鸡新城疫病毒洛阳分离株HN基因的克隆和序列分析

应用RT PCR技术从新城疫病毒洛阳分离株中扩增HN的cDNA片段,并将其克隆至pMD18 T载体进行核苷酸序列测定。结果表明:新城疫分离株HN基因片段长度为1716bp,编码571个氨基酸;推测出的氨基酸序列中有5个糖基化位点,12个半胱氨酸残基;与国内外的14株新城疫毒株HN基因相比,核苷酸和氨基酸同源性分别为66.4%~98.5%和87.8%~98.3%;与标准毒株Lasota和Clone30的亲缘关系较远,核苷酸和氨基酸差异性较大,而与天津分离株和云南分离株的亲缘关系较近,基本属于同一基因群。     

新型鹅星状病毒FJ-NP株的分离鉴定

[目的] 确定福建某鹅场雏鹅以痛风为主要病征导致高死亡率的病原.[方法] 2019年8月福建省南平市某鹅场暴发一种以痛风为主要特征的疾病,该病在5～20日龄的雏鹅中发病率高达40％,死亡率为80％,对该场采集的3份样品进行实验室检测和病原分离鉴定.[结果] PCR检测结果显示3份样品新型鹅星状病毒均为阳性;细菌分离结果...     

猪圆环病毒2型荧光定量PCR检测试剂盒原材料研究

通过对比3家公司生产的Taq酶、PCR反应缓冲液和UDG酶,对已建立的猪圆环病毒2型(PCV2)荧光定量PCR检测试剂盒中阳性参考品、最低检测限参考品、精密性参考品和阴性参考品进行制备.结果表明:Takara宝生物工程(上海)有限公司生产的Taq酶、PCR反应缓冲液和上海博彩生物科技有限公司生产的UDG酶的试剂组合扩增...     

夜来香花叶病毒江西分离物的分子特征与序列分析

夜来香花叶病毒(telosma mosaic virus, TeMV)是侵染西番莲的重要植物病毒之一。本研究通过RACE和RT-PCR技术获得3条TeMV江西分离物全基因组序列,除poly(A)尾外,3个分离物基因组全长均为10069 nt。试验中采用汁液摩擦接种的方式对分离物进行生物学特性研究,首次发现该病毒可侵染豌豆寄主。对所获分离物全基因组进行序列一致性分析,结果显示,江西分离物间核苷酸与氨基酸序列一致性分别为98.1%-98.6%和98.8%-99.3%,与GenBank中报道的TeMV分离物全基因组的核苷酸与氨基酸序列一致分别为87.3%-98.9%和91.2%-99.5%,其中与武夷山分离物(MK340755)序列一致性最高。基于不同分离物CP基因的系统发育分析显示,寄主来源相同的分离物亲缘关系较近,推测TeMV的遗传进化与不同的植物寄主相关。     

常见动物疫病的诊治(2)禽流感

禽流感是禽流行性感冒的简称。它是由A型禽流行性感冒病毒引起的一种禽类（家禽和野禽）传染病。根据禽流感致病性的不同,可以将禽流感分为高致病性禽流感、低致病性禽流感和无致病性禽流感。最近国内外由H5N1血清型引起的禽流感称高致病性禽流感,发病率和死亡率都很高,危害巨大。     

蜜蜂麻痹症的防治

蜜蜂麻痹症又称瘫痪病或黑蜂病,是一种流行广泛的成年蜂疾病。在雨季阶段较易发生。此病由病毒引起,分急性型和慢性型两种。病原通过饲料传播,并存在于病蜂粪便中,蜂体、蜂具接触也会染病。此种病毒加热至93℃达30分钟,可以杀死。蜂群发病后,早期衰弱迟钝,病蜂常被健康蜂所驱逐     

蜜蜂残翅病及其防制技术研究进展

蜜蜂残翅病病毒（DWV）是感染蜜蜂最常见、传播最广泛的病毒之一,通常以隐性感染的形式存在。在蜜蜂的各个发育阶段都能检测到DWV,严重时会导致感染蜜蜂表现出典型的发病症状并且使蜜蜂寿命缩短。DWV在其传播媒介狄斯瓦螨Varroa destructor的作用下传播范围更为广泛,在32个国家的蜂群中DWV的平均感染率至少为55%。DWV的大肆流行是导致蜂群损失的重要原因,给养蜂业造成了巨大损失,严重影响了我国养蜂业的健康发展。本文将从DWV的流行与分布、发病特征及危害、传播途径、遗传多样性以及其防制措施等方面对蜜蜂残翅病病毒近年来的研究进展进行综述。为我国进一步开展蜜蜂病毒学研究提供参考,为开发防治技术方法提供新思路。     

影响鸡传染性病毒性腺胃炎人工发病模型建立的关键因素探讨

鸡传染性病毒性腺胃炎（TVP）是一种由病毒引起的慢性消耗性消化道疾病,其可导致典型腺胃炎症状。该病的临床症状多样、病因复杂,流行于多个国家,严重危害全球养鸡业的发展。明晰引起TVP发病的致病病因、建立其人工发病模型是研究该病发病机制及筛选有效防控剂的重要手段。鉴于此,本文对近年来TVP相关病原及其动物模型建立方面的研究进展进行综述,以期为该病的实验室研究及综合防控提供理论基础。     

伪狂犬病病毒UL9基因突变株构建及其生物学特性分析

伪狂犬病病毒（PRV）是一种大的DNA病毒,编码蛋白众多,其中一些具有酶功能,涉及病毒复制、蛋白调控和核苷酸代谢等。本研究在实验室已有的PRV感染性克隆pBAC-PRV基础上,利用体外转座的方法将Tn5转座子随机插入伪狂犬病病毒基因组中,获得病毒复制相关功能基因UL9的突变体。将UL9基因突变体转染Vero细胞,获得重组病毒vPRV-Tn5-UL9。通过病毒空斑实验和多步生长曲线测定等方法对vPRV-Tn5-UL9的生物学特性进行研究分析,结果显示突变病毒可在体外传代,但病毒的增殖速度显著降低,这表明UL9基因为PRV复制非必需基因,但对病毒复制增殖存在重要影响。此外,动物试验显示,vPRV-Tn5-UL9失去对小鼠的致死能力。本研究成功利用体外转座技术获得了PRV的UL9突变病毒,为构建重组病毒的方法提供了新思路,同时也为研究PRV复制机制打下一定基础。     

6株K亚群禽白血病病毒分离株的全基因组测序及遗传进化分析

为研究目前中国临床流行的ALV毒株特征,我们采集临床上ALV P27阳性的鸡的血浆,接种DF-1细胞进行病毒分离,分离出6株外源性ALV毒株,并进一步对分离毒株进行前病毒全基因组测序。结果表明,6个ALV分离株的基因组结构均为典型的复制完整型C型逆转录病毒,缺乏病毒致癌基因,分离株DT190901基因组全长为7473 bp;DT190902和DT190905为7467 bp;DT190903和DT190906为7481 bp;DT190904为7493 bp,分离株间基因组序列同源性较高（98.6%～99.9%）。对6个ALV分离株与其他ALV毒株进行序列比较和遗传进化分析,结果表明,分离株的LTR、gag、pol及gp37基因与内源性ALV相比具有较高同源性（>93.8%）,gp85基因与ALV-K一致性较高（>95.4%）,属于新型ALV亚群（K亚群）遗传分支。分离株的LTR序列与内源性ALV相似,比其他外源性ALV亚群缺少一个CAAT Box、PRE Box、Y Box及CArG Box等转录调控元件。结果表明这6个分离株属于ALV-K亚群,为ALV-K与内源性ALV...