流式细胞仪在猪性别控制中的应用初探

在国内首次报道使用流式细胞仪对猪进行性别控制研究。猪精液通过流式细胞仪进行X、Y精子分离,分离精子经过数小时保存后,用于陆川母猪输卵管授精,最后产出健康仔猪。试验结果表明:①第1次(2005-10-14)精子分离的纯度为:X88%、Y83%;活力为X35%、Y21%。第2次(2006-01-13)纯度为:X70%,Y68%;活力为:X52%,Y36%。②该试验中母猪受孕率为25%,未受孕者仍然可在生产条件下继续繁殖。③受孕母猪(1头)产出健康仔猪5头,出生成活率100%,大小均匀,活力良好,哺乳期(28 d断奶)平均日增重与生产群极为接近(151.43 g1、48.93 g),但产活仔数低(生产群为8.4头/窝)。④仔猪雌性率为60%。试验结果初步表明:在该实验室现有条件下,使用流式细胞仪分离的X、Y精子,母猪通过输卵管受精可以产出健康仔猪;精子分离对仔猪哺乳期生长无明显影响;对性别比例有一定调控作用。     

卵黄对精子保护作用的机制

在过去的60年里,冷冻精液稀释液的配方发生了很大的变化,但是其中的抗冻剂却始终是卵黄、奶及甘油.由于卵黄在保存、降温、冷冻过程中对精子的保护作用机制仍是不解之谜,因而目前尚无一种有效的可避免污染的化合物来替代他们.     

利用分离的奶牛X精子冷冻精液生产体内性控胚胎试验

采用常规精液和分离的X精子冷冻精液对115头超数排卵的青年和经产荷斯坦母牛人工输精生产体内性控胚胎。结果表明,利用2支和3支性控精液给超排青年母牛输精,头均分别获得6.8枚±4.8枚和6.3枚±3.2枚可用胚胎,与常规精液的超排效果(7.2枚±5.2枚)无明显差异;利用2支和3支性控精液给超排经产母牛输精,头均可用胚胎分别为7.5枚±4.5枚和8.6枚±5.6枚,与常规精液的超排效果(6.1枚±3.2枚)相比,分别增加23%(P>0.05)和41%(P>0.05),无显著差异,但解冻后性控精子会明显影响经产母牛的受精率;对用性控精液输精生产的12枚抽样胚胎采用LAMP法进行性别鉴定并移植,结果获得了91.7%的雌性率和36.4%的受胎率。结果提示,X精子的分离过程会在一定程度上影响受精率,用分离的X精子冷冻精液对超排母牛进行人工授精生产体内性控胚胎是可行的。     

不同稀释液对犬精液的保存及效果观察

应用不同的稀释液A、B、C、D(进口稀释液)对狼犬精液进行稀释和保存,并对75头狼犬进行人工授精配种(设本交对照组进行比较),观察对精子保存时间、配种受胎率和产仔数影响。结果:稀释液A、B、C、D精子保存时间(精子活力0.5以上)分别为66.5±0.56h、62.5±0.25h、88.5±0.85h和90.5±0.52h,配种受胎率分别为73.33%、66.67%、93.33%和86.67%(本交对照组),产仔数为5.27、5.1、6.62、6.71和6.77头(本交对照组)。试验结果表明,稀释液C的精子保存时间、配种受胎率和产仔数显著高于稀释液A、B(p<0.01),与进口稀释液、本交的效果相当。     

不同月龄广西富凤麻公鸡的繁殖性能比较

[目的]明确不同月龄广西富凤麻公鸡间的繁殖性能差异和相关性,为其种质资源保护提供更好的配种条件,同时为种鸡生产提供参考依据.[方法]以广西富凤麻公鸡为研究对象,从精液品质、睾丸发育状况及血清激素等角度系统研究不同月龄公鸡间的繁殖性能差异和相关性,并使用不同月龄公鸡的精液对母鸡进行人工授精,孵化第9 d照蛋并统计受精率.[结果]5、8和18月龄广西富凤麻公鸡的精液体积和精子密度无显著差异(P>0.05,下同),18月龄广西富凤麻公鸡的精子活力较5和8月龄公鸡的精子活力极显著降低(P<0.01,下同),在精子畸形率方面则表现为18月龄广西富凤麻公鸡较5和8月龄公鸡极显著升高.广西富凤麻公鸡在5~8月龄期间,随着月龄的增长公鸡睾丸的体积和重量均呈上升趋势,睾丸曲细精管直径呈增粗趋势,血清睾酮含量呈上升趋势;但在8~18月龄期间,整体上表现为随着月龄的增长公鸡睾丸的体积和重量呈下降趋势,睾丸曲细精管直径逐渐变细,且血清睾酮含量急剧下降.广西富凤麻公鸡各繁殖性能指标间的相关性分析发现,血清睾酮含量与两侧睾丸总重量、精液体积与精子活力呈中等强度正相关,精子畸形率与血清睾酮含量、精子活力与精子畸形率呈强负相关.不同月龄广西富凤麻公鸡精液的受精率无显著差异.[结论]广西富凤麻公鸡在5~8月龄期间其繁殖性能随着月龄的增长而提高,但在8~18月龄期间整体上表现为繁殖性能随月龄的增长而下降.即8月龄广西富凤麻公鸡睾丸发育状况最佳,生产上可适当提高8月龄公鸡的利用率.     

