猪瘟荧光抗体的制备及应用

用硫酸铵盐析法从抗猪瘟血清中提取免疫球蛋白，应用搅拌法标记荧光素，硫酸铵盐析、Sephadex G-25层析和肝粉吸收三法结合去除标记物之游离荧光素，制备猪瘟荧光抗体。经测定，标记的荧光抗体工作稀释度为1：16～1：32。用标记的荧光抗体诊断猪瘟，从39份可疑病料中检出阳性病例12份。     

小鼠胚胎冷冻保存试验

应用4～10周令的杂种 CB6/Han 和纯种 C57BL/Han 小鼠73只进行试验,共采胚胎523枚,将发育正常,形态完好的157枚胚胎低温冷冻保存。解冻后回收率为83.4％,其中45％(59枚)形态完好,(囊胚56％,桑椹胚20％)。将其培养24—48小时后,71.2％(42枚)继续发育到扩张囊胚(其中囊胚为76.5％,桑椹胚为37.5％)。应用3′6′—二乙酰基荧光素(FDA)染色进行胚胎质量评定,对胚胎无损害。     

异硫氰酸荧光素标记壳聚糖的研究

[目的]探究FITC和壳聚糖不同物料比对反应产物标记率和特性粘数的影响,并研究2种不同pH值下FITC-Chitosan吸收光谱和荧光光谱的变化。[方法]采用异硫氰酸荧光素对壳聚糖进行荧光标记,考查不同物料比时荧光素与壳聚糖的结合情况、产物的特性粘数以及标记物在pH值1.0、6.0的吸收光谱和荧光光谱。[结果]结果表明,物料比在小于0.5%时,标记物的特性粘数变化较小,适合用于标记壳聚糖;FITC-Chitosan在pH值1.0时可见吸收波长为438 nm,荧光激发波长440 nm,发射波长520 nm;在pH值6.0时可见吸收波长为488 nm,荧光激发波长493 nm,发射波长515 nm。[结论]该研究为FITC-Chitosan获得更深入的关注和更广泛的应用提供了试验依据。     

含荧光素的荧光高分子合成及荧光性质研究

通过把荧光素引入烯类单体后与甲基丙烯酸甲酯共聚合成了含荧光素的荧光高分子 ,并检测了该聚合物在不同溶剂中的荧光性质 ,发现聚合物在乙醇中能产生很强的荧光 .此外 ,还测试了乳酸对聚合物乙醇溶液的荧光猝灭作用 .实验发现 ,该聚合物对乳酸很敏感 .浓度在 1 0 - 1 0 ～ 1 0 - 8mol· L- 1 之间的乳酸都可使聚合物荧光产生显著变化 .依此现象 ,有望研制一种测试动物体内乳酸含量的光化学传感器     

循环农业内涵、理论发展与展望

摘 要：发展循环农业是解决现代农业发展困境的重要举措。为了将循环农业的思想更充分地应用在实际生产中,本文对其概念、内涵进行了梳理。系统地阐述了循环农业的定义、特征、原则与理论基础等,结合国内外循环农业的制度创新和机制研究,分析了循环农业的参与主体、结构层次、技术支撑和法律保障等。研究和运用循环经济理念指导农业生产,发展循环农业,转变增长方式,创新发展模式,实现生态系统的和谐发展,是我国农业发展的必然选择。     

一种荧光素衍生物的表征及活细胞荧光示踪应用

【目的】通过研究荧光素二叔丁基二甲基硅醚(FTBS)的聚集诱导发光效应,将FTBS用于活细胞的长期荧光示踪。【方法】采用荧光素与叔丁基二甲基氯硅烷发生亲核取代,合成荧光素二叔丁基二甲基硅醚;通过测试其荧光发射强度和粒子直径,首次证实其具有聚集诱导发光效应;通过对人宫颈癌细胞株HeLa的染色试验,确定细胞染色时间和浓度。【结果】通过细胞染色,证实FTBS是具有良好细胞通透性的荧光探针,实现基于FTBS的活细胞长期荧光示踪。【结论】基于FTBS的聚集诱导发光效应和良好的细胞通透性,可将其用于对癌细胞及分裂产生的子细胞进行长时间跟踪监测,对于标记癌细胞和监测癌细胞增殖具有一定意义。     

钯(Ⅱ)-盐酸吗啉胍螯合物与卤代荧光素染料相互作用的超瑞利散射光谱及其分析应用研究

在pH=4.4～5.0的HAc-NaAc介质中,钯(Ⅱ)与盐酸吗啉胍(Abob)反应形成螯合阳离子,它能进一步与二溴荧光素(DBF)、曙红Y(EY),赤藓红(Ery)阴离子反应形成离子缔合物,引起超瑞利散射(HRS)显著增强.3个三元体系具有相似的光谱特征,最大HRS波长位于390 nm附近.在一定条件下超瑞利散射增强(△IHRS)与Abob的浓度成正比,其线性范围是0.029～3.0μg/mL(DBF),0.14～3.5μg/mL(EY)和0.23～1.9μg/mL(Ery),检出限分别为0.008 6μg/mL(DBF),0.043 μg/mL(EY)和0.069μg/mL(Ery).研究了HRS法的适宜反应条件和共存物质的影响,发展了高灵敏、简便快速测定Abob的新方法,可用于尿样中Abob的测定.

