牛肉肌纤维类型差异及成熟过程中组织蛋白酶活性研究

为考察不同部位牛肉肌纤维类型的差异、比较两种肌纤维分型方法、研究肌纤维类型对宰后成熟过程中组织蛋白酶活性的影响,选取新疆褐牛冈下肌、菱形肌、背最长肌、背阔肌、腰大肌、股二头肌、半腱肌、腓肠肌共8个部位的牛肉,分别用ATPase染色法和RT-PCR法检测肌纤维类型组成和MyHC基因相对表达量,用Image-Pro Plus6.0软件分析ATPase染色图像,计算各类型肌纤维的面积和直径,并检测各部位牛肉宰后成熟0、3、7、9、11、14 d时组织蛋白酶B、L、H活性。结果表明:新疆褐牛不同部位肉的肌纤维类型组成不同,两种肌纤维类型的分型方法在确定Ⅰ型肌纤维数量时呈极显著相关,在8个部位牛肉中,均没有发现MyHCⅡb型基因的表达,ATPase染色法确定的ⅡB型肌纤维数量百分比与RT-PCR法确定的MyHCⅡx型基因表达百分比呈显著正相关,与MyHCⅡa型基因表达百分比呈极显著负相关。两种确定肌纤维类型的方法存在一定的相关性,ATPase染色法确定的ⅡB型肌纤维可能与RT-PCR法确定的MyHCⅡx基因相对应。在宰后成熟过程中,各部位牛肉组织蛋白酶活性基本表现为先升高、后降低的趋势,不同部位的牛肉达到活性最大值的时间不同;组织蛋白酶H活性非常低,相比于组织蛋白酶B和L,其在宰后成熟中的作用可以忽略不计,组织蛋白酶L活性是B活性的2.5～4倍,在宰后成熟中起更重要的作用。Ⅰ型肌纤维数量与宰后9、11 d组织蛋白酶B和L活性呈显著甚至极显著正相关关系,在新疆褐牛各部位肉中含有的Ⅰ型肌纤维越多,组织蛋白酶活性越高,越有利于牛肉宰后成熟嫩化。     

玉米蛋白粉预处理及碱性蛋白酶水解的研究

玉米蛋白粉是玉米湿法制取淀粉的副产物,本试验将玉米蛋白粉经无水乙醇及高温预处理后,进行了碱性蛋白酶最佳降解条件的单因素及正交试验的研究,结果表明:水解最佳条件为底物浓度10%、酶浓度(E/S)4.0%、水解时间2h、温度55℃,在pH值为9.5～10条件下,水解度甲醛滴定法蛋白水解度为17.9%,而用pH-Start法计算水解度为34.9%。     

如何正确使用酶制剂

酶具有蛋白质的一切理化性质，凡能引起蛋白质变性的因素都可能使酶失活，因此必须对影响酶促反应的主要因素有充分而准确的认识。 1温度温度对酶的影响是两方面的：（ 1）提高温度可加速催化反应。一般而言，温度每提高 10℃，反应速度相应地增加 1～ 2倍；（ 2）当温度升高到一定值后，酶活性下降。在较高的温度下，酶的变性和酶反应的速度将一样快，而且此种变性是不可逆的。酶在低温下催化反应速度很慢，所以一般可以用低温冷藏技术来保存酶制剂。在实际生产过程中，酶制剂的作用温度是根据酶的最适温度及最佳经济效益的统一来确定的。…     

等电点电泳证实日本野生大豆中的一个Kunitz型胰蛋白酶抑制剂新变异

电泳测定了日本２５个县２２４个野生大豆的种胰蛋白酶抑制剂（ＳＫＴＩ）变异性。利用等电点电泳证实一个新的ＳＫＴＩ变异体,它比典型Ｔｉａ,Ｔｉｂ和Ｔｉｃ类型具有较高的等电点。这个变异体收集于日本的三重县津市的一个群体。经过两年的种植和比较测定表明它具有遗传稳定性,证明是一个新的遗传变异体。     

硫代硫酸铵对土壤硝化作用的影响

本研究通过室内土壤培养试验，研究了石油化工副产品硫代硫酸铵（ＡＴＳ）对土壤硝化作用的影响。研究结果表明，ＡＴＳ对土壤硝化作用有着明显的抑制作用。当ＡＴＳ用量达２５０μｇ／ｇ土时，培养１４天后抑制率仍可达８２％；ＳＴＳ在效地抑制了由铵经生物氧化作用生成硝态氮的反应，这种反应是由硫代 硫酸根及其氧化产物共同作用产生的。     

