培养基和外源激素对‘章姬’草莓茎尖培养的影响研究

摘 要：为获得高效的适合‘章姬’草莓茎尖培养的技术方案,试验通过不同培养基和外源激素对‘章姬’草莓茎尖培养的研究,建立其组培快繁体系,结果表明,在不同的处理中,最适宜的培养基和培养方式如下：（1）剥取的茎尖越大,萌发率越高。（2）在改良White培养基配方 蔗糖40 g/L,pH 5.8的培养基培养下的茎尖成活率最高(80%)。（3）综合增殖系数与增殖苗的品质等多重因素获得增殖培养适合培养基为MS 6-BA 0.5 mg/L NAA 0.05 mg/L 蔗糖30 g/L,增殖系数为3.8。（4）生根培养基以1/2MS 蔗糖30 g/L为宜。采用各项最适的方案进行‘章姬’草莓的培养,可以达到优质高效的目的。     

鸡p15因子抑制MDCC-MSB1细胞的增殖及端粒酶活性

为探讨鸡p15基因的生物学功能,试验构建了鸡p15基因的真核表达载体pcDNA3.1( )-p15,并转染到鸡MDV转化的淋巴细胞系MDCC-MSB1,应用G418筛选掉未转染的细胞,对存活细胞p15蛋白的表达、细胞增殖力、群体倍增时间、细胞周期和端粒酶的活性进行了检测。结果表明,与转染空质粒pcDNA3.1( )细胞相比,转染了p15基因的细胞稳定表达了p15蛋白;细胞的增殖受到了抑制,抑制率达45%～74%;群体倍增时间从27h延长至416h;流式细胞仪分析细胞周期发现,p15蛋白引起了细胞多停滞于G0/G1期,S和G2/M期细胞比例下降;端粒酶活性受到抑制。     

端粒、端粒酶与肿瘤

端粒,端粒酶与肿瘤的关系是当今生物学,医学研究的热点之一。端粒是一种封闭了真核染色体末端的脱氧核糖核酸。它与端粒结合蛋白结合在一起,对染色体起到了保护的作用,另外,端粒的长度和细胞增殖有很大关系。端粒酶是一种特异的染色体末端转移酶,它的存在解决了染色体末端复制引缩问题,而且认为端粒酶的过度表达和细胞的永生化和癌变直接相关。端粒酶的结构和功能决定了它在肿瘤与癌症治疗等方面具有广泛的应用前景。文章综述了端粒、端粒酶的结构、功能,以及端粒与端粒酶活性在细胞癌变中的重要作用。     

微小隐孢子虫端粒序列及端粒酶活性的研究

为了探讨我国微小隐孢子虫(C.parvum)的端粒序列,试验根据国外已报道的端粒重复序列5’-CCTAAA-3’设计寡聚核苷酸探针(CCTAAA)5,并用地高辛标记,C.parvum基因组DNA经Bal31-HindⅢ酶切后进行Southern印迹杂交鉴定;并在此基础上,采用改进的端粒重复序列扩增(TRAP)法首次对子孢子和卵囊时期C.parvum的端粒酶活性进行检测。结果表明:C.parvum基因组DNA与探针(CCTAAA)5杂交,获得了较好的杂交条带,随着Bal31-HindⅢ酶切时间的延长,杂交信号逐渐减弱,说明C.parvum端粒序列定位在染色体的末端,与国外报道的C.parvum端粒序列一致,为5’-CCTAAA-3’;检测C.parvum端粒酶活性时发现,子孢子时期端粒酶具有活性,卵囊中未检测到端粒酶活性。     

年龄推测的分子生物学方法

年龄结构是研究种群动态的重要基础。本文介绍了有别于传统形态学方法鉴定动物年龄的3类估计年龄的分子生物学方法;1）氨基酸构型比与年龄正相关分析法;2）端粒平均长度与年龄负相关分析法;3）DNA损伤或与蛋白质交联程度与年龄相关分析法。详细阐述了这些方法在实际工作中的适用对象、应用条件、方法和原理。并对野生动物年龄推断的研究方法进行了展望。     

