花刺参钙调蛋白cDNA克隆及组织分布

钙调蛋白（ calmodulin,CaM）是一种钙离子（ Ca2＋）结合蛋白,在钙信号传导过程中起重要作用。文章扩增到花刺参（Stichopus monotuberculatus）钙调蛋白（命名为StmCaM）cDNA全长序列。StmCaM cDNA全长1394 bp,其中5＇UTR长138 bp,3＇UTR长806 bp,ORF为450 bp。ORF推导出的StmCaM含149个氨基酸（包含起始蛋白酸）,其预测分子量约为16.7 kDa,理论等电点为4.1。StmCaM氨基酸序列与其他物种的钙调蛋白高度相似,相似度百分比为95.9%~98.0%。采用realtime PCR分析StmCaM基因在花刺参不同组织中的表达,结果显示其在呼吸树中表达量最高,体腔细胞、肠次之,而体壁中表达量最低,几乎检测不到。     

鱼类金属硫蛋白基因的表达与调控

金属硫蛋白(Metallothionein,MT)是一类能选择性地结合重金属离子的低分子量蛋白质。自Marafante及其同事于1970年证明MT在真骨鱼类中的存在以来,人们就对MT在动物体内和体外的作用和功能进行了广泛的研究。Dunn等(1987)对鱼类MT的研究表明,这类蛋白质长度极为均一,由60~61个氨     

鲢鱼鳞片胶原蛋白的提取

利用酸和酶提取法,从淡水鲢鱼鳞片中提取酸溶性和酶溶性胶原蛋白.经紫外光谱分析显示,所提取的胶原蛋白与I型胶原蛋白标准品接近.氨基酸组成分析表明,ASC和PSC是典型的Ⅰ型胶原蛋白.     

水产养殖中硒的应用及其检测技术

硒是人和动物体内必需的微量元素,在生产生活中应用广泛,很多研究人员对此进行了深入研究。但是硒在水产养殖中的应用国内起步较晚。目前认为生物体内发挥生理功能的硒形态主要是以硒半胱氨酸为活性中心的硒蛋白,作为谷胱甘肽过氧化物酶（GSH—Vx）和含硒转移核糖核酸（Se—tRNA）的组成成分。     

青鳞鱼鱼肉提取物在加热过程中的性质研究

本文以青鳞鱼鱼肉为原料,采有冷水法和酶水解法制备提取物并对其在加热过程中的性质进行了研究。结果表明：①青鳞鱼鱼肉蛋白含量为68．3-71％且水溶性蛋白与水不溶性蛋白之比约为2：9;②酶水解法提取物非蛋白氮约为其总氮的50％．而冷水法提取物则为41．5％;③酶水解法提取物在50℃、60℃、70℃、80℃和90℃的温度条件下加热2h后．颜色明显加深,同时产生大量的呈香物质。但常规成分基本无变化;而冷水法提取物在同样的温度条件下,其颜色、滋味等感官特性变化不明显,但常规成分变化却明显;④提取物水溶性蛋白的变性温度为60—70℃,70—90℃时提取物总氮大部分是非蛋白氮。青鳞鱼提取物在加热过程中的这些性质为其加工和利用提供了重要的理论依据。     

不同pH条件下罗非鱼肌肉蛋白分离效果及其功能特性的研究

利用pH调节法制备罗非鱼分离鱼蛋白.在临界pH条件下对罗非鱼肌肉蛋白进行处理得到肌肉溶解蛋白(Solution Muscle Protein,SMP),再利用等电点沉淀法对罗非鱼肌肉溶解蛋白进行分离得到肌肉分离蛋白(Isolated Muscle Protein,IMP),考查SMP的溶解率、黏度及IMP凝胶制品和常规中性漂洗(Conventional Wash)处理得到的蛋白凝胶制品的凝胶强度.以罗非鱼肌肉蛋白质在不同pH下的处理、转谷酰胺酶、食盐及凝胶化温度为因素,凝胶强度为目标参数进行正交试验设计.结果表明,与常规中性漂洗法相比, pH调节法制备的罗非鱼分离鱼蛋白具有回收效果好、功能性强的特点.     

