猪场中各类型猪的药物保健

猪场要根据猪只生长发育不同阶段可能发生的各种疾病,有针对性的选用某些有效药物通过饲料或饮水中添加,进行药物保健,可有效的提高动物机体的免疫力与抗病力。现将猪场的药物保健介绍如下。1常用的保健药物     

产褥期子宫炎对奶牛抗氧化能力、部分细胞因子、结合珠蛋白的影响

通过检测顺产后患产褥期子宫炎奶牛抗氧化能力、细胞因子变化和结合珠蛋白变化情况,为后期产褥期子宫炎治疗保健研究提供参考。选用20头产后健康荷斯坦奶牛为对照组(N组),产褥期子宫炎5例(PM),产后前10d检测体温;分别在产后3、7、14、21d经颈静脉采血,用试剂盒检测抗氧化能力、部分细胞因子和结合珠蛋白。结果显示:PM组体温在4~10d之间高于N组,其中第5、8天差异显著;PM组CAT、T-AOC、GSH-Px分别在3、7、7d显著高于N组,2组SOD、MDA差异不显著;N组IL-6、TNF-α分别在21、14d显著高于PM组。结果表明:产褥期子宫炎奶牛CAT、T-AOC、GSH-Px等抗氧化指标升高,细胞因子IL-6、TNF-α降低,进行药物对奶牛产褥期子宫炎的治疗保健效果评价试验时可参考上述变化显著的指标。     

颈静脉灌注精氨酸对泌乳中期奶牛血清生化和免疫指标的影响

本文旨在研究颈静脉灌注精氨酸对泌乳中期奶牛血清生化和免疫指标的影响。采用3×3复式拉丁方试验设计,选择6头体重、胎次、泌乳期、泌乳量和体况基本一致的荷斯坦奶牛为试验动物,随机分为3组(每组2头),分别为酪蛋白组(对照组)、精氨酸组(灌注37.66 g/d)、丙氨酸组(与精氨酸组等氮,灌注77.24 g/d);每个试验期为22 d(7 d灌注+15 d间隔),在每个试验灌注期的最后1 d晨饲前采血,测定血清生化和免疫指标。结果表明:精氨酸组的奶牛血清中总蛋白、免疫球蛋白G(Ig G)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)浓度要显著高于其他2组(P0.05),白球比、白细胞介素1(IL-1)浓度显著高于丙氨酸组(P0.05),但是牛奶中体细胞数显著低于其他2组(P0.05),而血清中谷丙转氨酶、谷草转氨酶活性,免疫球蛋白A(Ig A)、免疫球蛋白E(Ig E)、白细胞介素6(IL-6)浓度在组间无显著差异(P0.05)。综上,灌注精氨酸能够通过提高血清总蛋白、Ig G及IL-1、TNF-α的浓度,从而一定程度上增强泌乳奶牛机体的免疫力和胎儿的被动免疫力。     

刺五加多糖对断奶仔猪血液免疫指标的影响

本试验旨在探讨刺五加多糖(Acanthopanax senticosus polysaccharide,ASPS)对断奶仔猪血液免疫指标的影响。试验选用96头(28±3)日龄的"长白×约克夏"二元杂交断奶仔猪,随机分成6组(每组4个重复,每个重复4头猪)。对照组饲喂基础饲粮,试验组饲喂在基础饲粮中分别添加150、300、500、800和1 000 mg/kg ASPS的试验饲粮,试验期21 d。结果表明:饲粮中添加ASPS对仔猪外周血红细胞数量和中性粒细胞数量无显著影响(P>0.05),但能显著增加外周血白细胞数量和淋巴细胞数量(P<0.05),且随ASPS添加水平增加,白细胞数量和淋巴细胞数量呈二次曲线变化(P<0.01)。添加ASPS能显著提高仔猪血清细胞因子白细胞介素-2(IL-2)和干扰素-γ(IFN-γ)含量(P<0.05),对白细胞介素-4含量无显著影响(P>0.05),且随ASPS添加水平增加,IL-2(P<0.05)和IFN-γ含量(P<0.01)呈二次曲线变化。ASPS对仔猪血清免疫球蛋白G、免疫球蛋白A、免疫球蛋白M抗体水平均无显著影响(P>0.05)。ASPS对仔猪外周血白细胞数量和淋巴细胞数量及血清IL-2和IFN-γ含量的影响存在剂量依赖关系,500～1 000 mg/kg的ASPS能显著(P<0.05)或极显著(P<0.01)提高仔猪外周血白细胞数量、淋巴细胞数量,促进IFN-γ分泌,800 mg/kg的ASPS能显著促进IL-2分泌(P<0.05),而当剂量低于500 mg/kg时,这种影响效果不显著(P>0.05)。由此可见,ASPS可剂量依赖性地提高断奶仔猪外周血白细胞数量和淋巴细胞数量,增加血清细胞因子IL-2、IFN-γ的分泌,提高仔猪的免疫功能。     

