禽胰多肽对肉鸡肝脏和小肠组织中APPR mRNA表达量影响的研究

本试验旨在研究禽胰多肽(APP)对肉鸡肝脏和小肠组织中APPR mRNA表达量的影响.试验以APP粗提液及层析APP制品为材料,选取90只1周龄艾维菌肉鸡随机分为5组,每组3个重复,每个重复6只鸡.Ⅰ设为对照组,Ⅱ、Ⅲ设为饲饮组,Ⅳ、Ⅴ设为注射组.在第7周末,屠宰取其肝脏、小肠组织,运用SYBR Geen Ⅰ实时荧光定量PCR(RT-PCR)法对肝脏和小肠中APPR mRNA的表达进行相对定量分析.结果发现:注射组与饲饮组肝脏及小肠中APPR mRNA的表达水平与对照组相比均呈下降趋势,且注射组降低程度大于饲饮组降低程度;其中,注射组与饲饮组中均是层析APP制品比APP粗提液的下降较明显.提示在外加APP情况下可对APPR mRNA的表达呈现抑制作用.本研究结果为进一步探讨APP与其受体之间的关系,从而为阐明其生理功能和作用机制提供一定的理论依据.     

猪无名高热病的防治

前一阶段胶南市发生以体温升高为特征的猪高热病,给该市的生猪生产造成了一定的损失,严重影响了全市养猪业的健康发展.通过对20例临床病例的病料进行PCR检测,蓝耳病阳性率100%(20/20),圆环病毒病阳性率40%(8/20),伪狂犬阳性率40%(8/20),非典型性猪瘟阳性率10%(2/20),附红细胞体阳性率90%(18/20),猪流感及猪传染性胸膜肺炎均为阴性,分离到猪大肠杆菌、葡萄球菌两例.均为混合感染,最少3种,多者5种.现将本市发生猪无名高热病及防治措施综述如下:     

农业部成功研制出猪感染甲型H1N1病毒检测试剂盒

为切实做好生猪疫情防控工作，中国农业部及时组织专家开展联合攻关，5月2日已成功研制出猪感染甲型H1N1病毒RT—PCR检测试剂盒，可在5小时内完成猪感染甲型H1N1病毒快速检测。     

单抗酶联试剂盒与PCR方法快速检测沙门氏菌的比较

本文对单抗酶联试剂盒与PCR方法快速检测沙门氏菌进行了比较。将沙门氏菌与大肠杆菌以不同比例混合后 ,分别用ELISA和PCR法检测 ,在 1∶1 0 0的比例时 ,用这 2种方法均能检测出阳性样品 ;在 1∶1 0 0 0的比例时 ,用ELISA法检测为阴性 ,而用PCR法则能检测出。检测鲜牛奶、龙虾、虾仁、熟食制品等样品 ,2种方法的符合率达 97 6 %。对冻虾仁、人粪便样品的前增菌、选择性增菌、后增菌过程进行同步检测 ,在样品的前增菌液 ,直接ELISA法检测的OD值小于 0 5 ,而PCR法扩增能出现特异条带 ,经国标方法验证为阳性 ,证实PCR法的敏感性优于直接ELISA法 ,而在选择性增菌液和M 肉汤后增菌液中 ,2种方法均能检出阳性样品。     

JEV、PPV、PRRSV、PRV多联PCR的应用研究

用 JEV、PRRSV二联 PCR,PPV、PRV二联 PCR以及这 4种病毒 4联 PCR对来自内蒙、广州、广西、天津、北京、吉林病料进行检测 ,共检了 1 4 6份病料。其中 PRRSV阳性 7份 ,PPV阳性 1 2份 ,PRV阳性 2 1份 ,PRV和 PPV混合感染 4份。并对 5份人工接种 JEV小鼠病料检测 ,其中 4份为阳性。随后对部分阳性 PCR扩增产物进行点杂交和核苷酸测序鉴定 ,证实了 PCR扩增准确性。对内蒙 PRRSV阳性扩增带测序结果显示 ,我国流行 PRRSV为美洲型 ,在扩增片段的核苷酸序列上有 3个碱基差异     

