副猪嗜血杆菌外膜蛋白P5的B细胞抗原表位鉴定

副猪嗜血杆菌外膜蛋白P5能诱导机体产生免疫保护反应,同时可以用于特异性的血清学诊断,本试验选取P5蛋白进行抗原表位鉴定。首先通过PCR扩增P5F1（1～204aa）,P5F2（170～296aa）及P5F3（280～371aa）3个片段,PCR产物分别定向克隆到表达载体pET32a（＋）中表达纯化。根据ELISA和Western blotting结果确定P5F3片段（280—371aa）是OmpP5的免疫优势决定区。为了进-步对该免疫优势决定区进行抗原表住鉴定,设计了-套11个部分重叠的短肽,这些短肽覆盖全部280～371aa片段。每-个短肽合成1对寡核苷酸链,退火后插入表达载体pGEX-6p-1,与GST进行融合表达。用HPS阳性血清进行ELISA和Western blotting扫描,鉴定出其表位位于”。TGNTCDAVKGRKALIT351。通过序列分析证实该抗原表位在不同的HPS菌株中高度保守。本试验确定了位于HPSOmpP5上的-个抗原表位,为建立-种方便、快捷、适用于现地大规模样品检测的鉴别诊断方法奠定了基础,同时也为HPS新型亚单位疫苗的研制,以及研究病原茵感染和机体免疫过程中P5蛋白与宿主体内相应分子之间的相互作用提供了有用信息。     

小鼠ZBTB9基因的克隆、亚细胞定位及原核表达

应用RT-PCR扩增技术从小鼠肺组织中成功克隆锌指蛋白ZBTB9基因；该基因含有1 380 bp的开放阅读框(ORF),编码459个氨基酸.为研究其生物学功能,构建pEGFP-C1/ZBTB9融合载体转染细胞,亚细胞定位显示ZBTB9定位于细胞核且呈斑点状分布.构建原核表达载体pGEX-4T-1/ZBTB9,转入大肠杆...     

融合抗菌肽MAPWA和PGBD-2对母猪和仔猪生长性能的影响

<正>采用重叠延伸PCR(SOE-PCR)方法通过一基因柔性接头(linker)将猪白介素2(PoIL-2)、6(PoIL-6)基因构建成PoIL-2-linker-PoIL-6嵌合基因并克隆入pQE-30原核表达载体中进行融合表达;对表达的重组融合蛋白(rPoIL-2-linker-PoIL-6)进行纯化。     

兰州大尾羊解偶联蛋白3(UCP3)基因荧光定量PCR检测方法的研究

试验通过提取兰州大尾羊不同组织中总RNA,反转录获得总cDNA样品,建立了用SYBR荧光定量PCR法检测兰州大尾羊解偶联蛋白(UCP3)基因mRNA在不同组织中的相对表达量的检测方法,并进行批内、批间重复性检验。结果表明:UCP3和GADPH基因标准曲线回归方程分别为CtUCP3=-3.2343x+41.6198和CtGADPH=-3.2851x+38.0344,相关系数(r2)分别为0.9958和0.9986,扩增效率分别为103%和97%;批内、批间重复性测定的变异系数分别为小于1.4%和10%。     

肉鸡肾肿原因与控制

<正>1肾肿发生原因1.1饲料因素1.1.1蛋白质含量过高。饲料中的蛋白含量过高,超出肉鸡生长和生产的需要,多余的蛋白质会分解为尿酸,血浆中的尿酸含量增高,超出肾脏排泄能力时就会     

γ-氨基丁酸的生理功能对畜禽的影响

<正>γ-氨基丁酸(GABA)又称氨酪酸,广泛分布于动物和植物体内。Florey研究小组(1950)在哺乳类动物脑萃取液中首次发现GABA,随后在许多植物体也有发现。由于GABA不参与组成蛋白质,因此被称为非蛋白氨基酸。     

一种快速的水稻不同组织总蛋白提取方法

介绍一种简单快捷的水稻不同组织总蛋白提取方法。该方法采用预冷甲醇和丙酮依次洗涤去除杂质和次生代谢干扰物,同时在甲醇洗涤步骤中加入蛋白酶抑制剂混合液,能够最大限度地包含所有蛋白质并降低蛋白酶的降解作用,提高蛋白质的质量和产量。采用该方法从水稻的根、茎、叶及发育中的种子中提取粗蛋白,产量为20～99mg·g-1FW,提取蛋白整个过程耗时1.6h。以SDS-PAGE胶及Western Blot检测所提总蛋白的质量,分别用核蛋白、胞浆蛋白、膜蛋白以及淀粉结合型蛋白等不同类型蛋白抗体进行Western Blot检验。结果显示采用该方法所分离的总蛋白质量可以满足水稻不同类型蛋白对Western Blot的质量要求。     

威远三夏时节田间地头忙测产

<正>又是一季三夏时节,威远农资集团三夏大型测产活动在冀南的临西县拉开序幕。活动邀请推广研究员柴同海带队,各县农技推广、植保部门参与。柴同海研究员带领临西等县的农业技术人员一行6人来到单屯村刘国轩的根力多示范田,不但大家常见的病害发生数量显著减少,而且麦秆粗壮,叶色依然浓绿呈强势灌浆态势,麦穗齐整,麦芒被灌浆成圆鼓的麦粒     

双截式脱酚棉籽蛋白加工工艺的特点及生产控制

介绍了双截式脱酚棉籽蛋白加工工艺与传统棉粕加工工艺及产品的区别,双截式脱酚工艺的特点和生产控制要求等。     

人呼吸道合胞病毒的研究与防治进展

人呼吸道合胞病毒是全世界婴幼儿下呼吸道感染最常见的病原体,导致每年超过300万人住院和20万以上的人死亡,给全球带来了非常严重的经济和社会负担。目前,尚不存在防治RSV的疫苗,也没有特异性强、安全性高的抗RSV药物。对HRSV的结构、流行病学特征以及疾病模型构建方面的研究进展进行综述,并对已有的检测和治疗方法进行总结,旨在为今后开发抗HRSV的药物提供全面的参考信息。