猪精子体外获能后其质膜完整性的影响

精子质膜功能和结构的完整性对于精子的受精能力十分重要。常规检测，例如曙红染色仅能检测质膜的结构完整性，不能评价质膜的功能性。早在1966年，Dreviuslo等曾描述过哺乳动物精子弯尾（Tailcoiling）现象。低渗肿胀检测（Hypoosmotic swelling test，HOST），最初被用于检测人的精子，也被应用于其他动物，例如猪、火鸡、马、牛等。这种方法能够检测精子质膜的功能状态。HOST的原理是精子质膜能够有选择地运输分子。当被放置到低渗条件下时，水会进入精子内部，并要达到一个平衡，这种内流的水会使精子体积增大、顶体肿胀、尾部弯曲。尾部弯曲这—特征比较明显，因此弯尾率可以作为评价精子质膜完整的标志。     

ω-3多不饱和脂肪酸对公猪精液质量的影响及其机制

在规模化养猪生产中,公猪的精液品质直接影响母猪的繁殖性能,这对猪场的生产成绩非常重要.多不饱和脂肪酸(PUFA)对精子质膜的流动性和脂质过氧化反应的敏感性有重要作用,同时也影响精子的授精能力.研究表明,在公猪饲粮中添加ω-3 PUFA能提高公猪精液品质,但效果重复性还不稳定;公猪饲粮中添加ω-3 PUFA能增加猪精子中ω-3 PUFA的含量和延长精液的保存时间.本文主要综述公猪饲粮中添加ω-3 PUFA对公猪精液品质的影响及其主要的作用机制,为其在现代规模化养猪生产中有效提高精液品质、猪场生产成绩和经济效益提供参考.     

超低温冷冻对俄罗斯鲟精子抗氧化酶活性的影响

为了探讨超低温（-196℃）对精子的损伤机理,采用试剂盒测定了冷冻前后俄罗斯鲟精浆和精子中超氧化物歧化酶（SOD）、过氧化氢酶（CAT）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH—PX）和谷胱甘肽还原酶（GR）等酶活性。结果表明,经过超低温冷冻保存后,俄罗斯鲟精子活力下降,添加抗冻保护液冷冻后的精浆中SOD、CAT、GSH—PX活性较鲜精组显著升高（P〈0．05）,较未添加保护液组显著降低（P〈0．05）,GR的活性则显著低于鲜精组（P〈0．05）,但显著高于未添加保护液组（P〈0．05）;添加抗冻保护液冷冻后的精子中SOD、CAT、GSH—PX活性较鲜精组显著降低（P〈0．05）,较未添加保护液组显著升高（P〈0．05）,GR活性则显著高于鲜精组（P〈0．05）,但显著低于未添加保护液组（P〈0．05）。这说明超低温冷冻对俄罗斯鲟精子的抗氧化系统产生了较大影响,成为影响精子活力的一个重要原因。     

卵母细胞胞浆内精子注射(ICSI)技术的研究进展

利用人工辅助的显微操作技术,直接将精子注射至成熟卵母细胞质的方法,称为胞浆内精子注射技术,简称ICS I(in tracytop lasm ic sperm in jection)技术。目前,该项技术已经成功地用于生产试管婴儿、研究哺乳动物的受精机理、动物转基因、家畜性控胚胎生产等领域。本文详述了ICS I技术体系的发展背景、现状及其应用等方面。     

马氏珠母贝精子的超低温保存

通过比较不同pH值（5．5-9．5）、不同盐度的海水等作为基础液对马氏珠母贝精子保存的影响,选择其中无激活精子作用又对其生理特性（活力,寿命,受精能力等）无影响者,加入二甲亚砜抗冻剂配制成超低温保存的抗冻保护液,精液与保护液按1：10和1：20的比例混合,样品按4组不同的降温程序平衡后转入液氮冷冻,比较其超低温冻存的效果。结果表明：以海水（pH7．5—8．0）为基础液,配制10％DMSO作为抗冻保护液,精液与保护液比例为1：20,在低温（0-4℃）中平衡约30min,在距液氮面15cm、5cm处分别停留5min、10min后转入液氮（-196℃）,冻存精子效果良好。冷冻24h、48h及5个月后,在38—40℃下水浴解冻复苏后,用终浓度0．25‰的氨海水刺激,精子存活率可超过60％,受精率可达80％。     