应用生物素标记的NDV－cDNA探针检测感染尿囊液中NDV－RNA的初步研究

本文应用聚合酶链反应（ＰＣＲ）技术从构建的新城疫病毒（ＮＤＶ）ｃＤＮＡ文库中扩增含编码Ｆ糖蛋白前体──Ｆｏ酶切位点序列的３５９ｂｐ的Ｆ蛋白基因ｃＤＮＡ片段。将此３５９ｂｐｃＤＮＡ片段经光敏生物素标记后,即成ＮＤＶ－ｃＤＮＡ探针。该探针能特异性地从感染的尿囊液中检测出ＮＤＶ强毒株和疫苗毒株的基因组ＲＮＡ,而不与ＩＢＤｖ－ｄｓＲＮＡ、ＡＩＢｖ－ｓｓＲＮＡ、ＥＤＳ７６－ｄｓＤＮＡ、ＭＤＶ－ｄｓＤＮＡ,ＦＰＶ－ｄｓＲＮＡ及ＡＩＬＶ－ｄｓＤＮＡ发生交叉杂交反应。试验结果表明：尽管该探钎含有编码Ｆｏ蛋白酶切位点序列的碱基顺序,但它还是不能把ＮＤＶ的强、弱毒株区分开。这说明ＮＤＶ强、弱毒株比区域内的碱基存在着相当大的同源性。不过,此探针对ＮＤＶ来说具有特异性,这就为ＮＤＶ的诊断技术开创了基因水平检测的新途径。     

猪链球菌快检法通过鉴定

一种只需4小时即可知道结果的猪链球菌病2型的检测方法——猪链球菌多重PCR检测法，在京通过专家鉴定。这标志着我国已经掌握猪链球菌的快速检测方法。该方法把检测时间由原来的4天减少到4个小时，它由中国检验检疫科学研究院和江苏检验检疫局联合攻关研制。     

荧光PCR快速诊断一起新城疫

2005年1月底．广东省某规模养殖场的鸡出现了张口喘气、呼吸困难，有呼噜声、咳嗽，排黄绿色粪便等症状．部分鸡还有神经症状。发病约450只．发病率为1．2％。三天后鸡只陆续出现死亡．两天内死亡50只左右。解剖病死鸡，可见：喉头、气管粘膜明显出血，小肠轻度炎症。回肠、直肠、泄殖腔粘膜出血。临床无法确诊。经实验室快速诊断．为新城疫感染。     

乳牛布鲁氏菌病病原DNA快速检测技术的研究

在国内首次建立了乳牛原乳中布鲁氏菌外膜蛋白(OMP)25ku基因套式聚合酶链反应(nested—PCR)检测技术。结果显示，本方法的特异性好，只能扩增布鲁氏菌DNA，而不能扩增同样能引起乳牛流产的鹦鹉热衣原体、弓形虫、胎儿弯杆菌DNA；乳样的检测灵敏度达50CFU／mL，重复试验35次，可重复性和稳定性均十分理想；对4批331头凝集试验阳性(24份)或阴性(307份)乳牛的乳样用本方法检测，符合率为100％。在48h内即可获得诊断结果。本方法同样可用于血液或其他流产病料中布鲁氏菌DNA的检测。     

安徽省鸡免疫抑制性疾病的流行病学调查

采集了安徽省6个主要养鸡地区65群鸡的185只病鸡共986份组织样品，对可引起免疫抑制性疾病的5种最常见病毒进行了PCR检测。结果，传染性腔上囊病病毒（IBDV）、鸡传染性贫血病毒（CIAV）、马立克氏病病毒（MDV）、禽白血病病毒（ALV）和网状内皮增生症病毒（REV）的群阳性率和个体阳性率分别为73．08％和40．91％、46．15％和25．95％、41．54％和17．84％、18．46％和7．57％、13．85％和4．86％，其中被检鸡之二重或多重混合感染的总阳性率为24．33％。调查结果证实，免疫抑制性疾病在安徽省的商业鸡群中普遍存在，并与鸡群疾病多而复杂、损失大相关。