桂牧1号象草营养价值评定及PEG对其产气量的影响

用体外产气法测定了桂牧1号象草不同月份、不同高度的产气量及添加聚乙二醇（PEG）对产气量的影响。结果显示：（1）桂牧1号象草各月份的干物质含量比较为：11月〉10月〉9月〉4月。其中，1．0m左右及1．0m以上的象草的干物质含量明显较高（P〈0．01）。（2）在体外产气法实验中添加PEG能显著增加样品12h和24h的产气量（P〈0．01），证明象草中所含有的抗营养因子对黑山羊瘤胃微生物活动有一定的制约作用。（3）9、11月份象草的最佳刈割高度应为1．5m左右，4、10月份象草的最佳刈割高度应为1．0m左右。（4）4月、9月份的象草，添加PEG后产气量提高率较高。利用此时期的象草喂食黑山羊时，适当做PEG处理可以提高象草的饲用价值。     

猪RBP1和RBP4基因的定位、组织表达谱分析、多态研究及相关分析

类维生素A（维生素A及其代谢产物）在动物的视觉、生长、繁殖、细胞的分化及胚胎发育等方面起重要的作用。利用猪的辐射杂种克隆板，将猪细胞视黄醇结合蛋白基因1（RBP1）和猪血浆视黄醇结合蛋白基因4（RBP4）分别定位在猪13号和14号染色体上。利用半定量RT－PCR方法，对这两个基因在成年五指山猪十二种不同组织（肺、骨骼肌、脾、心脏、胃、大肠、淋巴结、小肠、肝、大脑、肾、脂肪）的组织表达谱进行了分析。在猪的血浆视黄醇结合蛋白基因4中，发现一个单核苷酸多态位点（RBP4-A/G156），并用基于聚合酶链式反应的限制性片段长度多态性方法(PCR-RFLP)，对这一多态在莱芜黑猪、五指山小型猪、贵州小型猪、广西巴马小型猪和通城实验猪群中的分布进行了研究。在通城实验猪群中，进行了不同基因型与性状间的关联分析，发现其不同的基因型与胴体直长、胴体斜长、血红蛋白浓度、平均血细胞血红蛋白量、达上市体重日龄高度相关。在猪的生产和育种中，这一多态位点可能会成为有用的分子标记。     

十字花科植物CYP86MF同源基因的克隆及特征分析

用保守的特异引物进行PCR扩增，并结合RACE技术，从大白菜(Brassicacampestris L．)品种黄芽14，萝卜(Raphanus sativus L．)品种圆白和诸葛菜(Orychophrogmus violaceus)3个材料中扩增到3个完整的cDNA全长，分别命名为Bc-CYP86MF，RsCYP86MF和OvCYP86MF，它们的cDNA全长分别为1854，1818和1876bp，分别编码524，526和534个氨基酸残基。将所推导的氨基酸序列与数据库中已知基因进行排序，发现它们与拟南芥CYP86家族所有成员的氨基酸相似性都大于38％，可将它们归为细胞色素CYP86基因家族。BcCYP86MF和RsCYP86MF与CYP86C4亚家族氨基酸同源性均大于55％，则可归为CYP86C4亚家族，而OvCYP86MF与CYP86C3的同源性最高，为86．5％，应归为CYP86C3亚家族。根据氨基酸序列的排序结果构建的系统树表明，CYP450基因的氨基酸序列进化程度与物种的亲缘关系的远近相吻合。对蛋白二级结构预测结果发现，它们都具有细胞色素P450典型的保守结构域FNAGPRLCIG，而且氨基酸组成也很相似。     

猪圆环病毒2型BF株ORF2基因在大肠杆菌中的表达

采用PCR从构建的猪圆环病毒2型／(PCV2)ORF2重组质粒(pGEM-T-ORF2）中扩增出大小为593bp的ORb2基因，克隆到表达载体pET-32a，经异丙基硫代半乳糖苷诱导，成功表达了ORF2基因编码的结构蛋白。表达的重组蛋白为融合蛋白，分子量40kD，表达量20％左右。经Western blot检测，重组蛋白可被PCV2阳性血清识别。     

苜蓿花叶病毒外壳蛋白基因在白三叶中的表达及转基因植株的抗病性分析

以白三叶(Trifolium repens L.)的两个品种Irrigation和Huia的子叶为转化体，用根癌农杆菌(Agrobacterium tumefaciens)介导法将外源的苜蓿花叶病毒外壳蛋白基因转入白三叶，经过筛选、分化和再生，得到了具有卡拉霉素抗性的再生植株。对这些植株进行PCR、Southern和Northern分析，结果表明，外源目的基因已经整合到白三叶基因组中并且得到了表达。对Northern分析呈阳性的植株进行了抗病性检测，证明表达苜蓿花叶病毒外壳蛋白基因的植株病症减轻，发病率、病情指数及病毒积累量都明显低于对照，有的甚至不表现症状，达到了免疫的程度。     

