利用PCR法从文库中快速克隆人促红细胞生成素基因

本文介绍一种利用ＰＣＲ技术从基因文库中快速克隆基因组ＤＮＡ的方法。含有１０７个克隆的人基因文库分成１０份，小量提取ＤＮＡ，利用特异性的寡核苷酸引物检测ＥＰＯ基因的存在与否。经过４轮ＰＣＲ筛选，从阳性管中取１０３个噬菌体进行铺板培养，经原位杂交获得含有ＥＰＯ基因的阳性克隆。阳性克隆的插入片段被亚克隆到质粒上。酶切分析及序列分析的结果均证明我们获得ＥＰＯ基因。ＰＣＲ－筛库法可以快速从文库中获得目的基因     

撒坝猪MYOG基因MspI多态性及其与部分生长性状的关系

 肌细胞生成素（MYOG）基因的表达产物对肌细胞的分化和肌纤维的生成有着重要的调控作用。以MYOG基因作为撒坝猪生长性状的候选基因，在通过PCR-RFLPs技术对其MspI酶切位点多态性进行检测的基础上，对该基因不同基因型与5个阶段体重和日增重性状的关系进行了分析。结果表明，撒坝猪MYOG基因MspI酶切位点2个等位基因和3种基因型均有不同频率的分布，在经历多年的开放核心群选育后仍保持了较高的遗传多态性；MYOG基因的不同基因型对撒坝猪4月龄体重和45日龄～6月龄日增重有显著影响（P<0.05），以AB型最高，AA型最低。结合前人的相关研究结果，可初步推断，MYOG基因对猪的部分生长性状确有一定影响。     

玉米胚的肌动蛋白

近年来、关于非肌细胞中存在类似肌肉细胞的的肌动蛋白的报道陆续发表了很多。肌动蛋白存在于高等植物组织中的报道也不少本文证明在玉米胚组织中存在肌动蛋白。材料和方法玉米胚取自普通玉米(Zea mays)种了。抗粘菌肌动蛋白抗体的制备参见 Lazarides。     

提高奶牛生产性能须抓好四个环节

一、防治不孕症据调查,奶牛不孕症发病率一般为30%～40%,因此,防治不孕症是奶牛饲养中不可忽视的问题。首先,要防治奶牛卵巢囊肿。若一旦发生卵巢囊肿,应肌注促黄体生成素,每头每次注射100～200单位,隔日1次,连注1～2次,使泡壁变薄,治愈率可达85%,受胎率可达90%。其次,要防治黄体囊肿,母牛排卵期间要免受被打、惊吓、饲料恶化等不良因素的刺     

肌细胞生成素基因的研究进展

对肌细胞生成素(myogenin,MyoG)基因的位置、结构、遗传多态性及检测方法等方面进行了研究,并初步探讨了MyoG基因与经济性状的关系。     

成年猪促卵泡生成素水平的动态研究

前言促卵泡生成素(Follicula-stimulatingHormone-FSH)是腺垂体嗜碱性细胞合成和分泌的一种重要的生殖激素。它对雌性动物的一系列生殖机能产生深刻的影响,主要是刺激卵巢的生长,增加卵巢的体积和重量,促进卵泡颗粒细胞的增生和发育,对卵子的成熟     

左旋卡尼汀联用促红细胞生成素治疗血液透析患者肾性贫血的疗效观察

目的：观察左旋卡尼汀联合重组人促红细胞生成素（rhEPO）治疗肾性贫血的临床疗效。方法：54例维持血液透析的肾性贫血患者随机分为三组：A组18例．透析后静脉注射左旋卡尼汀1g;B组18例．采用rhEPO 3000IU皮下注射．2～3次／N;C组18例,透析后静脉应用左旋卡尼汀1g．同时应用rhEPO 3000IU皮下注射2～3次／N。观察三组患者治疗前及治疗4、8、12周的血浆白蛋白、血红蛋白、红细胞体积的情况。结果：随着治疗的进行,A组血浆白蛋白显著升高,与B组比较．差异有显著性（P〈0．05）;C组血浆白蛋白、血红蛋白上升最明显,与A、B组比较差异有显著性（P〈0．05）;C组rhEPO用量明显低于B组。结论：左旋卡尼汀可改善维持血液透析患者的状态．提高rhEPO的疗效．减少rhEPO的用量。     