甘露糖—小清蛋白美拉德反应产物的免疫活性

为探讨以甘露糖为还原糖进行美拉德反应对小清蛋白免疫活性的影响,通过将鲢重组小清蛋白(r PV)和甘露糖混合物在干热条件下(100°C)反应100 min制得糖化的r PV(Mr PV),采用Tricine-SDS-PAGE和斑点杂交(Dot-blotting)分析糖化前后r PV的聚合特性、免疫活性及消化稳定性的变化;采用圆二色谱仪和扫描电子显微镜分析糖化对r PV的二级结构及微观结构的影响。结果显示,r PV糖化后形成大分子量的片状聚集体;甘露糖糖化修饰的r PV免疫活性及消化稳定性均显著下降;美拉德反应导致r PV二级结构中的α-螺旋和无规则卷曲的含量有一定程度的减少,而β-折叠的含量显著增加。研究表明,以甘露糖为还原糖进行美拉德反应可有效降低r PV的免疫活性及消化稳定性,这可能与糖化后r PV聚集体的形成及二级结构的改变有关。     

拟态弧菌的绿色荧光蛋白标记及其在感染草鱼体内的动态分布

为了示踪研究拟态弧菌感染草鱼的动态过程,将增强型绿色荧光蛋白编码基因EGFP克隆至质粒pBAD24,并转化到拟态弧菌04-14菌株构建荧光标记重组菌.重组菌经阿拉伯糖诱导后,能高效表达EGFP蛋白;荧光显微镜观察和流式细胞仪检测均发现重组菌能够发出明显的绿色荧光信号,且传至30代后质粒稳定率仍为100％;生物学特性检测结果显示,与野生株相比,重组菌的形态、生长特性和细胞黏附性均未发生明显改变.用标记重组菌浸泡感染草鱼,定点采集鳃、肠道、肌肉、头肾、脾脏和肝脏,借助荧光信号检测4d内细菌在不同组织脏器中的动态分布.结果发现感染4h后即可在肠道和鳃中检测到绿色荧光信号,标记菌检出量分别为3.60×108和2.36×106 CFU/g,直至10 h,其含量无明显变化,12 h后含菌量逐渐下降,但持续存在直至鱼死亡.标记菌在肌肉、头肾、脾脏和肝脏中呈现相似的动力学,感染24 h后才检测到荧光信号,24～ 85 h时间段含菌量呈现先增加后下降的变化,48 h达到峰值,检出量分别为9.58×104(肌肉)、8.75×104(头肾)、1.50×104(脾脏)和4.50×104 CFU/g(肝脏),但均低于肠道中的检出量,结果表明肠道是拟态弧菌黏附定植与繁殖的主要靶器官.     

冬季不同海区拟穴青蟹可溶蛋白和糖含量比较

采用生物化学方法测定了福建厦门海区和浙江宁海海区冬季拟穴青蟹鳃、肝胰腺和肌肉中可溶性蛋白和可溶性糖的含量.结果显示,厦门海区拟穴青蟹冬季可溶性蛋白含量在鳃(4.02 mg/ml)、肝胰腺(3.12 mg/ml)和肌肉(4.35 mg/ml)中显著高于宁海海区拟穴青蟹鳃(2.49 mg/ml)、肝胰腺(2.22 mg/m...     

凡纳滨对虾28.5D血蓝蛋白的降解新片段

血蓝蛋白是一种具有多种非特异性免疫学活性且可以产生免疫学活性降解片段的多功能蛋白。为了探索血蓝蛋白新的降解片段,本研究以凡纳滨对虾旺itopenaeus vannamei）为研究对象,采用比较蛋白质学技术分析对虾感染病原菌后血清蛋白质组的变化。结果发现,对虾感染副溶血弧菌（Hbrio parahaemolyticus）12h后,血清中新增一种28．5kD的蛋白（命名为p28．5）。经MALDI-TOF／MS分析,其与凡纳滨对虾血蓝蛋白75kD亚基具有高度同源性。进一步研究显示,p28．5蛋白不仅可与抗血蓝蛋白抗体发生特异性结合,而且还与对虾抗感染能力呈正相关。由此推测,p28．5蛋白应该是对虾感染病原菌后产生的一种28．5kD血蓝蛋白降解新片段,其可能是血蓝蛋白发挥免疫学功能的一种新方式的产物。[中国水产科学,2008,15（3）：425-430]