公猪睾丸、附睾及精子中硒蛋白编码基因相对表达量分析

【目的】考察公猪生殖系统中硒蛋白编码基因表达情况,初步筛选与其繁殖性能密切相关的硒蛋白编码基因。【方法】采用RT-qPCR技术对成年和半月龄DLY三元杂交公猪的睾丸、附睾及杜洛克公猪的精子进行25个硒蛋白编码基因表达量分析,采用2~(-△△Ct)法计算各基因相对表达量。【结果】①GPX3和TXNRD2在仔公猪睾丸中显著高表达(P0.05),GPX6、SELENOM和SELENON在仔公猪附睾中显著高表达(P0.05);②GPX4、SELENOH、SELENOK、SELENOS、SELENOT、SELENOV、SEPHS2、TXNRD1等8个硒蛋白编码基因在成年公猪睾丸中表达量显著高于其余样品中表达量(P0.05);③MSRB1和SELENOI在成年公猪附睾中表达量显著高于仔公猪附睾中表达量(P0.05)。【结论】在公猪生殖系统中,13个硒蛋白编码基因表达具有组织特异性,2个硒蛋白编码基因表达受性成熟的影响,揭示这些差异表达的硒蛋白编码基因与相应器官生殖功能密切相关。     

公羊繁殖障碍的原因及对策

近年来,羊场不规范的引种、配种、粗放的饲养管理使得公羊繁殖障碍居高不下,主要表现为性欲低下,交配困难,射精量少,精子密度低,精子活力差,畸形精子多,少精或无精等。1引起公羊繁殖障碍的原因1.1遗传遗传因素对动物繁殖的影响是不可逆的,主要有隐睾和睾丸发育不全。隐睾指公畜出生后睾丸未下降到阴囊内导致睾丸生精功能受损。单侧隐睾时,虽另一侧睾丸能正常生精,但精子密度低;双侧隐睾时基本没有生育能力。隐睾是一种隐性遗传病,种公羊发病率约为0.6%,虽不高但要控制隐睾基因在羊群中的传播,因此,隐睾的公羊及其亲属均不作种用。     

鸡精液低温(5℃)和冷冻(-196℃)保存及其与受精率的关系

南农大鸡精液稀释液(NAUE)比美国贝尔滋维尔家禽精液稀释液(BPSE)和日本新泻大学家禽稀释液(ND-3)有更好的低温保存效果。低温保存9,56和114小时的受精率分别为88.9％,56.3％和29.4％。在冷冻解冻过程中,9％甘油较4％二甲基亚矾(DMSO)对精子活力有良好的保护效果,但新鲜的精液用甘油平衡120分钟后输精,却表现抗受精作用。用最终浓度4％DMSO的冷冻精液输精,获得42.9％的受精率。甘油处理的精子在平衡120分钟后,并不引起精子释放谷草转氨酶(GOT)和乳酸脱氢酶(LDH),但随着冷冻解冻过程其释放量显著增加(P<0.01)。甘油或DMSO处理后的畸形精子主要表现为颈部弯曲。甘油处理的精子,解冻后有中段膨大和线粒体鞘裸露的现象,但顶体及核膜无明显的变化。     

猪精子的体外获能与体外受精

通过5个实验研究了应用咖啡因，肝素和I－A23187促进猪精子体外获能的效果，比较了不同受精次数和不同种类的精液进行猪卵子体外受精的效果，试验表明，用肝素和咖啡因协同作用，猪精子体外获能的效果好，采用2－3次受精法进行体外受精可以提高受精率，使用新鲜精液，新鲜附睾精液或冷冻附睾精液进行体外受精，其效果差异不显著。     

野生中国大鲵与人工繁殖子一代雄性形态及精液特性的比较

大鲵人工繁殖子一代雄鲵与野生雄鲵在体重均为3.25kg时,肥满度分别为0.6115和0.5483;在全长均为65cm时,肥满度分别为0.9103和0.7280,因此子代雄鲵比野生雄鲵略显肥短。进行二次催产率试验,野生雄鲵催产率为28.6%～37.5%,1998年子一代雄鲵催产率为75%～80.2%,1999年子一代雄鲵催产率为72.2%,子代比野生代催产率显著高(P<0.05)。在体重相同时,子代雄鲵精液量比野生雄鲵精液量多20%～40%,最大精液量一尾雄鲵可挤30～40mL,精子密度子代比原种稍高,最高密度为(5.52～8.3)×106ind/mL,精子体积占精液的8.0%～13.3%。pH值均为弱酸性或中性(6.4～7.1);精子大小为(170～210)μm×(3.8～4.5)μm。