保存8~33年的苹果试管苗增殖能力与端粒长度分析

为分析苹果试管种质端粒长度与繁殖能力、衰老的关系,探索端粒长度与苹果试管种质离体保存年限的关系,对保存多年的不同继代次数的3个苹果品种试管苗进行了表型、增殖能力以及端粒长度的研究。结果表明:保存了8~33年的‘富士’、保存8~27年的‘金冠’和保存8~25年的‘嘎拉’苹果茎尖试管苗继代增殖能力大部分没有变化,表型未发生明显变化;3个品种不同继代次数30 d苗龄试管苗叶片端粒长度均差异不显著;继代73代苗龄分别为10、30、50和90 d的试管苗叶片端粒长度变化因品种而异,‘富士’‘嘎拉’差异不显著,‘金冠’50 d苗龄的最长,90 d苗龄的最短;继代71代苗龄30 d的‘金冠’试管苗茎段端粒长度显著高于叶片,茎段和愈伤组织、叶片和愈伤组织之间差异不显著,‘嘎拉’表现为愈伤组织>叶片>茎段。苹果试管苗端粒长度变化与其增殖能力、表型及同一继代周期内衰老程度的变化相吻合。     

端粒、端粒酶与肿瘤

端粒，端粒酶与肿瘤的关系是当今生物学，医学研究的热点之一。端粒是一种封闭了真核染色体末端的脱氧核糖核酸。它与端粒结合蛋白结合在一起，对染色体起到了保护的作用．另外．端粒的长度和细胞增殖有很大关系。端粒酶是一种特异的染色体末端转移酶．它的存在解决了染色体末端复制引缩问题．而且认为端粒酶的过度表达和细胞的永生化和癌变直接相关。端粒酶的结构和功能决定了它在肿瘤与癌症治疗等方面具有广泛的应用前景。文章综述了端粒、端粒酶的结构、功能．以及端粒与端粒酶活性在细胞癌变中的重要作用。     

黄姑鱼染色体识别与重复序列定位

黄姑鱼是我国重要的海水经济鱼类。然而,由于细胞遗传标记匮乏,黄姑鱼染色体仍然难以辨识。为了提高黄姑鱼染色体的配对识别水平,本研究利用荧光原位杂交(fluorescence in situ hybridization,FISH)、吉姆萨染色和荧光染色技术分析了黄姑鱼染色体的特征。以总DNA为探针进行基因组DNA荧光原位杂交(genomic fluorescence in situ hybridization,GISH),从而获得黄姑鱼染色体图谱,可使每对染色体呈现特定的荧光信号。依据GISH荧光信号分布模式,可以辨识黄姑鱼的24对染色体。18S r DNA FISH结果显示,18S r DNA只有一对信号,分布于1号染色体臂间,并与吉姆萨染色呈现的次缢痕、DAPI阴性带和DPI染色高亮区域同位。5S r DNA有一强一弱两对信号,信号强的一对分布于1号染色体着丝粒端,信号弱的一对分布于4号染色体的远端。端粒信号在所有染色体的端部显示,但个别染色体一端信号微弱。本研究结果丰富了黄姑鱼的细胞遗传标记,为解决黄姑鱼染色体辨识问题提供参考依据,也为进一步研究石首鱼科染色体进化提供了资料。     

四种树木端粒酶活性与树龄及叶位的相关性

为探究端粒酶活性与树龄以及叶位是否存在一定的关系,应用TRAP法对不同年龄的油松、银杏、楸树、国槐叶片及油松和银杏同一棵树不同叶位的叶片进行端粒酶活性的测定。结果表明,油松端粒酶活性同树龄无明确的相关性,而楸树、国槐的端粒酶活性随着树龄增加而表现为增加的趋势。端粒酶活性与叶位相关,越靠近顶端的叶片端粒酶活性较高,而靠近下端的叶片端粒酶活性较低。