绵羊骨髓间充质干细胞分离培养与鉴定

旨在分离绵羊骨髓间充质干细胞(sheep bone marrow mesenchymal stem cells, SBMSC),建立绵羊骨髓间充质干细胞系,为相关研究提供种子细胞。取新生健康绵羊肋骨为试验材料,利用贴壁法分离获得SBMSC;取生长良好的P3代细胞通过免疫荧光,进行CD73、CD90、CD105、CD106表型鉴定;取生长良好的P3代细胞分别进行成软骨、成脂、成骨方向的诱导,对诱导结果分别进行阿利新蓝、油红O和茜素红染色,鉴定分化结果。SBMSC呈成纤维样贴壁生长;体外培养P3代细胞表面标记物CD73、CD90、CD105和CD106完全符合标准;P3代细胞经软骨、脂肪、骨方向诱导3周后,经阿利新蓝染色,细胞呈亮蓝色;经油红O染色,细胞质内出现橙红色脂滴;茜素红染色表明聚集的细胞团中央能形成钙化结节。说明SBMSC经体外诱导培养后可向软骨细胞、脂肪细胞和成骨细胞分化,并具有明显的成软骨、成脂和成骨表型,表明SBMSC具有多向分化潜能。通过贴壁培养法建立了SBMSC完整的体外培养体系,为绵羊育种等方面提供种子细胞。     

D型多杀性巴氏杆菌和绵羊肺炎支原体引起山羊的混合感染

2018年9月广西某羊场部分山羊发生流涕、咳嗽、呼吸困难和体温升高等临床症状的疾病,为确诊发病原因并提供治疗方案,采用病原分离培养、PCR扩增鉴定的方法进行诊断,并对分离菌进行生化鉴定、致病性试验和药敏试验。结果显示,病料在血平板有圆形的小菌落生长,革兰阴性小球短杆菌,而在PPLO培养基上不生长;病料的PCR扩增结果显示绵羊肺炎支原体和多杀性巴氏杆菌均为阳性;所分离到的病原菌经生化鉴定,该菌符合多杀性巴氏杆菌的特性;用多杀性巴氏杆菌种属和D型多杀性巴氏杆菌特异性引物扩增为阳性;致病性试验显示该菌对小鼠有很强的致病性;药敏试验显示该菌对头孢他啶、头孢噻肟、氧氟沙星高度敏感,对复方新诺明、强力霉素、红霉素、青霉素为耐药。结果表明该病是由绵羊肺炎支原体和D型多杀性巴氏杆菌混合感染引起。     

奶牛支气管肺炎的类症鉴别及防治

支气管肺炎也叫小叶性肺炎。小叶性肺炎的炎症仅侵犯1个或几个肺小叶,患病的肺泡充满卡他性渗出物及脱落的上皮细胞,所以,又称为卡他性肺炎。1病因通常在奶牛遭受风寒感冒和饲养不当而使牛机体抵抗力降低时,便可发生微生物感染而致病。此外,机械性刺激或化学因素的作用,如吸入尘埃和刺激性氨和毒气、烟雾等,直接对肺刺激也可引发炎症。     

18S rRNA／rDNA序列分析技术在瘤胃原虫分类学研究中的应用

作者指出了反刍动物瘤胃原虫分类学研究中的难点，介绍了原虫分类学中新兴的分子生物学指标(18S rRNA／rDNA序列同源性)，综述了18S rRNA／rDNA序列分析技术在瘤胃原虫分类研究中的应用。     

饲料精粗比对肉牛生长性能和瘤胃发酵参数的影响

为了探索饲料精粗比对肉牛生长性能和瘤胃发酵参数的影响。本试验采用随机数字表法将80头体质量在(150±2.5)kg,身体健康、体况良好、膘情良好的西门塔尔牛均分成4组,每组20头,分别为试验Ⅰ组(日粮精粗比为75:25)、试验Ⅱ组(日粮精粗比为70:30)、试验Ⅲ组(日粮精粗比为65:35)和试验Ⅳ组(日粮精粗比为60:40),试验周期为140 d,分别在记录育西门塔尔牛的每日采食量、初重、末重的基础上,计算出西门塔尔牛的平均日采食量、平均日增重和料重比,并对西门塔尔牛瘤胃胃液中的pH值、氨态氮、乙酸、丙酸、丁酸、乙酸/丙酸和总挥发性脂肪酸进行测定。结果显示,不同的饲料精粗比会影响肉牛的生长性能和瘤胃发酵参数,其中精粗比为60:40的日粮饲喂肉牛对肉牛的生长性能和瘤胃发酵作用效果最优。建议肉牛饲喂日粮的精粗比为60:40。     

