胞进行了冷冻保存和核移植试验。用二甲亚砜(DMSO)、1,2-丙二醇(PG)、羟乙基淀粉(HES)3种抗冻剂,配制4种冷冻保护液:CP1(12%D)、CP2(10%P)、CP3(8%D 6%E)、CP4(7%P 6%E),冷冻细胞存活率分别为47.4%±4.7%、64.4%±3.6%、54.7%±4.7%、76.7%±5.7%,CP4保存效果最好,说明添加非渗透型抗冻剂羟乙基淀粉能提高冷冻保存细胞的存活率。比较了两种冷冻方法,发现细胞在-7℃平衡30min之后直接投入液氮的一步冷冻降温法是可行的。对不同发育时期的胚胎细胞冷冻存活率进行了比较,结果表明原肠细胞冷冻存活率(64.4%±11.8%)明显比囊胚细胞的(57.1%±11.2%)高(P<0.05)。用冷冻复苏后的囊胚细胞和原肠细胞作供体,以中华鲟未受精卵作受体进行核移植,各移植了469和392枚卵,分别获得了5尾和2尾克隆鱼,核移植成功率分别为1.1%和0.5%。表明可通过冷冻保存胚胎细胞结合核移植技术保存鱼类种质资源。     

羊精液冷冻保存中应注意的几个温度问题

羊精液冷冻保存是畜牧生产及保种工作中的一项实用技术,从Emmens(1950)按照牛精液冷冻方法将绵羊精液冷冻到-79℃获得了较高的存活率算起,已经有半个多世纪了,虽然输精效果并不理想,但无论在生产还是学术研究上都有重要的意义和价值。温度是影响精液冷冻保存效果的关键因素之一,在精液冷冻过程的各个环节中都不容忽视。     

牛冷冻精液稀释液的研究进展

<正>精液的冷冻保存技术是随着人工授精(AI)的广泛应用而发展起来的,为了长时间地保存精液并能够扩大精液的量,在鲜精中加入一定的稀释液,目的是为了使精子有一个适于存活的环境,保证细胞膜的完整不被损害,要求能供给养分、耐低温、抗冻、维持渗透压和电解平衡、维持pH值、抑制细菌生长。精液冷冻保存始于Spallanzani用雪冷却精子的试验〔1〕,解冻后发现有极少数精子仍然存活。     

冷冻受精卵移植的现状

受精卵移植技术的研究开始比较早,约100年前在山羊上首次获得成功以来,1951年应用这一技术在乳牛上得到了产犊,1971年加拿大成立了以牛为对象的商业性受精卵移植公司。其后,以中小型动物为主体应用于基础研究和家畜繁殖领域,逐步得到了改进和普及,以及开发了受精卵的冷冻保存,胚胎分割、体外受精,性别控制等新技术.本文主要介绍比较实用的受精卵冷冻保存技术。     

离心除精浆对提高冷冻精液品质的作用

采用离心洗涤法去除精浆后,对精液进行冷冻处理。发现:1、除精浆精子冻后的活率、Ⅰ类顶体率和精子畸形率与未除精浆组存在显著差异(P<0．05);2、除精浆使稀释后精液精浆中GOT和LDH活性明显升高(P<0．05)。从平衡后到解冻后各组GOT和LDH活性都呈上升趋势。但除精浆试验组比未除精浆试验组上升缓慢;3、除精浆试验组精子的穿卵率、卵内平均精子数都显著高于未除精浆试验组(P<0．05);4除精浆离心洗涤液用生理盐水和脱脂乳-卵柠液．两者之间无显著差异(P>0．05)。     

猪精液冷冻保存影响因素研究进展

由于猪冻精在经济生产中具有重要意义,其关键技术——猪精液冷冻保存技术已成为研究的热点。本文对猪精液冷冻原理及冷冻损伤进行了说明,并对精液稀释前处理、稀释液及添加剂、冷冻保护剂、冷冻程序与解冻、冷冻剂型等方面的研究进展进行了综述。     

植物冰冻伤抢救

江南地区的冷,一般多以湿冷为主,所以冻结出冰凌的情况并不是冬季的常态(图1),但也有个别年份,因为全球气候变化,总是能打破人的惯性思维,出现异常,比如2016年的大寒潮,又或者是北方冷空气突然造访。习惯了最低温度在0至零下4度左右的江浙沪花友经常被超低温搞得措手不及,防冻措施跟不上,户外过冬的植物受损严重。     

虎雪兰玻璃化超低温法脱毒技术的研究

以兰属花卉虎雪兰组培原球茎为试材,采用玻璃化超低温法对兰花病毒脱除进行了研究,以期为虎雪兰玻璃化超低温法脱毒体系的建立提供参考依据。结果表明:在蔗糖浓度0.5 mol·L-1预培养4 d,然后在蔗糖0.6 mol·L-1加载液冰上处理50 min,之后转入PVS2溶液冰上玻璃化处理120 min,再液氮冷冻40 min,37℃水浴解冻3 min,最后卸载液(1/2MS+1.2 mol·L-1蔗糖)卸载20 min,待恢复培养后,原球茎成活率可达到65%以上,随机检测不同处理样品的脱毒率可达97%。     

建兰花叶病毒和齿兰环斑病毒的检测技术及脱毒方法研究进展

为了弄清目前建兰花叶病毒(CymMV)和齿兰环斑病毒(ORSV)病毒检测和脱毒的研究概况,本研究详细阐述了2种病毒的检测方法、采用的脱毒技术和脱毒效率,分析比较了不同技术存在的弊端,指出现有的脱毒方法已不能满足兰科植物脱毒研究的需要。在此基础上,进一步提出应采用安全、可靠的新型脱毒技术来解决目前兰科植物产业瓶颈问题。超低温脱毒技术是近年来发展迅速的脱毒技术,具有独特优势,目前已在多种植物上成功应用,该方法的应用有望解决2种病毒脱毒方面存在的问题。