猪5-HT4b受体基因cDNA克隆和序列分析

利用RT—PCR技术克隆了猪5-HT4bR基因的核苷酸序列，并利用生物信息学手段进行了验证。核苷酸序列测定与分析表明，该基因片段全长1209bp且包含一个完整的开放阅读框，编码402个氨基酸。该序列已在GenBank登录（Accession No．AY566638）。序列分析结果表明，该基因与已报道的人、鼠等5种动物5-HT4bR基因具有较高的核酸序列和氨基酸序列同源性，分别为92．56％和93．63％。该基因编码的蛋白具有7次跨膜结构，属于G蛋白偶联受体超家族。     

利用免疫共沉淀技术研究RSV CP、SP和NSvc4三个蛋白的互作情况

为了检测水稻条纹病毒(Rice stripe virus, RSV)CP、SP和NSvc4蛋白自身和两两之间的互作关系,首先通过PCR扩增获得了分别融合有HA或c-Myc标签的RSV CP、SP和NSvc4基因,并将其插入到植物表达载体pEGAD或pKYLX71:35S2中。重组质粒转化农杆菌EHA105后,将含有不同重组质粒的农杆菌菌液混合后注射烟草(Nicotiana benthamiana)叶片。提取烟草中瞬时表达的蛋白,以HA抗体或c-Myc抗体进行免疫共沉淀实验,最后免疫混合物通过c-Myc抗体或HA抗体进行Western blot检测,确定蛋白的互作情况。结果表明,RSV CP蛋白自身能够发生互作,而CP与SP,CP与NSvc4,SP与SP,SP与NSvc4,及NSvc4与NSvc4蛋白之间均未有检测到互作现象。     

叶蛋白提取与应用的研究进展

叶蛋白是从绿色植物的茎叶中提取得到的一种功能性蛋白质,其粗蛋白质含量一般可达30%～60%。随着经济与科技的发展,人类营养和动物营养逐渐得到调整完善。叶蛋白作为蛋白质的良好来源,在人类蛋白质营养补充和蛋白源饲料开发中具很大的发展前景。本文根据国内外相关研究资料,概述了叶蛋白的营养价值,对目前叶蛋白常用的提取技术进行了综述和讨论,并展望了叶蛋白的应用前景,以期为未来新型叶蛋白产品开发奠定理论基础。     

两种日粮组成对妊娠后期母驴体重增加、血液生化指标及生殖激素影响的研究

本试验旨在研究在能量水平相近条件下,两种不同蛋白质水平的日粮对妊娠后期疆岳母驴体重、血液相关生化指标及生长激素的影响,为妊娠后期母驴的科学饲养管理提供参考依据。选择年龄4～6岁、胎次1～2胎、平均体重相近、健康的妊娠后期疆岳母驴60头,随机分为2组,每组30头,分别为日粮Ⅰ组和日粮Ⅱ组。在相同的饲养管理条件下,日粮Ⅰ组、Ⅱ组妊娠后期母驴分别饲喂蛋白水平为3.87%、10.95%的日粮,进行为期90 d的饲养试验。试验结果显示：（1）日粮Ⅱ组妊娠后期母驴总增重和日增重分别比日粮Ⅰ组显著提高了155.42%和157.69%(P <0.05);(2)日粮Ⅱ组妊娠后期母驴血浆中总蛋白和白蛋白含量分别比日粮Ⅰ组显著提高了24.62%和25.76%(P <0.05),尿素氮的含量显著降低了27.50%(P <0.05);葡萄糖和甘油三脂的浓度分别比日粮Ⅰ组显著提高了5.82%和6.90%(P <0.05);(3)日粮Ⅱ组妊娠后期母驴血浆中雌二醇、孕酮、促黄体素、促卵泡素以及促性腺激素释放激素分别比日粮Ⅰ组提高了5.09%、1.50%、2.99%、45.85%和13.66%,...     

FMDV OA/58病毒株VP1蛋白结构构建与B细胞抗原表位的预测

以口蹄疫病毒株OA/58 RNA为模板,反转录并扩增目的cDNA,然后与pGEM-T easy载体连接并转化JM109菌株,提取的重组质粒用凝胶电泳、PCR和EcoR Ⅰ酶切法鉴定.运用同源模建得到OA/58 VP1蛋白3D结构,并结合理化性质、亲水性、可塑性和免疫原性进行分析,预测OA/58 VP1的抗原表位.结果 OA/58 VP1存在多个潜在的抗原表位位点,可能的蛋白质抗原表位区域:2～11,15～35,38～50,77～88,90～107,121～125,131～135,140～149,154～163,169～175,178～189,197～213.应用同源模建得到的OA/58 VP1蛋白3D模型来预测其B细胞表位,为进一步研究OA/58 VP1功能,构建突变体和选择表达新型OA/58 VP1蛋白分子提供有参考价值的信息.