Abstract：

In an acidic medium with pH = 4.4-5.0, palladium (Ⅱ) chelated with moroxydine hydrochloride to form the cation [ Pd (Abob)]2+ , which reacted further with dibromofluorescein (DBF), eosin Y (EY)and erythrosin(Ery) to form ion-association complexes, respectively. As a result, the hyper Rayleigh scattering(HRS) intensities were enhanced greatly. The maximum HRS peak of the three systems was all located at approximately 390 nm. HRS intensity was proportional to the concentration of moroxydine hydrochloride (Abob) in the range of 0. 029-3.0 μg/mL for DBF, 0. 14-3.5 μg/mL for EY and 0.23-1.9 μg/mL for Ery, and their detection limit (3σ) was 0. 008 6, 0. 043 and 0. 069μg/mL, respectively. The optimum conditions of the reaction and the properties of analytical chemistry were investigated. Therefore, a new method for the determination of moroxydine hydrochloride(Abob) by HRS was developed. The method has high sensitivity and good selectivity and has been applied to the determination of Abob in uric samples with satisfactory results.     

荧光素对烟草种子萌发和幼苗生长的影响

利用荧光素直接包被烟草品种‘MS云烟85’与‘红花大金元’种子,研究其对种子萌发、幼苗生长及保护酶活性等的影响。结果表明：一定比例的荧光素包被对烟草种子的发芽和幼苗生长无不良影响,有提高幼苗根长的效果。在种粉比例为100∶10时,‘MS云烟85’与‘红花大金元’在种子生长指标以及生理指标上,均与对照无显著差异。表明种粉比例100∶10为较好的处理比例。     

丁草胺荧光偏振免疫分析——示踪物的合成与鉴定

【目的】为建立除草剂丁草胺的荧光偏振免疫检测方法,对关键试剂示踪物进行合成与鉴定。【方法】以异硫氰酸荧光素、乙二胺和己二胺为原料,合成了异硫氰酸荧光素乙二胺（EDF）和异硫氰酸荧光素己二胺（HDF）两种中间体,薄层层析法分离出目标产物,电喷雾电离质谱法鉴定;然后将5-氨基荧光素（AF）、EDF、HDF分别与丁草胺半抗原（BMPA）连接,得到3种不同间隔臂的示踪物（BMPA-AF,BMPA-EDF和BMPA-HDF）,利用抗血清稀释曲线测定抗血清效价,竞争抑制曲线测定不同示踪物检测灵敏度。【结果】3种示踪物合成成功,抗血清稀释曲线和竞争抑制曲线显示3种示踪物的抗血清效价分别为1/600、1/1500和1/600,半抑制浓度分别为1 292、433和298 ng•ml-1。【结论】合成出3种不同间隔臂的丁草胺示踪物,对示踪物的性质进行初步研究,为下一步建立丁草胺荧光偏振免疫分析方法奠定了基础。     

瓜类果斑病菌荧光免疫层析试纸条的研制

为建立检测果斑病菌的新型免疫学检测技术,以异硫氰酸荧光素(Fluorescein isothiocyanate,FITC)作为荧光探针,共价偶联抗瓜类果斑病菌野生型菌株SD01的鼠源单克隆抗体4F,将抗SD01单克隆抗体6D和羊抗鼠二抗喷涂于硝酸纤维素膜(NC膜)上分别作为检测线和质控线;以双抗体夹心反应模式制备检测果斑病菌的荧光免疫层析试纸条,并对试纸条的灵敏度、特异性及对实际样品的检测性能进行评估。结果表明:制备的荧光试纸条对纯培养果斑病菌SD01的检出限为3.1×10⁶CFU∕mL;试纸条可检出8种果斑病菌(其中标准株1种,野生株7种),与6株近源的植物病原菌均无交叉反应,表明试纸条具有较高的特异性。在检测实际样品时,8种葫芦科植物的果斑病菌检出限为3.1×10⁶CFU∕mL,表明汁液中的杂质对试纸条的检测灵敏度无影响,该试纸条适用于实际样品的检测。本研究制备的荧光试纸条操作简便、快速,结果肉眼可见,为果斑病菌的快速检测提供了一种新方法。