了解早期断奶仔猪的生理应激

仔猪断奶是影响猪生产的最大应激因素,足以导致肠道和免疫系统功能障碍,从而降低仔猪的健康、生长和饲料摄入量,尤其在断奶后第一周表现明显。目前主要是通过技术改善猪舍、营养、健康和管理以尽量减少断奶应激带来的负面效应,但是应该更深入了解应激对生物学方面的影响,改善策略,克服断奶应激。     

重组大肠杆菌不耐热肠毒素的表达及对小鼠胚胎稳定性的影响

为研究大肠杆菌不耐热肠毒素（LT）对小鼠胚胎稳定性的影响,运用大肠杆菌表达系统制备了具有生物活性的重组大肠杆菌LT,用重组LT通过腹腔注射处理妊娠小鼠,分析了LT对小鼠胚胎稳定性的影响。首先采用PCR方法从产毒大肠杆菌菌株44815基因组中扩增LT的A、B亚基基因,将其插入到pET-20b（＋）原核表达载体pelB信号肽的下游,分别构建成LTA和LTB分泌型表达载体;将载体分别转化大肠杆菌BL21（DE3）pLysS,在IPTG的诱导下进行表达,利用Ni-NTA琼脂糖凝胶从细菌周质释放液中提取和纯化重组LTA和LTB蛋白;利用细胞毒性试验检测重组蛋白的生物活性。然后用制备的重组LT注射妊娠6d的小鼠,连续注射3d后,统计小鼠的胚胎存活率。同时用ELISA方法检测小鼠血清中与胚胎稳定性密切相关的Th1型细胞因子（IFN-γ、IL-2）和Th2型细胞因子（IL-4、IL-10）及IL-β的表达水平。结果表明,采用分泌性表达策略实现了重组LT在大肠杆菌中的高效分泌表达,LTA和LTB的表达量分别达68、62mg/L。表达的重组LT具有明显的细胞毒性作用;用LT处理妊娠小鼠,胚胎的存活率为32%,明显低于对照组;小鼠血清中Th1型细胞因子IFN-γ和IL-2的含量明显高于对照组（P〈0.01）,分别为对照组的2、3倍。同时细胞因子IL-1β为对照组的2倍（P〈0.01）,而稳定胚胎发育的Th2型细胞因子IL-4、IL-10没有明显变化（P〉0.05）。据此推测,LT可能与大肠杆菌性肠炎引起妊娠家畜流产有关,LT对胚胎稳定性的影响除与LT的直接毒性有关外,可能还与LT介导的免疫调节异常有关。     