基质金属蛋白酶-2在胃癌中的表达及其对癌微血管生成和转移的影响

目的：观察胃癌组织中基质金属蛋白酶2(MMP-2)的表达及其对癌微血管生成和转移的影响。方法：应用免疫组化S-P法检测87例胃癌组织中MMP-2的表达和微血管密度(MVD)。结果：胃癌组织MMP-2阳性表达率为59．8％(52／87)。MMP-2的阳性表达与胃腺癌患者的淋巴结转移与临床病理分期关系密切。结论：MMP-2与胃腺癌新生血管的形成及转移密切相关,是判断胃癌转移有价值的指标。     

基质金属蛋白酶-7的基因克隆和原核表达

研究构建人基质金属蛋白酶7(MMP-7)的原核表达载体,并进行原核表达获得重组蛋白MMP-7。以人肾肿瘤组织总RNA为模板,PCR方法获得MMP-7成熟蛋白的基因序列,构建含10xhis标签的原核表达载体,转化大肠杆菌BL21(DE3),并经异丙基-β-D-硫代吡喃半乳糖苷(IPTG)诱导表达,获得重组蛋白,并经十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE),检测其表达情况。最终得到pET24a(+)-MMP-7-10his重组质粒,诱导表达后重组蛋白占总蛋白的41%左右,获得21.2kD大小蛋白,与目的蛋白大小一致,纯度大于90%,为进一步研究奠定基础。     

翘嘴鲌消化酶特性的研究

取翘嘴鱼白的前、中、后肠和肝胰脏,分别用福林—酚法、淀粉—碘显色法和聚乙烯醇橄榄油乳化液水解法测定了肠道和肝胰脏的蛋白酶、淀粉酶和脂肪酶比活力,同时研究了不同温度(20,25,30,35,40,45,50,55℃)、不同pH值(5.6,6.0,6.4,6.8,7.0,7.2,7.6,8.0)对其消化酶比活力的影响。结果表明:翘嘴鱼白肠道消化酶比活力显著高于肝胰脏(P<0.05)。前肠、中肠和后肠的蛋白酶、淀粉酶、脂肪酶的比活力差异不显著(P>0.05)。前肠、中肠、后肠及肝胰脏的蛋白酶适宜的pH值分别为6.8~7.2,6.8~7.2,6.8~7.0,6.8~7.0;淀粉酶适宜的pH值分别为6.4~7.6,7.0~7.2,7.0~7.2,6.0~7.0;脂肪酶适宜的pH值分别为7.0~7.6,6.8~7.2,6.8~7.6,7.2。前肠、中肠、后肠及肝胰脏的蛋白酶适宜的温度分别为35~45,35~45,35~45,30~40℃;淀粉酶适宜的温度分别为30~40,35~40,40~45,30~45℃;脂肪酶适宜的温度分别为40~45,35~45,30~50,35℃。     

甘薯抗蔓割病生理生化机制的研究

抗性不同的甘薯品种以苗茎剪口接种蔓割病菌后第4天，6天，8天，10天，12天，分别测定叶片中游离氨基酸，可溶性蛋白含量变化及蛋代谢相关酶的活性变化。结果表明：接菌后，抗蔓割病品种金山57叶片中蛋白酶活性降低，氨基酸含量下降，而感病品种岩薯8－6的蛋白酶活性升高，游离氨基酸上升。同时，抗病品种可溶性蛋白含量显著高于感病品种，说明叶片中可溶性蛋白与甘薯抗病性有一定关系；随着接菌时间的延长，抗病品种的NR逐步上升，感病品种的NR活性降低，说明蔓剂病导致甘薯氮代谢发生变化，可作为筛选抗病品种的辅助指标。     

化学抑制剂对晚香玉叶宽的影响

采用四因素五水平的二次回归正交旋转组合设计，通过不同浓度、不同组合的PP333、乙烯剂、缩节胺和矮壮素处理与植株叶宽建立了关系模型，并通过对模型的解析确定了各因素、处理组合与植株矮化的关系。结果表明，PP333效果最显著，它也是影响植株叶宽的最重要、最直接的因素。其它3种药剂对晚香玉矮化的影响次之。此外，PP333和乙烯利对晚香主的矮化有互作效应，当两因素为高水平时，使叶片变宽，增强了对植株的矮化作用。晚香玉矮化的最佳处理组合是PP333 157－174mg/L，乙烯利300－338mg/L，缩节胺32－55mg/L，矮壮素221－272mg/L。