金银花链翘提取物对大肠杆菌热敏肠毒素的拮抗作用

应用兔回肠结扎试验研究了金银花连翘提取物对大肠杆菌热敏肠毒素致肠分泌的拮抗作用，实验的结果表明，金银花连翘提取物对大肠杆菌致病作用的影响至少涉及到抑菌和对热敏肠毒素的拮抗作用两个方面，且其作用提取物浓度增高而增强。     

大肠杆菌耐热性肠毒素Ⅰ基因核苷酸序列分析与免疫原性研究

对构建的重组质粒ｐＸＳＴ１（含有耐热性肠毒素ＳＴ１和ＬａｃＺ基因）进行核苷酸序列分析的结果表明，该质粒中含有２个正向串联在一起的ＳＴ１基因，且融合在ＬａｃＺ基因的上游，具有正确的阅读框架。免疫学试验结果表明，构建的ＤＨ５α（ｐＸＳＴ１）重组菌株安全无毒。该重组菌株表达的ＳＴ１融合蛋白能够诱发ＢＡＬＢ／ｃ鼠产生抗体，且抗体能中和天然肠毒素ＳＴ１活性，具有较好的免疫保护作用。由此表明，ＤＨ５α（ｐＸＳＴ１）工程菌株可作为预防幼畜腹泻的菌苗候选株     

O149大肠菌株的细菌学检测与肠毒素鉴定

通过流行病学及病原学的调查研究，从患黄痢的新生仔猪分离出13株O149大肠杆菌，采用兔肠结扎试验、平板免疫溶血试验对其产肠毒素性能进行了鉴定，生物学试验和血清学反应的结果表明，O149大肠菌株的被检滤液中存在热敏肠毒素（LT）。     

平板免疫溶血试验快速检测大肠杆菌不耐热肠毒素

琼脂糖为介质，进行固相平板免疫溶血试验测定毒素源性大肠杆菌不同耐热肠毒素（ＬＴ），同时与ＥＬＩＳＡ，兔肠结扎试测定ＬＴ进行了比较。结果表明，平板免疫溶血试验特异性强，标准的ＥＴＥＣ发生溶，非ＥＴＥＣ不发生溶血；灵敏度与ＥＬＩＳＡ相似，比肠结扎试验敏感８倍左右；对１５１份样品的检测说明平板免疫溶血试验与ＥＬＩＳＡ具有很高的符合性。此外对不同来源的红血球用于测定ＬＴ进行了研究。     

CpG-ODN不同免疫途径对仔猪免疫增强效果的研究

以不同途径进行CpG-ODN免疫仔猪后,再以活的肠毒素大肠杆菌为模式病毒对仔猪进行攻毒,观察各组新生仔猪的腹泻情况,并测定血液中特异性抗体的含量、肠道中大肠杆菌数量的变化。结果表明,100μg/kg CpG-ODN+20%苦杏仁苷酶(Em)通过滴鼻免疫后,血液中特异性抗体含量约为对照组的3倍,肠道大肠杆菌数量显著下降,与对照组差异显著,同时腹泻症状明显减轻,仔猪体重增加明显。这显示了CpG-ODN通过滴鼻免疫能够显著提高新生仔猪对肠道病原细菌感染的抵抗能力。     

产肠毒素大肠杆菌多重PCR检测方法的建立

为快速检测和鉴定产肠毒素大肠杆菌(ETEC)菌毛(K88和K99)和毒素(STa)基因,本研究设计合成了针对K88、K99和STa基因的3对特异性引物,对K88、K99和STa基因扩增条件进行优化,建立了检测K88、K99和STa的多重PCR方法.该方法对Kss、K99和STa基因的扩增产物分别为237 bp,314 bp和166 bp;此外,该方法具有良好的灵敏性和特异性.本实验建立的多重PCR方法为致幼畜腹泻ETEC的检测提供了快速准确方法.用所建立的多重PCR方法对实验室分离的23株大肠杆菌进行检测,结果2株为K99/STa阳性,1株为STa阳性.     

杜洛克猪肠毒素大肠杆菌F4ac MUC13基因型与生长性能的关联性分析

猪肠毒素大肠杆菌(ETEC)是引起断乳前后仔猪腹泻的主要致病菌,利用分子检测鉴别MUC13基因型,筛选具有腹泻抗性个体是选育抗腹泻猪的基本方法。但是,抗性个体的纯合对其他生产性能是否具有不利影响?为此,我们在两个猪场分别进行了2年的检测、测定,先后检测了杜洛克仔猪525头,其中ETECF4ac抗性纯合个体(GG)437头、易感杂合个体(GA)75头、易感纯合个体(AA)13头;经生产性能测定,发现达100kg体重日龄分别为181.25±12.01d、182.59±12.25d、182.81±15.14d,达100kg体重校正背膘分别为11.50±2.11mm、11.77±1.53mm和11.86±2.88mm,各组间差异均不显著(P>0.05),说明,杜洛克仔猪抗腹泻的选育对生长速度和背膘厚性能没有影响。     

近年规模猪场新生仔猪腹泻的原因分析和对策

自2010年12月份以来,我国从南到北许多养猪密集区域不同规模的猪场陆续出现新生仔猪严重腹泻、迅速死亡为特征的严重疫情。该疫情的季节性不明显,但冬春季发病率及死亡率极高。有的猪场还反复发生,给养猪业带来重大的经济损失。本文从流行病学、临床表现、实际反馈处理效果、眼     

大肠杆菌不耐热肠毒素的分子生物学及粘膜免疫佐剂效应

大肠杆菌不耐热肠毒素(Heat-Labile,LT)是由产肠毒素大肠杆菌(enterotoxigenicEscherichiacoli,ETEC)分泌的一种外毒素。LT既有较强的免疫原性又有较强的粘膜佐剂效应,其毒力较霍乱毒素(choleratoxin,CT)小而被认为是替代CT的最有潜力的粘膜免疫佐剂。本文从LT的分子结构、分子生物学特性、免疫原性、粘膜佐剂效应及其作用机制以及LT的粘膜免疫佐剂的应用等方面进行了讨论。