共轭亚油酸对体外培养奶牛外周血单核细胞和脾细胞增殖和基因表达的影响

按照不同的饲喂方式(饲喂对照脂肪(CON)或添加共轭亚油酸(CLA))和屠宰时间,将25头初产荷斯坦奶牛分为5个处理组(每组5头).每日CLA的饲喂量为6.0g反10-顺12-CLA异构体和5.7g顺9-反11-CLA异构体.最初的1组(IG)在产后第1天屠宰,其余20头牛分别于产后42和105 d屠宰.分娩前7d和屠宰前采血分离外周血单核细胞(PBMC).屠宰解剖时采集脾脏分离脾细胞用于组织病理学检测.采用MTT法和Alamar Blue测定法检测细胞活力和刀豆蛋白A刺激的细胞增殖反应.利用实时定量多聚酶链式反应(qRT-PCR)法测定未经刺激的外周血单核细胞及脾细胞中细胞因子(白细胞介素-4、白细胞介素-10、白细胞介素-12、肿瘤坏死因子-a和干扰素-7)的表达.结果表明,产后1～105 d PBMC刺激指数有所提高,但饲喂CLA组与对照组差异不显著.产后105 d,与对照组相比,饲喂CLA组奶牛脾细胞刺激指数有所下降.相同时间点饲喂CLA未影响细胞因子的基线表达.与IG组相比,PBMC中白细胞介素-4的表达无差异,而白细胞介素-10和肿瘤坏死因子-α表达量在PBMC和脾细胞这两种细胞中表达亦无差异.产后42 d,饲喂CLA组脾细胞中白细胞介素-4的表达量上升,产后105 d CLA组奶牛PBMC和脾细胞中干扰素-γ的表达量有所提高.与IG组相比,白细胞介素-12表达量在产后105 d的PBMC及产后42 d的脾细胞中均有提高.饲喂CLA和不同屠宰时间并未影响脾脏的组织病理情况.因此,本研究结果表明CLA对脾细胞的分裂素诱导活性具有抑制作用.     

猪细胞因子cDNA表达文库的构建及其基因的克隆鉴定

为克隆和研究猪细胞因子及相关基因,应用建库试剂盒成功构建了猪细胞因子cDNA表达文库。采取健康猪外周血及淋巴结,分离单个核细胞,经LPS PHA联合刺激不同时间后,提取总RNA。将各组样品混合,分离纯化mRNA。反转录合成cDNA第一链和第二链,与EcoRI和HindⅢ接头连接。酶切和过柱分级分离后,与λScreen载体连接,经体外包装转染E.coliER1647宿主菌,进行文库容量测定和扩增。以扩增文库的DNA为模板,利用已知基因引物克隆猪IL-2和IL-4的cDNA并进行测序。结果表明,成功构建了猪细胞因子cDNA文库,文库原始库容量为8×105,插入片段在300~2 000 bp,扩增得到特定的IL-2和IL-4基因,说明文库质量高、代表性强,为进一步从文库中筛选未知细胞因子及相关基因提供了有效的工具。     

不同细胞因子对水牛原始生殖细胞传代培养的影响

为探讨不同细胞因子对水牛原始生殖细胞（PGCs）传代培养的影响，将PGCs分别采用A、B、C、D、E、F和G共7种培养基进行培养，即A组：基础液＋10ng／mL白血病抑制因子（LIF）＋10ng／mL碱性成纤维细胞生长因子（bFGF）；B组：基础液＋20ng／mL LIF＋20ng／mL bFGF；C组：基础液＋20ng／mL LIF＋10ng／mL bFGF；D组：基础液＋20ng／mL LIF；E组：基础液＋20ng／mL LIF＋20ng／mL bFGF＋20ng／mL干细胞因子（SCF）；F组：基础液＋20ng／mL LIF＋40ng／mL bFGF＋40ng／mL SCF；G组（对照组）：基础液。将机械法分离的PGCs小集落接种到水牛胎儿成纤维细胞（BEF）饲养层上进行传代培养。结果，原代时，A、B、C、D、E和F组的克隆数目都显著高于对照组（P％0．05），其中E和F组的克隆数目显著高于A组（P〈0．05），而与B、C、D组差异均不显著（P〉0．05）；1～8代时，B、C、D、E、F组的克隆数目显著高于A组（P〈0．05）；对照组传代数仅为2代，A组为5代，而B、C、D、E和F组均为8代以上。结果表明，在传代过程中，LIF起主要作用，20ng／mL的LIF浓度可以满足水牛PGCs传代培养的需要。     

共轭亚油酸对动物免疫功能的调节

共轭亚油酸具有广泛的生物学功能,它对增加机体免疫球蛋白含量,促进免疫细胞增殖、细胞因子产生、吞噬细胞的功能,基因表达都具有调节作用。本文就共轭亚油酸的免疫调节作用进行了阐述。