LHR在不同繁殖期牦牛睾丸组织的表达比较

【目的】探讨不同繁殖季节牦牛睾丸促黄体生成素受体(LHR)在牦牛睾丸的定位与表达变化,为牦牛繁殖季节性调控研究提供依据.【方法】用特殊染色结合生物显微技术观察不同繁殖期成年牦牛睾丸组织学特征变化,应用免疫组化法检测LHR在牦牛睾丸组织的分布和定位.【结果】光镜观察表明,不同繁殖期成年牦牛睾丸组织结构差异不明显,生精上皮及间质PAS阳性表达明显,AB主要在生精小管基膜阳性表达,PAS及AB均为繁殖期表达强于繁殖间期.免疫组化结果显示,LHR在繁殖期牦牛睾丸leydig细胞及生精上皮均为弱阳性分布,而在繁殖间期仅强表达于leydig细胞.【结论】高原地区牦牛睾丸组织繁殖间期以酸性粘多糖为主,繁殖活动增强主要与中性粘蛋白关系密切,LHR参与了不同繁殖期牦牛睾丸功能变化的调控.     

共轭亚油酸对C2C12肌细胞生脂和生肌分化的影响

本研究分析了共轭亚油酸(CLA)对C2C12肌细胞生脂转分化和生肌分化的影响。分别培养并诱导C2C12鼠源肌细胞生脂转分化和正常的生肌分化,同时分别使用终浓度为50μmol/L的c9,t11-CLA和t10,c12-CLA处理细胞,并设对照组,取生脂转分化第10天和生肌分化第8天的细胞用于实时定量PCR检测,观察c9,t11-CLA和t10,c12-CLA对C2C12肌细胞不同分化的影响。结果表明:1)与对照组相比,c9,t11-CLA促进了C2C12肌细胞的生脂转分化,显著增加了细胞内甘油三酯(TG)含量(P0.05),显著上调了细胞内脂肪酸合成酶(FAS)、CCAAT增强子结合蛋白α(C/EBPα)、过氧化物酶体增殖剂激活受体γ(PPARγ)和脂肪酸结合蛋白4(FABP4)基因的表达水平(P0.05);与对照组相比,t10,c12-CLA则抑制了C2C12肌细胞的生脂转分化,显著减少了细胞内TG含量(P0.05),显著下调了细胞内C/EBPα、PPARγ和FA BP4基因的表达水平(P0.05)。免疫印迹杂交结果显示FAS和FABP4的蛋白质表达水平也发生了与基因表达相一致的变化。2)与对照组相比,t10,c12-CLA抑制了C2C12肌细胞的生肌分化,显著减少了细胞内肌管数/细胞数(P0.05),显著下调了细胞内肌细胞生成素(MYOG)和成肌分化抗原(MYOD)基因的表达水平(P0.05);与对照组相比,c9,t11-CLA则显著上调了细胞内MYOG基因的表达水平(P0.05),对C2C12肌细胞的生肌分化有一定程度的促进作用。免疫印迹杂交结果显示MYOG和MYOD的蛋白质表达水平也发生了与基因表达相一致的变化。以上结果表明,CLA对动物骨骼肌细胞的正常生肌分化和生脂转分化都具有重要的调节作用。     

LHRH-A缓释剂促进雄性赤点石斑鱼性类固醇激素分泌和精巢发育与排精的研究

研究了促黄体生成素释放激素类似物(LHRHA)不同处理方式对雄性赤点石斑鱼性类固醇激素分泌和精子生成及精子排放的影响。对照组在0、7d二次注射生理盐水(50μg·kg-1BW),注射组在0、7d二次注射LHRHA(50μg·kg-1BW),埋植组在0d埋植LHRHA缓释剂(100μg·kg-1BW)。结果表明,通过埋植LHRHA缓释剂,血清睾酮(T)和11-酮基睾酮(11-KT)水平快速增加,显示血清睾酮和11-酮基睾酮水平与赤点石斑鱼精子生成和精子排放有密切关系。组织学观察表明,在21d,对照组和注射组鱼精巢充满了精子细胞、精母细胞和精原细胞,而在同一时间,LHRHA埋植组鱼精巢含有大量精子,表明精子排放仍在进行。在40d期间采集精液总量为对照组<注射组<埋植组,差异显著。当注射组在处理14d后精液量逐渐回落到对照组水平时,埋植组仍然维持较高精液量水平。各组采集的精子的活力与采集的精液量呈正相关,而精子密度没有显著差异。数据显示,LHRHA缓释剂能显著增加赤点石斑鱼的精液量及延长精子排放时间而不改变精子的质量。