海藻糖对民猪精液冷冻保存的影响

为研究海藻糖在民猪精液冷冻中的作用,获得最佳民猪精液冷冻液成分,本试验在BTS、Modena和Zorlesco 3种稀释液基础上添加0.15 mol/L海藻糖,及在Zorlesco稀释液中分别添加0 mol/L、0.1 mol/L、0.15 mol/L和0.2 mol/L的海藻糖,研究海藻糖在不同稀释液中及其不同浓度对冷冻的民猪精子活率、质膜完整率、顶体完整率和线粒体膜电位的影响。结果表明,在Zorlesco稀释液中添加0.15 mol/L海藻糖可明显提高民猪冷冻精子的质量,使精子活率、质膜完整性、顶体完整率和线粒体活性分别达到(44.0±2.4)%、(58.2±2.4)%、(53.2±2.1)%和(51.3±2.3)%,为各组最佳(P<0.05)。将0.15 mol/L海藻糖分别添加在BTS、Modena和Zorlesco3种稀释液中发现,其中在Zorlesco稀释液添加海藻糖效果优于其他两组(P<0.05)。但海藻糖对冷冻前精子的保护作用不明显(P>0.05)。因此,在Zorlesco稀释液中添加1.5 mol/L的海藻糖能够明显提高民猪精子冷冻后质量,是民猪冷冻保存的适宜保护液。     

中华绒螯蟹精子线粒体的检测

以中华绒螯蟹(Eriocheir sinensis)肌肉、鳃和精巢为对照,从线粒体标志酶SDH活性、线粒体特异性荧光探针(Rh123)以及线粒体16S rDNA PCR扩增3个途径,探讨了该蟹精子线粒体的存在状况。研究发现,肌肉和鳃SDH酶活性较高,精巢SDH酶活性显著低于肌肉和鳃,而精子SDH酶活性则无法检测到。使用Rh123检测发现,精巢中有较强的荧光,而精子中则无法观察到。通过GenBank中的中华绒螯蟹线粒体16S rDNA序列设计引物,利用PCR扩增方法,以beta-actin做内参,检测了中华绒螯蟹肌肉、鳃、精巢和精子中线粒体16S rDNA扩增情况,发现各组织或细胞beta-actin扩增片段大小、条带宽度和亮度基本一致,表明各模板DNA量基本一致;而在同一DNA浓度下,16S rDNA的扩增片段长度虽一致,但其产物量存在明显差异,精子16S rDNA产物量显著低于其他3种组织,其条带宽度和亮度很弱;16S rD-NA扩增产物经测序分析及比对证明与已有序列完全吻合。上述结果表明,中华绒螯蟹精子中存在线粒体,但其线粒体的数量极显著低于精巢和其他组织,这也是利用灵敏度较低的SDH酶活性和Rh123探针以及常规的组织学和超微结构观察法难以检测到其精子线粒体的原因。[中国水产科学,2007,14(1):139-143]     

环境因子对日本鳗鲡精子活力影响的研究

日本鳗鲡的精子在蔗糖、EDTA－Na2溶液中呈抑制状态，当K^ 、Na^ 、Ca^2 、Mg^2 溶液渗透压过高或过低时，日本鳗鲡的精子皆处于静止状态。同样浓度的K^ 与Na^ 相比，K^ 有延长精子活动时间的作用。在低浓度的EDTA－Na2人工海水溶液中日本鳗鲡的精子可以运动。     

蜜蜂精子介导GFP基因转移研究

将pGFP-2质粒线性化,利用精子介导,通过人工授精技术导入意大利蜜蜂处女王,然后将授精王介绍到无王群繁殖后代。结果:试验群产生了一群绿色荧光阳性蜜蜂;对阳性蜂群后代分析发现,1~2日龄幼虫能检测到荧光,提取蜜蜂DNA进行PCR扩增得到预想的片断,通过RT-PC分析,从转录水平上证实转导的外源基因获得表达。结论:以绿色荧光蛋白(GFP)基因为报告基因,通过精子介导法能够生产克隆转基因蜜蜂。     

短尾鮠精子细胞和精子的超微结构研究

用透射电镜观察了短尾鮠精子细胞和精子的形态以及细胞核、拟染色体和线粒体等的结构变化规律.结果表明,随着精子细胞的发育,核质凝聚程度逐渐增强.精子细胞时期细胞器较丰富,到精子细胞后期,细胞器的形态和数量发生了较大变化.短尾鮠的精子具有椭圆的头部和复杂的中片;近侧中心粒和远侧中心粒靠近核的中央;鞭毛呈9+2轴丝结构,并具有由外膜折迭形成的波浪形的鳍状结构.