不同比例发酵饲料桑替代基础饲粮对肉牛瘤胃发酵、瘤胃细菌与真菌菌群结构的影响

本研究旨在探究不同比例发酵饲料桑替代基础饲粮对肉牛瘤胃发酵、瘤胃细菌与真菌菌群结构的影响。选取体重为（287.45±22.63） kg、日龄相近的西门塔尔杂交公牛30头,随机分为3组,分别为对照组、NT1和NT2组,每组10个重复。对照组给予基础饲粮,NT1和NT2组分别以10%和20%发酵饲料桑等量替代基础饲粮。试验预试期14 d,正试期116 d。结果表明：1）与对照组相比,NT1组和NT2组瘤胃液戊酸的含量显著提高（P<0.05）。2）与对照组相比,在门水平上,NT2组厚壁菌门与拟杆菌门比值（F/B）显著增加（P<0.05）;在属水平上,NT2组普氏菌属（Prevotella）细菌相对丰度显著降低（P<0.05）,未分类颤螺旋菌科（unclassified＿Oscillospiraceae）和毛螺旋菌科UCG-008(Lachnospiraceae＿UCG-008)细菌相对丰度显著提高（P <0.05）。此外,与对照组相比,NT2组中瘤胃细菌富集于环境信息处理途径、信号转导途径、双组分系统和耐药性：抗菌途径的相对丰度显著上升（P<0.05）,而富集于...     

Production and Identification of Clone Sheep Using Bone Marrow Mesenchymal Stem Cells as Donor Cell

In order to obtain the cloned sheep using bone marrow mesenchymal stem cells（BMSCs）as the donor cells,the BMSCs of sheep were chosen and reconstructed embryos were built to transfer.10 published microsatellite markers were chosen,and the DNA samples from clone sheep,donor cells and surrogate ewes were amplified,and the relationship of father-son（RCP）was analyzed using the Quantity One for genotyping.The results showed that the reconstructed embryos were successfully built for electric fusion using sheep BMSCs as nuclear donor,and making nuclear transplantation into enucleated mature oocytes of which the fusion rate was 80.62%.20 surrogate ewe were chosen to be implanted with the reconstructed embryos at morula stage by implant surgery,and 5 lambs were born and only 3 were survived.The genotype of cloned sheep was in line with the dornor cell and the RCP were more than 99.999%.In conclusion,the first clone sheep were obtained successfully by using BMSCs as a nuclear donor in this experiment.     

绵羊肺炎支原体黏附因子的定点突变及原核表达

本研究采用点突变PCR方法成功克隆并表达了绵羊肺炎支原体(Mycoplasma ovipneumoiae,M.O)内蒙古分离株(SZWQ株)的黏附因子基因(SZWQ-860)。表达产物经SDS-PAGE电泳检测,与预期目的蛋白的大小一致,将重组蛋白纯化后经Western blot检测,结果表明重组蛋白具有良好的免疫反应性。     

科苑采撷

石灰在畜牧业生产上的妙用①预防仔猪白痢。在饲料中添加0.3%石灰粉,煮熟后喂哺乳母猪,从产仔后第10天开始添喂,喂7天后停7天,如此反复,直到仔猪开食,可有效预防仔猪白痢。②浸泡消毒。将染病皮张放入10%石灰乳中浸泡2小时,然后取出晾干即可。妙法治疗大牲畜伤风感冒①谷子500克(炒熟),食醋250克,混合1次灌服,每天1次,连用3天。②生姜250克,大葱250克,茅草根100克,水煎汁1次灌服,每天1次,连用3天。③防风75克,荆芥50克,薄荷75克,水煎汁1次灌服,每天1次,连用3天。冬季给牛添喂尿素效果好在喂尿素时,饲料内必须有一定量的碳水化合物,以供应瘤…     

哈萨克羊、阿勒泰羊、巴什拜羊遗传多样性的AFLP分析

利用11对AFLP引物组合,检测了哈萨克羊、阿勒泰羊、巴什拜羊池DNA遗传变异,构建了各品种的AFLP DNA 指纹图谱,根据AFLP分析结果,统计了每个引物组合在各品种中检测到的多态性条带,计算了3个品种的遗传相似系数,并据此构建了UPGMA聚类关系图,分析了它们的遗传关系.结果表明:11对AFLP引物组合在3个地方绵羊品种中共检测到310条带,平均每个引物组合产生28.18条带,变化范围在25～34条,其中多态性条带32条,占扩增总带教的10.32%,每对引物平均扩增多态性带2.909条.品种间的遗传相似系数以哈萨克绵羊与阿勒泰绵羊的最高(O.699),哈萨克绵羊与巴什拜绵羊最小(0.592),聚类结果与这些羊的育成史、分化及地理分布一致.